藏藥山苦荬的生藥鑒定

周珊珊，譚 睿，宋良科，羅小文，顧 健

(1.西南交通大學(xué)，四川成都 610031;2.西南民族大學(xué)，四川成都 610051)

山苦荬為菊科植物山苦荬Ixeris chinensis(Thunb.)Nakai的干燥全草，花期采集，就近以流水洗去泥土，除去枯葉，陰干。其廣泛分布于海拔500～4 000 m的山坡草地及青藏高原區(qū)，1995年收載于藏藥部頒標(biāo)準(zhǔn)。山苦荬味苦，性寒，具有清熱解毒，消腫排膿，涼血止血等功效［1］。目前關(guān)于山苦荬的現(xiàn)代研究?jī)H見(jiàn)少量化學(xué)成分和藥理活性研究報(bào)道［2-3］，因此進(jìn)行山苦荬的生藥學(xué)初步研究，為進(jìn)一步的藥理與藥效學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 M165C型連續(xù)變倍體視顯微鏡(LEICA)，奧林巴斯IX71倒置顯微鏡(日本Olympus)，光學(xué)顯微鏡，UV-2450紫外-可見(jiàn)分光光度儀(日本SHIMADZU公司)，REPROSTAR 3薄層掃描儀(CAMAG)。

1.1.2 材料與試劑 實(shí)驗(yàn)用山苦荬藥材于2011年11月購(gòu)于四川省成都市新荷花池藥材市場(chǎng)，經(jīng)西南交通大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院宋良科鑒定為菊科植物山苦荬Ixeris chinensis(Thunb.)Nakai的干燥全草。β-谷甾醇對(duì)照品(本實(shí)驗(yàn)室提取的單體，純度≥90%)，甲醇、硫酸、乙醇、石油醚、丙酮均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 藥材性狀 全草高10～30 cm，全株無(wú)毛。根長(zhǎng)5～25 cm，棕褐色，圓柱形，具縱皺紋和殘留的須根，質(zhì)脆，易折，斷面黃綠色。莖呈細(xì)長(zhǎng)圓柱形，有縱棱，直徑2～5 mm，表面黃褐色，質(zhì)輕脆，易折斷，斷面中央具細(xì)空洞。葉多皺縮或破碎，完整者濕潤(rùn)展平后呈條狀披針或篦狀披針形，邊緣具疏羽狀齒，有短葉柄或近無(wú)柄，葉脈突出。花淡紫色或黃白色，舌片先端5齒裂，冠毛白色，氣微，味苦。

1.2.2 解剖學(xué)特征 ①根橫切面:根橫切面具次生根被，細(xì)胞壁較厚，排列緊密;皮層寬廣，由薄壁細(xì)胞組成;韌皮部狹窄，細(xì)胞較小，壁薄，韌皮部外側(cè)具溶生式分泌腔;形成層不明顯;木質(zhì)部由導(dǎo)管、木薄壁細(xì)胞和木纖維組成，導(dǎo)管3～4個(gè)徑向散列，木射線由數(shù)列薄壁細(xì)胞徑向延長(zhǎng)組成(圖1);②莖橫切面:木栓層細(xì)胞方形，栓內(nèi)層細(xì)胞較大，皮層不明顯。韌皮部外側(cè)具帽狀結(jié)構(gòu)的維管柱鞘，形成不連續(xù)的環(huán)帶;韌皮部由篩管和薄壁細(xì)胞構(gòu)成;木質(zhì)部由導(dǎo)管和木薄壁細(xì)胞組成，少數(shù)導(dǎo)管中有樹(shù)脂狀物，射線明顯，寬窄不一，木質(zhì)部具不連續(xù)的環(huán)髓纖維和分泌腔，分泌腔為細(xì)胞破裂形成的溶生式分泌腔;髓部寬廣，由較大的薄壁細(xì)胞組成，細(xì)胞間隙大(圖2)。

1.2.3 藥材粉末特征［4］根的粉末棕黃色，木纖維成束，導(dǎo)管為孔紋導(dǎo)管，直徑35～40 μm，部分導(dǎo)管旁有棕黃色分泌物，淀粉粒類圓形，單粒，臍點(diǎn)點(diǎn)狀，木薄壁細(xì)胞長(zhǎng)方形;莖的粉末黃白色，維管柱鞘纖維壁厚，木化為螺紋導(dǎo)管，直徑25～30 μm，兼有孔紋導(dǎo)管，淀粉粒類圓形，單粒，臍點(diǎn)點(diǎn)狀，木薄壁細(xì)胞長(zhǎng)方形;葉的粉末灰綠色，氣孔平軸式，柵欄細(xì)胞單列，木纖維細(xì)長(zhǎng)或呈梭形，可見(jiàn)碳酸鈣晶體、非腺毛有兩種，一種為單細(xì)胞非腺毛，長(zhǎng)約450 μm，頂端尖細(xì)，另一種為多細(xì)胞非腺毛，由2～6個(gè)細(xì)胞組成，長(zhǎng)可達(dá)400 μm，頂端細(xì)胞尖細(xì)，底部細(xì)胞較大，非腺毛基座細(xì)胞較小，排列規(guī)整，兩種類型的非腺毛表面具有細(xì)小的疣狀突起。

1.2.4 紫外吸收光譜鑒別 分別取山苦荬的根、莖、葉、花各0.5 g，粉碎成粗粉，置25 mL容量瓶中，加甲醇10 mL，超聲處理30 min，濾過(guò)，取續(xù)濾液0.5 mL，置于10 mL試管中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，置于紫外分光光譜儀進(jìn)行全波長(zhǎng)(190～800 nm)測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)圖3。

山苦荬根粉末提取液在665 nm、408 nm、273 nm和216 nm處有最大吸收，莖粉末提取液在665 nm、325 nm、281 nm和207 nm處有最大吸收，葉粉末提取液在 665 nm、613 nm、537 nm、469 nm、416 nm和212 nm處有最大吸收，花粉末提取液在665 nm、537 nm、469 nm、325 nm、269 nm 和212 nm 處有最大吸收。

1.2.5 薄層色譜鑒別［5］①供試品溶液的制備:分別取山苦荬的根、莖、葉、花各0.5 g，粉碎成粗粉，置25 mL容量瓶中，加甲醇10 mL，超聲處理30 min，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)蛹状?.5 mL，使溶解，溶液作為供試品溶液。②對(duì)照品溶液制備:取β-谷甾醇對(duì)照品適量，用甲醇溶解并稀釋成0.5 mg/mL溶液，作為對(duì)照品溶液。③鑒定:按照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液和對(duì)照藥材溶液各10 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚-丙酮(2∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)(先飽和10 min)，取出，晾干，噴以5%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上顯紅色顏斑點(diǎn)(Rf=0.49)，藥材色譜見(jiàn)圖4。表明山苦荬的根、莖、葉和花粉末中均含有β-谷甾醇。

2 結(jié)果

在此系統(tǒng)下展開(kāi)的薄層圖對(duì)山苦荬的根、莖、葉和花的化學(xué)成分進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)根部位在此系統(tǒng)下Rf=0.49處有一個(gè)紅色斑點(diǎn)，且為β-谷甾醇;莖部位在此系統(tǒng)下有兩個(gè)斑點(diǎn)，Rf=0.49處有一紅色斑點(diǎn)，Rf=0.36處有一黃色斑點(diǎn)。葉部位在此系統(tǒng)下有5個(gè)斑點(diǎn)，Rf=0.49處有一紅色斑點(diǎn)，Rf=0.44處有一深綠色斑點(diǎn)，Rf=0.405處有一綠色斑點(diǎn)，Rf=0.36有一黃色斑點(diǎn)，Rf=0.30處有一淺綠色斑點(diǎn)。花部位在此系統(tǒng)下有7個(gè)斑點(diǎn)，Rf=0.49處有一紅色斑點(diǎn)，Rf=0.87處有一紅色斑點(diǎn)，Rf=0.58處有一紅色斑點(diǎn)，Rf=0.49處有一紅色斑點(diǎn)，Rf=0.44處有一深綠色斑點(diǎn)，Rf=0.405處有一綠色斑點(diǎn)，Rf=0.36有一黃色斑點(diǎn)，Rf=0.285處有一棕色斑點(diǎn)。

3 討論

結(jié)合藏藥山苦荬根、莖和葉的結(jié)構(gòu)特征如根無(wú)周皮，具有次生根被結(jié)構(gòu)，皮層寬廣，形成層不明顯，韌皮部外側(cè)具溶生式分泌腔，導(dǎo)管為孔紋導(dǎo)管，木射線明顯;莖具不連續(xù)的呈帽狀維管柱鞘及不連續(xù)的環(huán)髓纖維，韌皮部較窄，木質(zhì)部具溶生式分泌腔，少數(shù)導(dǎo)管內(nèi)有樹(shù)脂狀物質(zhì);葉具有兩種非腺毛，為藏藥山苦荬的鑒別提供可靠的鑒定依據(jù)。

紫外光譜和薄層色譜結(jié)果顯示，藏藥山苦荬的根、莖、葉、花所含的化學(xué)成分差異較大，均含β-谷甾醇，為進(jìn)一步研究藏藥山苦荬的化學(xué)成分及其不同部位的藥理藥效提供了前期研究基礎(chǔ)。

藏藥山苦荬全株入藥，而實(shí)驗(yàn)表明該藥材不同部位化學(xué)組分差異較大，應(yīng)在制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中加以進(jìn)一步的討論。

［1］ 國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草藏藥卷［M］.上海:上海科學(xué)出版社，1998

［2］ 張 垠，童志平，薛鵬喜，等.藏藥山苦荬化學(xué)成分研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38(29):16222-16225

［3］ 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(上冊(cè))［M］.上海:上海人民出版社，1977.186

［4］ 李小川.一種地產(chǎn)山楂的生藥學(xué)研究［J］.川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，19(4):100-102

［5］ 曹 陽(yáng).草豆蔻混淆品云南大草寇的鑒別［J］.川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1999，14(3):76-77