MTA1和FLIP在食管鱗狀細胞癌中的表達及意義

西安市中心醫院心胸外科（西安710003） 劉晨旭 周 斌

食管癌是消化道最常見腫瘤，在我國發病率較高，嚴重威脅著人民的健康［1］。近年來，許多與腫瘤浸潤、轉移有密切關系的基因已相繼被克隆出，其中腫瘤轉移基因（MTA1）是進幾年來發現的和信號傳導及基因調節有關的腫瘤轉移相關基因。大量研究表明［2－3］，MTA1和許多種惡性腫瘤的浸潤和轉移有著密切的關系。FLIP（FLICE－inhibitory protein）是近年來發現的一類含有死亡效應結構域的凋亡、抑制蛋白，它廣泛存在于病毒、真核生物和哺乳動物等許多物種中。目前可證實FLIP與炎癥、腫瘤及自身免疫性疾病的發生、發展有密切的關系。本實驗對人類食管癌組織中MTA1、FLIP的表達情況及兩者間的關系進行分析，以探討MTA1和FLIP蛋白的表達與食管鱗癌的侵潤、轉移和分化程度之間的關系，以及它們兩者之間的相關性。

材料與方法

1 材 料 選取81例食管癌患者的癌組織作為研究對象，31例距癌組織邊緣＞5cm的正常食管組織作為對照組。標本均為西安交通大學第二醫院胸外科手術切除的組織，入選的患者術前均未行放療、化療和其他激素免疫治療，術后病理診斷均為鱗癌。其中男65例，女16例，年齡42～72歲。病理類型、分期及淋巴結的轉移情況，經病理科醫師確定。

2 方 法 使用SP法進行抗MTA1和抗FLIP免疫組織化學染色。陰性對照則使用PBS代替一抗。結果判定：陽性表達的細胞核內見棕黃色的顆粒。光學顯微鏡下每張切片在診斷確切的食管癌組織中隨機選取5個高倍視野，每高倍視野計數100個細胞。切片內的陽性細胞數＞10%做為MTA1或FLIP陽性表達。

3 統計學方法 所有數據經SPSS 11．0軟件進行處理，使用χ2檢驗，變量之間的關系分析則采用spearman等級相關分析，P＜0．05差異有統計學意義。

結 果

MTA1蛋白、FLIP蛋白在食管癌組織中陽性率均高于正常組織中陽性表達率（P＜0．05）。MTA1、FLIP蛋白在食管癌組織陽性表達與患者年齡、性別、腫瘤的長度均無關。MTA1表達與腫瘤的組織分化程度、T分期和淋巴結轉移有明顯相關性。FLIP的表達與腫瘤的組織分化程度無關，與腫瘤的T分期、淋巴結轉移有明顯相關性。MTA1和FLIP陽性表達存在明顯正相關。見表1～5。

表1 兩組MTA1、PLIP表達比較

表2 MTA1、FLIP在食管癌患者中表達與腫瘤長度關系比較

表3 MTA1、FLIP在食管癌患者中表達與年齡、性別的關系比較

表4 MTA1、FLIP在食管癌患者中的表達與臨床病理因素的關系

表5 MTA1、FLIP在食管癌中的表達相關性

討 論

1 MTA1在食管癌組織中的表達及意義 本組資料食管鱗癌組織中MTA1的陽性表達率為72．84%，正常的組織為6．45%。這兩者比較有顯著差異性（P＜0．05），提示MTA1在食管癌的發生中起到重要的作用，可以作為診斷食管癌的一種重要的生物學指標。本研究發現，MTA1蛋白的陽性表達和患者的年齡、性別及腫瘤長度均無關系（P＞0．05）；MTA1蛋白在中、高分化組中的陽性表達率為60．00%，低分化組為88．89%，二者比較有顯著差異性（P＜0．05），這說明MTA1蛋白的陽性表達和腫瘤的組織學的分級有關系，并隨著其分級的降低陽性表達水平明顯的升高；MTA1蛋白的陽性表達和腫瘤的T分期、淋巴結轉移有顯著的相關性（P＜0．05），說明MTA1蛋白在腫瘤的浸潤、轉移中起著顯著的作用。推測其機制可能是因為在MTA1陽性表達的癌細胞中，MTA1蛋白可以和組蛋白去乙酰化酶結合，募集組蛋白去乙酰化酶到目的基因啟動子的區域，通過除去組蛋白的乙酰基重塑染色質結構，使目的基因變得更加得緊密而不利于繼續轉錄［4］。進而MTA1可通過這種功能直接或間接的作用于某些可以抑制腫瘤浸潤、轉移基因，下調其轉錄過程，使腫瘤抑制基因的數量下降，從而促使腫瘤的發生、發展。綜上所述，MTA1基因在食管鱗癌的、增殖、侵襲和轉移及臨床進展中可能起著重要的調節作用。

2 FLIP在食管癌組織中的表達及意義 本研究結果表明，FLIP在食管癌組織中的陽性表達率為76．54%，在正常肺組織為19．35%，兩者比較差異有顯著性（P＜0．05），說明FLIP在食管癌組織中表達明顯上調。FLIP的表達與患者年齡、性別及腫瘤長度無相關性（P＞0．05）。FLIP與腫瘤的分化程度盡管無明顯相關性（P＞0．05）。FLIP的表達與食管癌的T分期、淋巴結轉移均有顯著相關性（P＜0．05），并隨著腫瘤臨床分期的增加、淋巴結轉移，其表達水平逐漸升高。這可能與以下機制有關：①FLIP的抑制凋亡作用。FLIP含量增加，食管癌細胞凋亡減少，食管癌細胞過度生長并易產生侵犯，同時過度生長的瘤體上癌細胞脫落，造成轉移。②FLIP增多，癌細胞得以對抗T細胞的殺傷作用［5］。以上研究結果提示，FLIP蛋白的表達與食管癌的惡性轉化密切相關，其在腫瘤中的高表達能夠抑制正常的細胞凋亡過程，從而細胞異常增生和惡性轉化，使癌細胞獲得永生性。FLIP在腫瘤細胞中表達越強，癌細胞的生存能力和腫瘤的惡性程度也隨之增高，癌細胞更容易侵襲周圍組織而發生轉移，從而增加治療難度。表明FLIP蛋白的高表達是預示預后不良的標志。FLIP可成為腫瘤基因診斷性標志物和腫瘤治療的新靶點［6－7］。

3 MTA1、FLIP在食管癌中陽性表達的相關性 惡性腫瘤的發生、發展、侵襲轉移，是一種高度選擇的非隨機過程，是多個基因共同參與的結果，與多種分子水平密切相關。FLIP基因的增多能夠使正常的細胞凋亡過程受到抑制。MTA1基因為腫瘤轉移相關基因，通過此種功能直接或間接作用于某些抑制腫瘤浸潤轉移基因，下調其轉錄，使腫瘤抑制基因的數量減少，從而促使腫瘤的發生、發展，而與細胞凋亡過程無關。但是與細胞凋亡抑制基因FLIP存在明顯的正相關。這可能是由于MTAI下調腫瘤抑制基因的數量，而其數量的減少也間接的影響細胞凋亡的過程，但其具體作用機制有待于進一步研究。聯合檢測MTA1、FLIP、表達對于臨床高危復發病例，給予積極治療，對提高預后具有重要意義，并可作為建立食管癌預后模型的重要指標。

［1］ 賀宇彤，侯 浚，陳志峰，等．河北省磁縣近30年食管癌發病死亡趨勢分析［J］．中華流行病學雜志，2006，27（2）：127－131．

［2］ Toh Y，Pencil SD，Nicolson GL．A novel candidate metastasis－associated gene，mta1，differentially expressed in highly metastatic mammary adenocarinoma cell lines．Cdna cloing，expression，and protein analyses［J］．J Biol Chem，1994，269（37）：958－963．

［3］ 李雪華，楊 茜．細胞調亡與肝癌［J］．醫學理論與實踐，2002，15（6）：623－624．

［4］ Salvesen GS，Duckett CS．IAP proteins：blocking the road to death＇s door［J］．Nat Rev Mol Cell Biol，2002，3（6）：401－410．

［5］ Di Somma MM，Somma F，Montani MS，et al．TCR engagement regulates differential responsiveness of human memory T cells to Fas（CD95）－mediated apoptosis［J］．J Immunol，1999，162（7）：3851－3858．

［6］ 梁 瑞，趙安虎，任 宏，等．MEK1在食管鱗癌中的表達及意義［J］．陜西醫學雜志，2010，19（10）：1309－1310．

［7］ 楊志江，李桂紅，蒲紅偉，等．食管癌組織中bcl－2、c－myc、iNOS表達及其意義［J］．陜西醫學雜志，2008，16（6）：686－688．