減肥類保健食品中非法添加鹽酸西布曲明的快速檢測

劉若冰 劉燦輝

（湖南省邵陽市食品藥品檢驗所，湖南 邵陽 422000）

減肥類保健食品中非法添加鹽酸西布曲明的快速檢測

劉若冰 劉燦輝

（湖南省邵陽市食品藥品檢驗所，湖南 邵陽 422000）

目的 建立檢測減肥類保健食品中非法添加鹽酸西布曲明的快速定性檢測方法。方法 采用薄層色譜法、高效液相色譜-二極管陣列檢測器法進行定性鑒別，并采用高效液相色譜法測定其中鹽酸西布曲明的含量。結果 在試驗的10種市售樣品（含贈品）中，其中8個品種（含贈品）中被檢測到摻有鹽酸西布曲明。結論 該方法選擇性強、靈敏度高，可作為分析檢測減肥類保健食品中非法添加鹽酸西布曲明的比較有效的方法。

減肥類保健食品；鹽酸西布曲明；薄層色譜法；高效液相色譜法

鹽酸西布曲明是一種非苯丙胺類食欲抑制劑[1]，抑制5-羥色胺和去甲腎上腺素再攝取，具有抑制食欲和增強代謝雙重作用，其減肥的原理就是靠著代謝加快，產生熱量、釋放熱量的加快，抑制人的食欲，讓人厭食以達到減肥的目的，但是，鹽酸西布曲明對人體有副作用，可出現心動過速、血壓升高、頭痛、失眠、易醒、口干、便秘、易激動、皮疹或皮膚干燥等。同時《食品安全法》規定：保健食品的功能、成分必須與標簽、說明書相一致。但由于中藥制劑所含成分復雜、質量標準不完善，一些制假者在生產過程中非法添加化學成分，夸大宣傳療效，高價銷售弁取暴利，嚴重危害人民的身體健康。據有關資料顯示，減肥類保健食品中非法添加的化學成分主要有鹽酸西布曲明、酚酞、鹽酸芬氟拉明和奧利司他等。因此，筆者建立了薄層色譜法和高效液相色譜法，可快速、準確地檢測減肥類保健食品中非法添加的鹽酸西布曲明。

1 儀器與試藥

島津LC-20A高效液相色譜儀：LC-20AT泵、SPD-M20A檢測器、CTO-10AS柱溫箱、SIL-20A自動進樣器、CBM-20A系統控制器；AG-135電子天平、AB204-N電子天平（均為梅特勒（上海）有限公司）；硅膠G預制板（青島海洋化工廠，批號20081211）。

甲醇、磷酸和三乙胺為色譜純，水為重蒸水，其他試劑均為分析純；鹽酸西布曲明對照品（批號100624-200401）由中國藥品生物制品檢定所提供；10種減肥類保健食品為市場上購買（均標示為純中藥制劑）。

2 方法與結果

2.1 薄層色譜定性鑒別[2]

取供試品1次口服量（含囊殼或茶袋），加入甲醇25mL，超聲處理（250W，40kHz）30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。取鹽酸西布曲明對照品適量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VI B）試驗，吸取上述二種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-濃氨試液（12∶6∶3∶0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。結果供試品色譜中，在與鹽酸西布曲明對照品色譜相應的位置上，顯1個相同的橙紅色斑點說明供試品中檢出鹽酸西布曲明（圖1）。

2.2 高效液相色譜-二極管陣列定性鑒別

2.2.1 色譜條件

UltimateMXB-C18色譜柱（250×4.6mm，5μm）；流動相：甲醇-水（74∶26）；檢測波長：223nm；柱溫：35℃；流速：1.0mL/min；進樣量：10μL。

圖1 1.2.3.4.6.7.8.9供試品；5.10鹽酸西布曲明對照品

2.2.2 溶液的配制

2.2.2.1 對照品溶液的制備

稱取鹽酸西布曲明對照品約7.87mg，置50mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻（儲備液），精密吸取3mL，置10mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得（0.04722mg/mL）。

2.2.2.2 供試品溶液的制備

取供試品1次口服量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理（250W，40kHz）30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.2.2.3 流動相系統優化篩選

試驗前我們查閱了有關文獻和近幾年的藥學雜志，遴選出以下三個流動相系統。①甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀（用磷酸調值至pH3.0）（55∶45）[3]。②甲醇-水-三乙胺（75∶25∶0.1）[4]。③甲醇-水（74∶26）。取上述配制的對照品溶液，檢測波長為223nm，分別以上述三種流動相系統，進樣10μL進行檢測，結果見圖2～4。

顯然以流動相系統③檢出的色譜峰最理想，鹽酸西布曲明色譜峰能達基線分離，色譜行為良好，出峰時間在20min以前，理論板數為8767，供試品鹽酸西布曲明色譜峰與其他雜質峰分離度＞1.5，故選此系統作為流動相進行試驗。

2.2.2.4 專屬性考察

圖2 流動相①HPLC圖

圖3 流動相②HPLC圖

圖4 流動相③HPLC圖

圖5 鹽酸西布曲明對照品色譜圖

圖6 供試品色譜圖

圖7 鹽酸西布曲明對照品光譜圖

圖8 供試品光譜圖

取上述制備的對照品溶液和供試品溶液，照上述色譜條件，各精密進樣10μL，依法測定，記錄色譜圖和光譜圖，結果鹽酸西布曲明色譜峰能達基線分離，出峰時間15.89min，理論板數為8767。供試品在與對照品色譜保留時間相同的位置檢出色譜峰，且光譜圖一致。說明供試品中檢出鹽酸西布曲明。見圖5～8。

2.2.2.5 檢測限考察

稱取鹽酸西布曲明對照品0.00787g，置50mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，精密量取3mL，置100mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度（4.722μg/mL），照上述色譜條件，進樣5μL，記錄色譜圖，見圖9。結果檢測限為23.61ng（S/N=3）。

圖9 信噪比檢測色譜圖（S/N=3）

2.3 高效液相色譜法定量測定

2.3.1 線性關系考察

精密吸取上述鹽酸西布曲明對照品儲備液（0.1574mg/mL）1、2、3、4、5mL，分別置10mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，分別取10μL注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積積分值，以對照品濃度為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程：A=16770C+5076，r=1.0000。可見鹽酸西布曲明在0.1574～0.7870μg范圍內具有良好的線性關系。

2.3.2 精密度試驗

取同一濃度的柚皮苷對照品溶液，在上述色譜條件下測定，連續進樣5次，測定峰面積積分值，平均值為1751194，RSD=0.25%。結果表明本法精密度良好。

2.3.3 穩定性試驗

分別精密吸取同一供試品溶液（X牌減肥膠囊）10μl，于0、1、2、4、8、16h進樣，測定其鹽酸西布曲明峰面積積分值，平均值為1895620，RSD=0.51%。結果表明，供試品溶液在16h內峰面積積分值基本穩定。

2.3.4 重復性試驗

取同一樣品（X牌減肥膠囊，批號2009030181）5份，分別按上述含量測定方法測定其鹽酸西布曲明含量，平均含量為1.0699mg/g，RSD=1.56%。結果表明，本法重現性良好。

2.3.5 回收率試驗

取已知含量的樣品（X牌減肥膠囊，批號2009030181，含量：1.0699mg/g）6份，精密稱定，按低、中、高劑量分別加入鹽酸西布曲明對照品溶液（0.1574mg/mL）適量，按供試品溶液的制備方法處理，依法測定，結果見表1。

表1 鹽酸西布曲明回收率試驗結果

2.3.6 樣品測定

按上述條件和方法測定各樣品中鹽酸西布曲明的含量，結果見表2。

表2 樣品含量測定結果

3 討 論

試驗中曾考察過甲醇、乙醇和乙酸乙酯三種溶劑，結果以甲醇作溶劑的效果為最佳；在超聲時間考察時，超聲30min和60min沒有明顯的區別，故采用超聲30min。同時考察過各樣品的內包裝，結果發現1號樣的囊殼和2號樣的茶袋中均含有較多的鹽酸西布曲明。

在試驗中發現10個減肥類樣品中，有8個樣品中檢出鹽酸西布曲明，1個樣品的贈品中檢出鹽酸西布曲明，但該樣品的正品中有一個很大的可疑峰，有待進一步研究[4]。

由于對保健食品的監管（尤其是技術監管）還未完全到位，目前保健食品市場上魚龍混雜，非法添加的現象令人觸目驚心，且花樣繁多，手段越來越高明。筆者通過薄層色譜法和高效液相色譜法，可以快速地檢測出減肥類保健食品中非法添加的鹽酸西布曲明，該方法專屬性強、靈敏度高、準確、可靠，能有效地控制減肥類保健食品的質量，保障人民的身體健康。

[1] 陳國章,吳琳.減肥藥“輕身減肥片”中非法加入西藥鹽酸西布曲明的薄層色譜鑒別[J].中華中西醫學雜志,2006,4(9):64.

[2] 劉吉金,李軍.減肥食品或保健品中非法添加鹽酸西布曲明、鹽酸芬氟拉明、鹽酸西布曲明快速檢測方法研究[J].藥物分析雜志,2006,26(6):793.

[3] 鄭國鋼,方宇謹,杜加秋.RP-HPLC測定鹽酸西布曲明片的含量[J].西北藥學雜志,2001,16(5):195.

[4] 王金生.HPLC-PDA法檢驗保健食品中的鹽酸西布曲明[J].中國衛生檢驗雜志,2007,17(3):462.

R155.5

B

1671-8194（2013）21-0100-03