氫化可的松灌腸液的制備與質量控制

劉永勝，陳 華，金偉華，米婷婷（成都軍區總醫院藥劑科，成都 610083）

氫化可的松為腎上腺皮質激素類藥，具有抗炎、免疫抑制、抗毒素和抗休克作用[1]。氫化可的松制成灌腸液后，使藥物在結腸的局部濃度增加，從而增加療效，減少不良反應的發生，在治療各種結腸炎癥上具有明顯的優勢。為此，我院制備了氫化可的松灌腸劑[制劑批準文號：成制字（2011）F02016]，可直接用于結腸等病變部位。現將其制備與質量控制方法介紹如下。

1 材料

1200型高效液相色譜儀，配備四元泵、可變波長檢測器、1200化學工作站（美國Agilent公司）；DU730型紫外-可見分光光度計（美國貝克曼公司）；AL204電子天平（梅特勒-托利多儀器公司）；AP-01P真空泵（天津奧特賽恩斯儀器公司）；SZ-97自動三重純水蒸餾器（上海亞榮生化儀器廠）；HHS11-Ni2電熱恒溫水浴鍋（北京長安永創科學儀器有限公司）。

氫化可的松標準品（中國食品藥品檢定研究院，批號：100152-200206，純度：100.0%）；氫化可的松原料藥（江蘇揚州制藥有限公司，批號：20060601，純度：99.16%）；羧甲基纖維素鈉（湖南爾康制藥有限公司，批號：20080601）；氫化可的松灌腸液樣品（自制，批號：20100724、20100801、20100805，規格：100 mg∶60 ml）；甘油、無水乙醇均為藥用規格；甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純，水為三重蒸餾水。

2 處方與制備

2.1 處方

氫化可的松原料藥3 g，羧甲基纖維素鈉30 g，50%稀乙醇300 ml，蒸餾水加至1 800 ml。

2.2 制備

將羧甲基纖維素鈉撒于適量蒸餾水中溶脹。另將氫化可的松原料藥加入300 ml 50%稀乙醇中，攪拌使其溶解。將上述羧甲基纖維素鈉膠漿緩緩加入氫化可的松溶液中，邊加邊攪拌，加蒸餾水至全量。分裝，壓鋁蓋，100℃流通蒸氣滅菌30 min，即得。

3 質量控制

3.1 性狀

本品為無色的黏稠液體。

3.2 鑒別[2]

氫化可的松：（1）取樣品1 ml，加臨用新制的硫酸苯肼試液8 ml，在70 ℃加熱15 min，即顯黃色。（2）取樣品2 ml，置于水浴上蒸干，殘渣加硫酸2 ml使溶解，顯棕黃色至紅色，并顯綠色熒光；將此溶液傾入10 ml水中，即變成黃色至橙黃色，并微帶綠色熒光，同時生成少量絮狀沉淀。

3.3 微生物限度檢查

樣品符合2010年版《中國藥典》（二部）附錄ⅪJ中微生物限度檢查法的相關規定[2]。

3.4 含量測定

3.4.1 色譜條件。色譜柱：Eclipse XDB-C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：乙腈-水（28∶72），流速：1.0 ml/min；柱溫：30℃；檢測波長：245 nm；進樣量：10 μl。理論板數按氫化可的松計不得低于5 000。

3.4.2 溶液的制備。供試品溶液：精密量取樣品6 ml，置于100 ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為供試品溶液。對照品溶液：取氫化可的松標準品約10 mg，精密稱定，加甲醇溶解并稀釋成氫化可的松對照品貯備液（1 mg/ml），再精密量取適量制成氫化可的松質量濃度為0.1 mg/ml的溶液，搖勻，即得。陰性對照品溶液：按照氫化可的松灌腸液處方配制不含主成分的乙醇水溶液，同供試品溶液配制方法配制陰性對照品溶液。

3.4.3 方法專屬性試驗。精密吸取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照品溶液各10 μl，注入高效液相色譜儀測定，記錄色譜圖，見圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.對照品；B.陰性對照品；C.供試品；1.氫化可的松；2.甲醇Fig1 HPLC chromatogramsA.reference substance；B.negative control；C.sample；1.hydrocortisone；2.methanol

由圖1可見，陰性對照品溶液在與氫化可的松對照品溶液相對應的保留時間位置上未見吸收峰，說明輔料等對主成分的分析無干擾。

3.4.4 標準曲線的制備。分別精密量取氫化可的松對照品貯備液（1 mg/ml）適量，加甲醇稀釋制成質量濃度為0.01、0.02、0.05、0.10、0.20 mg/ml的溶液。分別精密吸取10 μl，注入色譜儀，按“3.4.1”項下色譜條件，記錄色譜圖，分別測定氫化可的松峰面積。以氫化可的松質量濃度（c）為橫坐標，峰面積（Y）為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程：Y＝45 991c+670.21（r＝0.999 4）。結果表明，氫化可的松檢測質量濃度線性范圍為0.01～0.2 mg/ml。

3.4.5 精密度試驗。精密吸取質量濃度為0.1 mg/ml的對照品溶液10 μl，連續進樣6次，測定氫化可的松峰面積。結果，氫化可的松對照品峰面積RSD＝0.62%（n＝6），說明本法具有良好的精密度。

3.4.6 穩定性試驗。取同一批號樣品（批號：20100724）適量，按“3.4.2”項下方法制備供試品溶液，在室溫放置，于2、4、6、8、10 h分別進樣測定其峰面積。結果，氫化可的松峰面積RSD＝0.57%（n＝6），表明供試品溶液在10 h內測定，穩定性良好。

3.4.7 重復性試驗。取同一批號樣品（批號：20100724）適量，精密稱取6份，按“3.4.2”項下方法制備供試品溶液，重復平行測定，計算含量。結果，樣品中氫化可的松的平均占標示量百分含量為99.87%，RSD＝0.32%（n＝6），表明此法重復性良好。

3.4.8 回收率試驗。精密量取已知含量的樣品（批號：20100724）溶液6 ml，置于100 ml量瓶中，分別加入定量的對照品貯備液（1 mg/ml）4、5、6 ml，依法測定，計算回收率，結果見表1。

表1 回收率試驗結果（n＝9）Tab 1Results of recovery test（n＝9）

3.4.9 樣品的含量測定。取3個批號的灌腸液樣品（批號：20100724、20100801、20100805），按“3.4.2”項下方法配制供試品溶液，照“3.4.1”項下的色譜條件進樣測定，記錄色譜圖，計算含量。結果，3批樣品中氫化可的松的平均占標示量百分含量分別為 99.87%（RSD＝0.32%，n＝6）、102.72%（RSD＝0.58%，n＝6）、98.13%（RSD＝0.63%，n＝6）。

3.5 留樣觀察

采用留樣觀察法，取3批樣品經檢測外觀、含量后，置于室溫下放置12個月（2010年7月－2011年7月），再同法進行檢測。結果，檢測指標均無明顯變化，說明本制劑穩定性良好。

4 討論

氫化可的松通過直腸給藥，避免了肝臟首關效應和胃腸道生理吸收功能，消除了對胃腸道的不良反應，提高了生物利用度。本品具有抗菌消炎的作用，在臨床上可用于治療結腸炎，特別是潰瘍性腸炎。氫化可的松不溶于水，略溶于乙醇[2]，所以采用先將氫化可的松溶于乙醇再稀釋的方法進行配制。氫化可的松及其制劑的含量測定方法目前文獻報道的有紫外-分光光度法、高效液相色譜法等[3-5]。筆者參照2010年版《中國藥典》（二部）“氫化可的松”項下[2]的含量測定方法，采用高效液相色譜法測定氫化可的松灌腸液中氫化可的松的含量，結果表明方法專屬性強、分離度好，處理方法簡單、易于操作。

綜上所述，本制劑制備工藝簡便可行，質量穩定可控。

[1]李端.藥理學[M].6版.北京：人民衛生出版社，2008：322.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：二部[S].2010年版.北京：中國醫藥科技出版社，2010：550、附錄107.

[3]徐興亞，姜輝.氫化可的松洗劑的制備及質量控制[J].中國藥房，2009，20（4）：282.

[4]哈娜，哈力，楊習江.HPLC法測定口腔潰瘍膜中氫化可的松的含量[J].中國藥房，2011，22（20）：1 908.

[5]周建玉，左志輝，左文堅.RP-HPLC法測定醋酸氫化可的松滴眼液及注射液的含量[J].天津藥學，2005，17（2）：31.