獻血者血液檢測不合格后追蹤檢測的分析與應(yīng)用

沈愛文

(廣州血液中心從化血站，廣東 廣州 510900)

獻血者血液檢測不合格后追蹤檢測的分析與應(yīng)用

沈愛文

(廣州血液中心從化血站，廣東 廣州 510900)

目的 對HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP抗體的ELISA單試劑檢測陽性和ALT不合格的獻血者進行追蹤檢測，判斷因檢測而非獻血者本身原因而暫時屏蔽的獻血者解除屏蔽的時間，擴大無償獻血者隊伍。方法 2008年1月至2012年12月在我站無償獻血的682名無償獻血者，對HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP抗體單試劑檢測陽性、或ALT不合格者，間隔六個月后再次抽血進行重新追蹤檢測，對檢測結(jié)果進行χ2檢驗，判斷與原來檢測結(jié)果的差異性。結(jié)果 追蹤檢測各項目合格率分別是：HBsAg 31.6% 、抗-HCV 40.1%、抗-HIV為61.1%、抗-TP 為14.2%，ALT為63.3%。經(jīng)χ2檢驗，各檢測項目追蹤檢測合格率有高度顯著性差異（P＜0.01）。結(jié)論 通過對單試劑檢測結(jié)果不合格或ALT不合格而暫時屏蔽的獻血者血液追蹤檢測，可以減少因HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP抗體的ELISA檢測假陽性或非病理性原因引起的ALT暫時增高而不合理誤淘汰獻血者，對建立和擴大固定獻血者隊伍，保護獻血者熱情，促進無償獻血工作具有重要意義。

HBsAg；抗-HCV；抗-HIV；抗-TP抗體；ALT

根據(jù)我國目前獻血相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定，對每一個無償獻血者都要用兩種不同廠家的試劑分別進行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP、轉(zhuǎn)氨酶（ALT）等傳染病標(biāo)志物及相關(guān)項目檢測，雙試劑陽性獻血者血液直接淘汰，單試劑陽性獻血者標(biāo)本則復(fù)檢測，雙孔復(fù)檢測陰性則獻血者合格，復(fù)檢測中只要有一孔呈陽性反應(yīng)則淘汰該血[1,2]。對HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP雙試劑陽性的獻血者屏蔽，以后不能獻血，而對單試劑陽性者則在6個月后復(fù)查再決定是否屏蔽，終止獻血資格。本站從2008年開始對ELISA單試劑陽性和ALT 不合格的獻血者6個月后進行復(fù)查，ELISA雙試劑陰性解除屏蔽，雙試劑陽性則永久屏蔽。對ELISA檢測單試劑陽性者6個月后再復(fù)查，兩次復(fù)查均陽性則屏蔽。而ALT受多種因素影響，故ALT不合格的獻血者可進行多次追蹤檢測，不永久屏蔽。本站自2008年1月至2012年12月期間對682例ELISA檢測單試劑陽性或ALT不合格獻血者進行追蹤檢測，結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

2008年1月至2012年12月我站無償獻血者682例，年齡18～55歲。經(jīng)ELISA檢測為HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP其中一項或一項以上單試劑陽性，或ALT不合格者。

表1 ELISA單試劑陽性或ALT不合格獻血者追蹤檢測結(jié)果

1.2 儀器和試劑

瑞士哈密頓公司ML-STAR和TECAN全自動加樣儀；FAME 全自動酶標(biāo)分析系統(tǒng)；日立7180生化分析儀；Anthos ht 3酶標(biāo)儀、科華酶標(biāo)儀；Itswell實驗室數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；HBsAg、抗-HCV ELISA試劑盒為雅培和科華生物工程公司生產(chǎn)，抗-HIV ELISA試劑盒為伯樂和科華生物工程公司生產(chǎn)，抗-TP ELISA試劑盒為萬泰和科華生物工程公司生產(chǎn)，ALT速率法試劑盒為亞太和科華生物工程公司生產(chǎn)，全部試劑批批檢定合格，均在有效期范圍內(nèi)使用。

1.3 方法

682例追蹤檢測標(biāo)本按原檢測不合格項目分類檢測，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的檢測用ML-STAR和TECAN全自動加樣儀加樣，用FAME 全自動酶標(biāo)分析系統(tǒng)進行孵育、洗版、加試劑、比色等后處理，用日立7180生化分析儀進行ALT檢測，所有數(shù)據(jù)用Itswell實驗室數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進行匯總。所有檢測步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

2 結(jié) 果

ELISA檢測單試劑陽性或ALT不合格獻血者6個月后追蹤檢測結(jié)果如表1。經(jīng)χ2檢驗，χ2=168.6，P＜0.01，各項目追蹤檢測的合格率有顯著性差異。

3 討 論

血液質(zhì)量最主要是指獻血者血液檢測的質(zhì)量，關(guān)系到獻血者的健康和受血者的輸血安全。根據(jù)衛(wèi)生部的血液檢測規(guī)定，對所有應(yīng)用于臨床輸注的獻血者血液的必須進行輸血相關(guān)傳染病標(biāo)志物，包括HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP和ALT的檢測，病原體標(biāo)志物一般用ELISA法檢測，ALT用速率法或賴氏法檢測，每個項目要用兩個不同廠家的試劑同時進行檢測，檢測結(jié)果陽性血視為不合格血，應(yīng)進行消毒處理，不能用于臨床輸注。

是酶聯(lián)免疫吸附試驗 (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA)是20世紀(jì)70年代發(fā)明的一種檢測抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測方法，因其快速、靈敏、特異、簡單等特點，發(fā)展十分迅速，已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域的檢測和應(yīng)用研究。但ELISA影響因素多，如試劑質(zhì)量、標(biāo)本因素、體內(nèi)某些內(nèi)源性物質(zhì)（酶）的影響、操作技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)對照、手工或全自動酶免分析儀的運行情況等均可影響檢測結(jié)果。因此，對于輸血相關(guān)傳染病標(biāo)志物（抗原和抗體）的檢測有時出現(xiàn)單試劑陽性的情況，要具體問題具體分析，不能簡單將陽性結(jié)果獻血者屏蔽或淘汰。單試劑檢測陽性結(jié)果可能跟下面因素有關(guān)：一是獻血者感染病毒或病原體后產(chǎn)生抗體，檢測時由于儀器出現(xiàn)故障、或手工操作不當(dāng)或技術(shù)原因可造成檢驗結(jié)果的假陽性。二是ELISA試劑盒均采用基因工程或合成多肽抗原或抗體包被固相，由于病毒存在變異，尤其是HCV和HIV變異度很高，不同廠家選用的抗原或抗體組合不完全相同，來源和用量方面也有差異，就造成不同廠家的ELISA試劑盒檢測結(jié)果有差異，經(jīng)常出現(xiàn)同一標(biāo)本這個廠家試劑做出來陽性，另一廠家試劑做出來陰性的情況[3]，尤其是弱陽性標(biāo)本，另外檢測原理不一致也可造成這種情況。三是由于假陽性引起。標(biāo)本溶血、凝集不全等外源因素、或內(nèi)源性物質(zhì)如類風(fēng)濕因子、高濃度的非特異性免疫球蛋白、嗜靶抗原的自身抗體、類地高辛、類AFP樣物質(zhì)、重乳糜血清、膽紅素、血紅蛋白及血液黏度過大等均可引起假陽性[3,4]。

本研究的追蹤檢測結(jié)果顯示，各傳染病標(biāo)志物項目單試劑檢測陽性或ALT不合格的獻血者6個月后血液追蹤檢測，其合格率有顯著性差異，其中ALT的合格率最高，達63.3%，這是因為ALT影響因素多，大多情況下是由非病理因素引起的，如劇烈運動、飲酒等。在正常情況下，ALT主要存在于各組織細胞中，以肝細胞含量最高，其次為腎臟、心肌、骨骼肌和其它器官，當(dāng)肝臟受損時，此酶即釋放于血清中，因此血清中含量增加。臨床上將ALT增高作為診斷肝炎的一個指標(biāo)，但它并不是肝炎的特異性指標(biāo)，一些非病理性因素也會引起ALT增高，如經(jīng)常大量飲酒，營養(yǎng)過剩引起肥胖，勞累、服藥、飲食不當(dāng)?shù)龋∪鈩×一顒拥染墒勾嗣富钚栽龈遊5]。如獻血者是因為非病理性因素引起的ALT增高，當(dāng)消除該因素后，過6個月后再檢測則很多會轉(zhuǎn)變?yōu)楹细瘛BsAg、抗-HCV、抗-HIV分別是HBV、HCV、HIV的血清學(xué)標(biāo)志物，三者均為病毒，傳播途徑相同，抗體產(chǎn)生方式也大致相似，ELISA試劑盒檢測原理相似，均使用一遍進口試劑和一遍國產(chǎn)試劑進行檢測，單試劑陽性者6個月后追蹤檢測其合格率無顯著性差異。抗-TP是梅毒螺旋體的抗體，6個月后追蹤檢測其合格率最低。

對于ELISA檢測單試劑陽性的獻血者6個月后追蹤檢測仍為單試劑陽性的情況，有多種原因：可能仍為假陽性結(jié)果引起。或是獻血者感染了弱病毒株[6]，一般情況下如獻血者感染病原體而出現(xiàn)ELISA單試劑陽性時，6個月后檢測大多數(shù)仍為雙試劑陽性反應(yīng)，但如感染了弱病毒株，則病程進展緩慢，產(chǎn)生可檢測的抗原或抗體量少，6個月后檢測仍可能為單試劑陽性，本研究中各個項目都有6個月后檢測仍為單試劑陽性的情況。

通過對ELISA檢測單試劑陽性或ALT不合格獻血者的追蹤檢測，可以減少因為ELISA假陽性或非病理性因素引起的ALT增高而被誤淘汰的獻血者，既保證了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，不漏檢任何一個陽性標(biāo)本，保證用血者輸血安全，也不輕易誤淘汰任何一個熱情的獻血者，對無償獻血工作具有重要意義。

[1] 戴涌,陳慧萍,湯恒,等.2004年湖北省內(nèi)使用的HIV抗體ELISA診斷試劑的評估分析[J].江西醫(yī)藥,2005,40(10):623-624.

[2] 余剛寶.某國產(chǎn)與進口HIV診斷試劑檢測結(jié)果分析[J].臨床輸血與檢驗,2010,12( 1):57-58.

[3] 陳景芬,張員梅,劉殿香.ELISA檢測抗HCV影響因素分析[J].中華醫(yī)學(xué)實踐雜志,2007(6):152.

[4] 張德志.關(guān)于ELISA檢測影響因素分析[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2010, 8(4):53.

[5] 趙彩萍,王雪峰.無償獻血者ALT增高的相關(guān)因素分析[J].醫(yī)學(xué)信息,2010,31(9):2582-2583.

[6] Deacon NJ,Tsykin A,Solomon A,et a1.Genomic structure of an attenuated quasi species of HIV-1 from a blood transfusion donor and recipients[J].Science,1995,270(5238):988-991.

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1671-8194（2013）20-0095-02