小劑量羅紅霉素對吸煙哮喘患者氣道炎癥的影響＊

鄭小珍，劉積鋒，鐘 蔚，吳文斌，檀月芳，黃玉仕

（廣西醫科大學第十附屬醫院／欽州市第一人民醫院呼吸科，廣西欽州 535000）

吸煙在成人支氣管哮喘患者中很常見，近年來的研究表明吸煙所致哮喘患者氣道炎癥的改變對糖皮質激素治療不敏感，這部分戒煙不成功的支氣管哮喘吸煙患者的致殘率和病死率相當高［1，2］；羅紅霉素可通過抑制 NF－кB的活化而降低白細胞介素－8（IL－8）的表達從而減少中性粒細胞在支氣管腔內募集，且羅紅霉素可能通過對其促進細胞膜的穩定性及對中性粒細胞中NF－кB的抑制作用而減少中性粒細胞釋放活性氧［3］。本文采用在給予常規吸入沙美特羅替卡松粉的基礎上給予口服小劑量的羅紅霉素，以觀察小劑量的羅紅霉素聯合吸入沙美特羅替卡松粉對成人支氣管哮喘吸煙患者氣道炎癥及其療效的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 46例2008年10月至2010年6月在本院呼吸內科門診及住院的輕度至中度非急性發作期支氣管哮喘吸煙患者為研究對象，均符合中華醫學會呼吸病學分會制定的支氣管哮喘的診斷標準，且分級均符合輕度至中度非急性發作期支氣管哮喘［4］。就診前2個月內均未使用過糖皮質激素（包括吸入或全身使用），僅按需吸入支氣管擴張劑（沙丁胺醇氣霧劑）。所有患者隨機分為對照組（A組，23例，其中男20例，女3例）和治療組（B組，23例，其中男21例，女2例）。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

1.2 方法

1.2.1 觀察方法 吸煙指數的計算為：吸煙指數＝每天吸煙支數×吸煙年數。所有患者第1次就診時用意大利科時邁QUARK PFT1肺測試儀測定最大呼氣流量（peak expiratory flow，PEF）、第一秒用力呼氣容積占預計值百分比（FEV1%）及吸入支氣管擴張劑后進行氣道舒張試驗（均為3次吹氣后取平均值），以氣道舒張試驗的FEV1%提高大于或等于15%確定為支氣管哮喘患者。確定診斷后所有患者進行肺功能及取誘導痰檢測，檢測均在早上8：00～11：00。對照組給予吸入沙美特羅替卡松粉吸入劑50／250μg（葛蘭素史克公司生產）治療，用法為1吸／次，每天2次。治療組在對照組的治療基礎上給予口服羅紅霉素分散片（江蘇省連云港市恒瑞醫藥公司生產），用法為每次0.15g，每天1次。4周后復查所有患者進行肺功能測定及取誘導痰檢測。兩組患者在治療期間均未采取戒煙措施。

表1 兩組患者治療前的一般資料

1.2.2 誘導痰及處理 誘導痰方法為射流霧化吸入200g沙丁胺醇后逐級吸入高濃度鹽水（3%，4%，5%）刺激咳痰，每次5分鐘［5］。咳痰到培養皿，合格的痰標本為涂片檢查每低倍鏡視野白細胞大于25個，鱗狀上皮細胞小于10個。向痰液內加入4倍體積的0.1%的二硫蘇糖醇（DTT），購自Sigma公司，冰浴下吹打至痰液黏稠度降低，再加入等量的磷酸鹽緩沖液（PBS）吹打，790r／min離心10min，分裝上清液于－20℃凍存待檢［6］，將沉淀的細胞懸浮于磷酸緩沖鹽液中2h內送檢驗科采用自動血細胞計數儀進行細胞分類計數。

1.2.3 痰上清液中IL－8蛋白質濃度的測定 采用酶聯免疫吸附法（ELISA）測定痰上清液中IL－8水平。IL－8試劑盒（由上海依科賽生物制品有限公司生產），嚴格按試劑盒說明書進行操作。

1.3 統計學處理 采用的SPSS11.5統計軟件，計量資料用表示，同一組治療前后比較采用配對t檢驗，兩組間比較采用t檢驗；計數資料采用行×列χ2檢驗，檢驗水準α＝0.05，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

兩組支氣管哮喘吸煙患者均完成4周的療程及隨訪，在治療過程中無不良反應。兩組治療前早上的PEF及FEV1%比較差異無統計學意義（P＞0.05），且兩組治療前誘導痰的嗜酸性粒細胞計數、中性粒細胞及IL－8比較差異無統計學意義（P＞0.05）。兩組患者經過4周的治療后，兩組患者的PEF及FEV1%均提高（P＜0.01），嗜酸性粒細胞減少（P＜0.01）。但A組患者氣道內中性粒細胞及IL－8減少差異無統計學意義（P＞0.05）。B組患者經治療后氣道內中性粒細胞及IL－8明顯減少且比A組治療后顯著減少（P＜0.01），且B組患者經治療后氣道內嗜酸性粒細胞比A組治療后減少（P＜0.05），同時B組患者經治療后PEF及FEV1%顯著改善且均比A組患者經治療后明顯提高（P＜0.01）。見表2。相關分析顯示吸煙指數與氣道內中性粒細胞、IL－8水平及嗜酸性粒細胞呈正相關（r＝0.433，P＜0.01；r＝0.610，P＜0.01；r＝0.441，P＜0.01），而氣道內中性粒細胞、IL－8水平及嗜酸性粒細胞與第一秒用力呼氣流量呈負相關（r＝－0.660，P＜0.01；r＝－0.906，P＜0.01；r＝－0.699，P＜0.01），氣道內中性粒細胞與PEF呈負相關（r＝－0.303，P＜0.01）。線性回歸分析顯示氣道內IL－8的表達對第一秒用力呼氣流量影響較大（β＝－0.621，P＜0.01），氣道內中性粒細胞對第一秒用力呼氣流量也有影響（β＝－0.167，P＜0.05）。

表2 兩組氣道炎癥指標及肺功能比較（，n＝23）

表2 兩組氣道炎癥指標及肺功能比較（，n＝23）

指標 組別 治療前 治療后 治療前后組內比較P值治療前組間比較P值治療后組間比較P值420.30±39.83439.03±37.51 0.001 0.118 0.000 B組 404.42±26.47497.62±33.24 0.000 FEV1（%） A組 73.29±4.13 76.27±4.11 0.000 0.882 0.000 B組 73.46±3.72 80.30±2.94 0.000中性粒細胞（106／mL） A組 2.93±0.55 2.92±0.54 0.167 0.127 0.000 B組 3.17±0.47 2.23±0.50 0.000嗜酸性粒細胞（106／mL） A組 0.18±0.03 0.15±0.03 0.000 0.509 0.028 B組 0.19±0.04 0.13±0.03 0.000 IL－8（μg／L） A組 1.47±0.34 1.43±0.37 0.631 0.707 0.000 B組PEF（L／min） A組1.51±0.36 0.42±0.30 0.000

3 討 論

通過本臨床研究顯示，吸煙均可引起支氣管哮喘患者氣道中中性粒細胞、IL－8及嗜酸粒細胞增多，支氣管哮喘患者氣道中中性粒細胞、IL－8及嗜酸粒細胞增多均與FEV1%呈負相關；僅支氣管哮喘患者氣道中中性粒細胞與PEF呈負相關外，支氣管哮喘患者氣道中中性粒細胞、IL－8與PEF無明顯相關關系。表明支氣管哮喘吸煙者氣道中中性粒細胞、IL－8及嗜酸粒細胞增多可引起氣道阻塞加重。Jang等［1］研究證實PEF、FEV1（%）均比支氣管哮喘不吸煙者降低，張莉等［7］也報道吸煙組哮喘患者誘導痰中中性粒細胞及IL－8濃度高于非吸煙組哮喘患者，且經吸入糖皮質激素治療后也難以改善，這些可能與吸煙引起組蛋白去乙酰基轉移酶（HDAC）的活性降低而導致其對糖皮質激素不敏感有關［8］。

A組患者吸入沙美特羅／替卡松粉吸入劑50／250μg治療4周后PEF、FEV1%及誘導痰中嗜酯性粒細胞明顯改善，沙美特羅／替卡松可提高吸煙或不吸煙支氣管哮喘患者的PEF、FEV1%［9］。但在本研究中吸入沙美特羅／替卡松氣道中中性粒細胞、IL－8無明顯降低，而B組患者在吸入沙美特羅／替卡松并口服小劑量羅紅霉素分散片4周后氣道內中性粒細胞及IL－8明顯減少且比A組治療后顯著減少，同時B組患者經治療后PEF及FEV1%顯著改善且均比A組患者經治療后明顯提高。表明羅紅霉素聯合吸入沙美特羅／替卡松比單純吸入沙美特羅／替卡松更好改善患者的早晨PEF、FEV1（%）與羅紅霉素聯合吸入沙美特羅／替卡松減少患者氣道中的中性粒細胞及降低IL－8表達有關。近來的研究表明與羅紅霉素同屬于十四元大環內酯類紅霉素可減輕煙草提取物引起巨噬細胞中HDAC的活性降低而抑制IL－8的表達［3，10］，因此認為羅紅霉素可減輕支氣管哮喘吸煙患者氣道中IL－8表達及中性粒細胞相關的炎癥可能與其通過逆轉因吸煙引起HDAC的活性而降低IL－8表達水平有關。支氣管哮喘吸煙患者在戒煙后炎癥、肺功能及癥狀也可得到改善，首先應積極地提倡哮喘患者戒煙使支氣管哮喘得到有效治療［2，11－12］。吸煙導致支氣管哮喘患者糖皮質激素不敏感的相關機制及羅紅霉素在其中的作用機制尚有待進一步研究。

通過本研究顯示，口服小劑量羅紅霉素聯合吸入沙美特羅／替卡松比單純吸入沙美特羅／替卡松減少支氣管哮喘患者氣道內中性粒細胞、IL－8及嗜酸粒細胞，且PEF及FEV1%均比單純吸入沙美特羅／替卡松治療后顯著改善。

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