培養基加溫溶解次數對醫院制劑微生物檢測結果的影響分析

王 琦

（南陽市第一人民醫院，河南 南陽473000）

培養基加溫溶解次數對醫院制劑微生物檢測結果的影響分析

王 琦

（南陽市第一人民醫院，河南 南陽473000）

目的探討培養基加溫溶解次數對醫院制劑微生物檢測結果的影響。方法選擇玫瑰紅鈉瓊脂培養基、青枯菌半選擇性培養基進行金黃色葡萄球菌和白色念珠菌培養，培養基分別溶解3次。結果隨著溶解次數的增加，培養基上的金黃色葡萄球菌與白色念珠菌數都呈下降趨勢，不過對比差異不明顯。隨著溶解次數的增加，培養基上的pH值呈現明顯下降趨勢，對比差異明顯（P＜0.05）。結論培養基加溫溶解次數能影響醫院中成藥制劑的微生物檢測數與pH值，要盡量減少溶解次數，保證檢測的準確性。

培養基；加溫溶解次數；藥劑；微生物

在當前醫療環境下，醫藥中成藥制劑質量直接關系到用藥者的安全和療效[1]。而微生物限度檢查在中成藥制劑質量控制方面起著重要的質量評估作用，其準確與否直接關系到患者用藥的安全性和有效性[2]。但是在檢測過程中，很多含瓊脂類培養基的多次加溫溶解，造成培養基內的成分被破壞和丟失，導致微生物檢測的不準確[3,4]。本文為此具體探討了培養基加溫溶解次數對醫院中成藥制劑微生物檢測結果的影響，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

玫瑰紅鈉瓊脂培養基、青枯菌半選擇性培養基、金黃色葡萄球菌[CMCC（B）26003]、白色念珠菌[CMCC（B）44102]均購自中國藥品生物制品檢定所。無菌磷酸鹽緩沖液（pH 7.2）購自北京三藥科技開發公司。培養皿、吸管均按2005年版《中國藥典》要求合理清洗、消毒與高壓滅菌。

1.2 方法

1.2.1 菌檢率分析

將金黃色葡萄球菌、白色念珠菌分別按2005年版《中國藥典》要求配制成100個/mL的供試菌液。另將已配制好的玫瑰紅鈉瓊脂培養基和青枯菌半選擇性培養基溶解，冷至約45℃后各取25mL分別對應傾注在2個培養皿中，35℃培養48h和25℃培養72h后行計數。從培養基冷卻到加溫溶解循環3次，并記錄每次菌落數的變化。

1.2.2 pH值考察

取10%葡萄糖溶液300mL于三角燒瓶中，置水浴上加溫，沸后冷卻至室溫，測定其pH值。并將從葡萄糖冷卻到加溫至沸循3次，記錄各次的pH值變化。

1.3 統計分析

使用SPSS19.0數據庫進行分析，菌數與pH值數對比采用卡方對比檢驗，P＜0.05代表有顯著性差異。

2 結 果

2.1 細菌生長數的變化

經過觀察，隨著溶解次數的增加，培養基上的金黃色葡萄球菌與白色念珠菌數都呈下降趨勢，不過對比差異不明顯。見表1。

表1 不同加溫溶解次數對細菌生長數的影響結果

2.2 pH值的變化

經過觀察，隨著溶解次數的增加，培養基上的pH值呈現明顯下降趨勢，對比差異明顯（P＜0.05）。見表2。

表2 不同加溫溶解次數對pH值的影響結果

3 討 論

當前中成藥確切的臨床療效和較低廉的價格越來越得到認可，使用的人群越來越多，但伴隨而來中成藥的安全性比以往則更需要引起重視[5]。中成藥安全性問題究其來源是多方面的，主要與中成藥本身特性和藥品受細菌污染程度等相關。中成藥細菌數測定是微生物的定量檢查，是用來判斷藥品被細菌污染程度和衛生質量評價的指標，也是檢測中藥藥品質量的指標之一。在檢測方法中，培養基稀釋法是利用擴大培養基的使用量或增加樣品的稀釋倍數，減少單位體積供試品的量，以達到降低供試品抑菌作用的目的。培養基稀釋法操作也較簡便，所需時間短，尤其適用于中成藥的微生物種類[6]。

但是在培養基檢測方法中，其加溫溶解次數過多將造成檢測的誤差。有調查顯示，10%葡萄糖溶液經過1～6次加溫，溶液逐漸濃縮，pH值會明顯下降。而微生物也是一個生命體，在反復多次的加溫中，大量的礦物質、蛋白質和水分都被破壞和丟失，在這樣一個沒有充足營養的培養基中微生物不能生長繁殖[1]。經過觀察，隨著溶解次數的增加，培養基上的金黃色葡萄球菌與白色念珠菌數都呈下降趨勢，不過對比差異不明顯。為此培養基的溶解數次不得＞3次，否則微生物限度檢查雖進行了培養，但很難檢查出樣品中的菌量數。pH值是微生物檢測的重要影響因素，不同的檢測樣品具有不同的pH值，如果忽略pH值對反應的影響，必然會使檢測結果產生偏差。本文經過觀察，隨著溶解次數的增加，培養基上的pH值呈現明顯下降趨勢，對比差異明顯（P＜0.05）。在預防中，首先要嚴格熱水定容原則，溶解后都要對培養基進行熱水定容，預防營養成分濃度不均。其次要檢測pH值的變化，確保pH值的穩定性。

總之，培養基加溫溶解次數能影響醫院中成藥制劑的微生物檢測數與pH值，要盡量減少溶解次數，保證檢測的準確性。

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[3] 馬文漪,楊柳燕.環境微生物工程.南京:南京大學出版社,2008: 45-47.

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[5] 中國藥品生物制品檢定所.中國藥品檢驗標準操作規范[M].北京:中國醫藥科技出版社,2005:45-47.

[6] 張崇生,申遂揚.加味藿香正氣丸的微生物限度的檢查[J].醫藥導報,2007,26(1):76-77.

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B

1671-8194（2013）11-0071-02