SPME-GCMS在藥品分析中的應用研究

王曉寧，睢超霞

漯河醫學高等專科學校 ，河南漯河 462002

目前，我國的對農藥的使用最多的是有機磷農藥，該農藥具有毒性高的特點，由于其的廣泛使用，使得近年來瓜果農藥殘留中毒事件發生的概率提高。在農產品中，對殘留農藥存在所受到的關注程度逐漸提高，對農藥殘留、使用加強管理勢在必行，因此，建立靈敏、可靠、簡便、快捷的監測手段是當務之急。

1 SPME-GCMS 簡介

一般情況下，對有機磷污染物的測定首先要采用有機溶劑，或者超臨界流體萃取等技術對污染樣品進行處理，這種方法在分離凈化的過程中存在一定的缺陷，如工作量大、步驟繁瑣、成本高、好市場，且所用的有機溶劑對生態環境、人體健康都會產生負面影響。SPME，及固相微萃取技術是一種無溶劑、直接的固體萃取分離技術，該技術采用不同色譜固定相或者吸附劑，涂于一根熔融石英纖維上，制成萃取頭，然后直接從樣品中提取分離欲測組分，固相微萃取裝置實質就是微量進樣器，與氣相色譜儀進樣口相接，對待測物進行高溫熱解。SPME 最大的優勢就是可以與GC 聯用，集萃取、分離、進樣、濃縮于一體，不需要有機溶劑，簡單方便。采用SPME 方法對農產品中的農藥殘留進行測定目前還不常見。本文主要采用SPME 和GCMS 聯用的方法，對蔬菜殘留有機磷農藥進行分析測定，建立一種先進可靠、實用有效的方法，為藥品分析奠定理論基礎。

2 儀器、材料及方法

2.1 儀器、材料

SPME 裝置，氣相色譜儀（HP5890II），聚二甲基硅氧烷萃取頭（膜厚100μm），磁力攪拌臺（nuvoaII），勻漿器（National）。

有機磷農藥標準品，去離子水，茼蒿。

2.2 方法

1）蔬菜樣品預處理。取新鮮茼蒿50g，置于勻漿器內剪碎，加入去離子水，越150g，攪拌勻漿5min，即得到蔬菜勻漿液，總體積為150mL，按實驗需求，勻漿后加入4 種有機磷農藥，與蔬菜組織混合；

2）SPME 萃取及GCMS 進樣。去蔬菜勻漿液5mL 裝于10mL 小容器瓶中，置于磁力攪拌臺上，在常溫下進行攪拌，轉速為中等速度。然后在勻漿液中插入SPME 萃取頭，一段時間后取出，然后放于去離子水中清洗，清洗不能超過5s，將殘留在萃取頭上的蔬菜碎屑除掉，將萃取頭縮進SPME 裝置針管內，插入氣相色譜儀，推出萃取頭，過5min 后抽出萃取頭，拔出針管。萃取頭每次用完以后，放置在GC 進樣口處，在270℃高溫及He 氣體條件下處理二三十分鐘，一般情況下，20min 后就可以保證萃取頭上無農藥殘留；

3）氣相色譜條件。檢查室溫度：290℃，氣化室溫度：270℃、載氣：He，5mL/min；補充氣：N2，15mL/min；升溫：初溫35℃，持續6min，然后按照30℃/min，上升到200℃，停止3min，再以10℃/min 上升到280℃，持續15min。此時，不分流進樣，5min 后打開分流閥。

3 試驗結果及討論

3.1 解熱時間

把萃取得到的附著在SPME 萃取頭上的待測化合物插入氣相色譜儀，氣化室270℃高溫目標進行解熱，依靠流動相盜圖色譜柱，這個環節是SPME 與GCMS 聯用的重要步驟。在萃取等條件相同的基礎上，萃取頭的解熱時間分別為1、2、···、6 分鐘時，GCMS 影響無明顯變化，四種有機磷農藥相對標準偏差分別為：二嗪農4.75%、甲拌磷3.63%、乙硫磷7.65%、甲基對硫磷4.33%，因此可以知道，高溫熱解的時間可能較短，為了方便操作，使試驗條件一直，本文所選定的解熱時間均為5min。

3.2 樣品勻漿處理

4 種有機磷農藥都具有水溶性，不易揮發。對這些有機磷農藥進行提取分離需要借助SPME 萃取頭，先制備液態樣品，反復試驗，采用上文所述預處理步驟，得到的蔬菜勻漿液比較均勻，蔬菜顆粒較小，有利于萃取，最主要的是有機磷農藥的損失少，穩定性好。

3.3 離子強度

溶液中的離子強度的增加可以在水樣中添加氯化鈉，從而有效的降低有機化合物的溶解，改善萃取的效率。為了檢驗SPME 萃取時是否收到漿液中離子強度增大的影響，設計實驗進行檢驗：取3 份漿液，各5mL，個加入標準混合農藥，再加入NaCl 分別為0g、0.5g 和1g，混合后進行萃取，然后進行GC 測定，測定結果為，除NaCl 含量不同，其余條件均相同，氯化鈉含量越高，萃取的效率越低。因此可以肯定，加無機鹽的方法提高萃取效率并不是適合每一種待測組分。

3.4 攪拌速度

在萃取過程中，對試樣反復進行攪拌，使待測組分均勻，達到分配平衡。本文所進行的試驗攪拌速度均為中等速度。如果分別采用不攪拌、低速攪拌、中速攪拌和高速攪拌，經過試驗發現，對于一種農藥組分而言，在其余條件均相同時，SPME 吸附量上不攪拌小于高速攪拌8%，低速攪拌和中速攪拌分別達到高速攪拌的83%和87%。可見不攪拌時的擴撒速度最慢，主要是因為固相表面有一層靜止水膜。在攪拌時，水膜破壞掉，吸附量增大。雖然高速攪拌時吸附量最大，萃取裝置中小磁轉子不穩定，可能會出現不確定因素，因此選擇中等攪拌速度。

3.5 其它因素

除上述幾種影響因素之外，還有平衡時間、定量可行性分析等因素也會影響到試驗的結果，在實際試驗中，只要保持一段萃取 時間，就能保證實驗結果，沒有必要等到平衡。為了提高精密度及靈敏度，需要達到一定的萃取量。雖然固相微萃取技術是一種動態平衡技術，在一些相同條件下，采用外標法測量是可以的，主要是被測樣品相同并且干凈的影響。此外，如果存在適用的內標物，進行稱重時加入，可以校正處理時的損失，使得樣品處理和分析定量更加的準確。

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