頂空氣相色譜法測定布洛芬緩釋膠囊中乙醇殘留量

王洪江 王萌萌 王 穎 康 慧 孫洪剛 劉 磊 王超眾

1.黑龍江省綏化市第一醫院，黑龍江綏化 152000；2.黑龍江省齊齊哈爾市第一醫院，黑龍江齊齊哈爾 161005；3.黑龍江省齊齊哈爾市食品藥品檢驗檢測中心，黑龍江齊齊哈爾 161006

布洛芬緩釋膠囊由于其緩釋機制使其具有良好的解熱、鎮痛及抗炎作用[1]。近年來隨著臨床的廣泛應用， 其不良反應時有報道，如胃腸道反應、語言障礙、眩暈、皮疹、過敏性休克、哮喘嚴重發作等[2-4]。由于在布洛芬緩釋微丸的制備工藝中，緩釋粘合劑配制中用到95%乙醇[5]，而中華人民共和國藥典二部中規定乙醇屬于第三類溶劑[6]，因此有必要對其進行控制。本研究采用頂空氣相色譜法，以丙酮為內標物，內標法對布洛芬緩釋膠囊中乙醇殘留量進行測定，為制劑的質量控制提供實驗依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 7890A GC System氣相色譜儀，Agilent 7694E Headspace Sampler頂空自動進樣器，Agilent GC ChemStation工作站，Sartorius BP221S型電子分析天平。

1.2 試藥

布洛芬緩釋膠囊（市售品，批號20110106，20111021，20111022，規格：0.3 g），布洛芬對照品（中國食品藥品檢定研究院，100179-200303，規格：100 mg），無水乙醇（色譜純，Merck公司），丙酮（色譜純，Merck公司），水為超純水。

2 方法與結果

2.1 內標溶液的制備

精密稱取丙酮0.2 g，置100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液5 mL，置1000 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得內標溶液。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取無水乙醇1 g，置100 mL量瓶中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液5 mL，置100 mL量瓶中，加內標溶液稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液5 mL，置頂空瓶中，密封，即得對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取布洛芬緩釋膠囊20粒，取內容物置乳缽中，研細。精密稱取上述細粉5 g，置100 mL量瓶中，加內標溶液70 mL，振搖10 min使乙醇溶解，加內標溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取上述溶液5 mL，置頂空瓶中，密封，即得供試品溶液。

2.4 陰性對照溶液的制備

精密稱取布洛芬對照品0.3 g，置10 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取上述溶液5 mL，置頂空瓶中，密封，即得陰性對照溶液。

2.5 色譜條件

色譜柱：Agilent HP-FFAP（30 m×0.320 m，0.25μm）毛細管柱；柱溫為40 ℃；進樣口溫度為150 ℃；檢測器溫度為250 ℃；頂空瓶平衡溫度為85 ℃；平衡時間為30 min；定量環溫度為105 ℃；傳輸管溫度為120 ℃；載氣為氮氣，流速2.0 mL/min；分流比20︰1；進樣量1 mL。取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液，分別頂空進樣，記錄色譜圖，見圖1。理論塔板數按乙醇峰計，均不低于5000；丙酮峰與乙醇峰之間的分離度符合要求；陰性對照溶液對測定無干擾。

圖1 陰性對照溶液（A）、對照品溶液（B）、供試品溶液（C）色譜圖

2.6 線性關系考察

精密稱取無水乙醇1.0072 g，置100 mL量瓶中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。精密量取對照品儲備液，用內標溶液稀釋成含乙醇濃度分別為 0.050 36，0.100 72，0.201 44，0.402 88，1.007 20， 2.014 40 mg/mL的溶液，按上述色譜條件進樣分析，記錄色譜圖。以乙醇濃度為橫坐標，乙醇峰面積與丙酮峰面積的比值為縱坐標進行線性回歸，得標準曲線的回歸方程：Y=30.95X+0.1294（r=0.9997，n=6）。結果表明乙醇在0.050 36～2.0144 mg/mL濃度范圍內線性關系良好。

2.7 檢出限、定量限考察

取“2.6項下”濃度為0.050 36 mg/mL的溶液繼續稀釋，按上述色譜條件測定，得乙醇的檢出限濃度為0.3μg/mL（S/N=3），定量限濃度為 1μg/mL（S/N=10）。

2.8 精密度試驗

取同一對照品溶液，連續進樣6次，記錄色譜圖。計算乙醇峰面積與丙酮峰面積的比值，RSD=0.67%（n=6），結果表明該方法精密度良好。

2.9 重復性試驗

取同一批號的樣品6份（批號20110106），按“2.3”項下方法制備供試品溶液，進樣，內標法計算乙醇殘留量。結果6份供試品乙醇殘留量，RSD=1.21%（n=6）。

2.10 穩定性試驗

取同一供試品溶液，分別于 0，1，2，4，6，8，24 h 進樣，記錄色譜圖。內標法計算乙醇殘留量，RSD=0.35%，表明在24 h內溶液穩定。

2.11 加樣回收試驗

精密稱取9份已知含量的樣品（批號：20110106）細粉各5 g，置100 mL量瓶中，分別精密加入“2.6”項下對照品儲備液 1.2，1.5，1.8 mL，加內標溶液 70 mL，振搖 10 min 使乙醇溶解，加內標溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過。分別精密量取上述溶液5 mL，置頂空瓶中，密封，分別制得低、中、高濃度的供試品溶液。進樣，記錄色譜圖。計算加樣回收率，結果見表1。平均加樣回收率為100.9%，RSD=0.24%。

表1 乙醇殘留量加樣回收試驗結果

2.12 乙醇殘留量測定 取布洛芬緩釋膠囊樣品3批（批號20110106，20111021，20111022），按“2.3”項下方法制備供試品溶液，進樣，內標法計算乙醇殘留量。結果3批樣品中乙醇殘留量分別為0.31%，0.27%，0.28%。

3 討論

國家食品藥品監督管理總局審核、通過了，該制劑21個批準文號；也就是說，國內有20余家，生產企業可以生產布洛芬緩釋膠囊；其中包括中美史克制藥公司、珠海聯邦制藥等國內外生產規模較大的龍頭制藥企業，也包括一些只有幾個批準文號小的制藥企業；生產技術水平參差不齊；所以急待需要一個行之有效的檢查方法考查該制劑在生產過程中，工藝所帶來的乙醇殘留量，從而提高該類制劑的安全性、有效性。

乙醇作為一種有效的溶劑、洗滌劑、萃取劑、粘合劑以及合成原料等，在制藥工業中有著非常廣泛的用途。2010年版中華人民共和國藥典二部將乙醇規定為第三類溶劑，藥品GMP或其他質量標準要求限制使用，因此本文建立一個通用的乙醇殘留檢測的方法。有文獻報道用直接進樣氣相色譜法檢測藥品中乙醇殘留的方法[7-8]，該方法的缺點是藥品制劑中的輔料同乙醇一起進入儀器分析，輔料峰容易對乙醇峰造成干擾，氣相色譜儀及色譜柱也會受到損害；本文建立的方法可以分離、分析；徹底消除了輔料對乙醇峰及內標物峰的干擾，專屬性更強、結果更加準確。

[1]王小亮，賈建忠，楊欣，等.近紅外透射光譜法快速測定布洛芬緩釋膠囊釋放度 [J].藥物分析雜志，2012，32（10）：1898-1902.

[2]唐武.布洛芬緩釋膠囊的不良反應[J].醫藥導報，2001，20（3）：201.

[3]丁國華 .布洛芬緩釋膠囊的不良反應 [J].醫藥導報，1999，18（5）：375-376.

[4]杜佳新，顧玉紅.21例布洛芬緩釋膠囊致不良反應文獻分析[J].中國藥房，2007，18（20）：1580-1582.

[5]盧丹，尤孝慶，許美蓉.布洛芬緩釋膠囊的制備[J].中國醫藥工業雜志，1998，29（10）：452-453.

[6]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：中國醫藥出版社，2010：附錄61-65.

[7]張名楠，梁振益.毛細管氣相色譜法測定阿奇霉素原料藥中乙醇殘留量 [J]. 商丘師范學院學報，2006，22（5）：128-130.

[8]佟玲，張蕾，李莉，等.毛細管氣相色譜法測定穿心蓮內酯乙醇殘留[J].天津藥學，2008，20（4）：23-25.