塞克硝唑的抗菌活性實驗

潘福東

【摘 要】目的 測定實驗藥物塞克硝唑對口腔厭氧病原菌的體外抗菌作用。方法 本試驗采用美國國立臨床實驗室標準化研究所（CLSI/NCCLS）推薦的厭氧菌藥物敏感試驗-瓊脂稀釋法，檢測塞克硝唑對6株模式株和參考株及35株口腔臨床分離株的體外抗菌活性，并與同類藥物甲硝唑進行比較。結果 塞克硝唑和甲硝唑對6株模式株和參考株的MIC值分別是0.062～0.5μg/ml、0.125～0.5μg/ml；對35株臨床分離株的MIC值分別是0.031～0.5μg/ml、0.031～1.0μg/ml。結論 塞克硝唑與甲硝唑相比體外抗厭氧菌活性相似或略強。

【主題詞】塞克硝唑 抑菌實驗

【中圖分類號】R96 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-5158（2013）03-0369-01

口腔臨床常見的感染性疾病如牙周炎、冠周炎均為厭氧菌感染為主的疾病，厭氧菌檢出率在95%左右。5-硝基咪唑類藥物[如甲硝唑（MTZ）等]被認為是抗無芽孢厭氧菌感染效果較好的藥物。塞克硝唑（secnidazole，SNZ）是近年來國外臨床廣泛使用的安全、有效的抗脆弱擬桿菌、幽門螺桿菌、陰道滴蟲及腸道阿米巴的5-硝基咪唑類藥物。與其它5-硝基咪唑類藥物相比，具有有效血藥濃度維持時間長（17～29h）、不良反應少等優點。目前國內塞克硝唑僅應用于婦科感染性疾病的治療，還未見用于口腔感染性疾病的治療，為進一步了解塞克硝唑對口腔厭氧菌株的敏感性，本文對塞克硝唑進行體外抑菌實驗，為本品在口腔臨床抗厭氧菌感染中的應用提供有意義的實驗數據。

一、材料與方法1、材料

（1）實驗藥和對照藥

實驗藥 塞克硝唑原藥粉，白色粉劑，批號20041216，由浙江南洋藥業股份有限公司提供。

對照藥 甲硝唑原藥粉，白色粉劑、批號HEC-ME-040634，由浙江南洋藥業股份有限公司提供。

（2）實驗菌株 選擇口腔臨床常見的厭氧病原菌菌株作為本實驗的實驗菌株，其中模式株和參考菌株6株，臨床分離株35株，均從口腔臨床牙周炎患者的病灶位點分離。質控株脆弱擬桿菌ATCC25285；實驗菌株（模式株和參考菌株）6株：牙齦卟啉單胞菌（Porphynomonas gingivalis）ATCC33277，牙齦卟啉單胞菌381，牙髓卟啉單胞菌（Porphyromonas endodentalis）ATCC34506，中間普雷沃菌（Prevotella intermedia）ATCC25611，產黑素普雷沃菌（Prevotella melaninogenica）ATCC

13040，具核梭桿菌（Fusobacterium nucleatum）ATCC10953。

（3）培養基 Brain-heart infusion-S（BHI-S），Bio-Merieux產品，批號

51009。

（4）厭氧孵育箱 DYII型，浙江義烏。

2、方法

采用美國臨床實驗室標準化研究所（CLSI/NCCLS）推薦的厭氧菌藥物敏感試驗（Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobes） 瓊脂稀釋法（Agar Dilution Method）測定實驗藥物和對照藥物的抗菌活性，用最小抑菌濃度（minimum inhibitory concentration，MIC）表示。

（1）藥物實驗液和含藥瓊脂平皿的配制

藥物實驗貯存液的配制 實驗藥和對照藥均用無菌蒸餾水配制成藥物濃度為5120μg/ml的貯存液（-4℃保存一周）。

含藥瓊脂平皿的配制 采用對倍稀釋法，用BHI液體培養基分別將實驗藥和對照藥的貯存液（5120 μg/ml）配制成系列濃度的實驗藥液：2560、1280、640、320、160、80、40、20、10、5、2.5、1.25、0.62和 0.31μg/ml。分別取上述不同濃度的藥物實驗液2ml加18ml濃度為48～50℃的BHI-S瓊脂混合均勻后傾注平皿，配制系列對倍遞減濃度的含藥瓊脂平皿（256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.062和0.031μg/ml）。

（2）實驗細菌液的準備 在BHI-S瓊脂表面接種實驗菌株，置厭氧培養箱內（80% N2+10% CO2+10% H2）培養48h，取48h純培養物接種BHI-S肉湯后放置厭氧培養箱內（80% N2+10% CO2+10% H2）培養48h，校正實驗菌液的濃度為0.5McFarland（108CFU/ml）備用。

（3）MIC測定 在系列含藥平皿表面用微量加樣器分別點種細菌濁度為108CFU/ml（0.5 McFarland標準）的實驗菌液，點種量為7μl。將點種細菌的實驗平皿放置在厭氧箱內（80% N2+10% CO2+10% H2）培養48h。實驗菌對照：將實驗菌液點種在不含藥液的BHI-S瓊脂表面。厭氧培養（80% N2+10% CO2+10% H2）48h后觀察MIC結果。

二、結果

由表1可見塞克硝唑和甲硝唑對質控菌株脆弱擬桿菌ATCC25285的MIC的測定值與CLSI/NCCLS公布的參考值接近。對6株模式株和參考株的MIC值分別為0.062～0.5μg/ml、0.125～0.5μg/ml，對35株臨床分離株的MIC分別為0.031～0.5μg/ml、0.031～1.0μg/ml。結果提示，與甲硝唑相比較，塞克硝唑對這幾種厭氧菌的體外抗菌活性相似或略強。表1塞克硝唑（SNZ）和甲硝唑（MTZ）對實驗細菌的。

三、討論

塞克硝唑與甲硝唑同屬5-硝基咪唑類藥物，其抗菌譜與硝基咪唑類其它抗菌藥物沒有明顯差異。與甲硝唑相比，塞克硝唑的藥動學特性如生物利用度、存在活性代謝物和終末消除半衰期（塞克硝唑t1/2β為17～29h，甲硝唑為7～8h）主要表現量的差異，出現差異的原因是由于氮環上結合于硝基鄰近的取代基決定的。國外塞克硝唑主要用于治療阿米巴、賈第鞭毛蟲、滴蟲和細菌性陰道炎，絕大多數都是使用單劑方案，單劑治療是塞克硝唑的最大特點，有報道塞克硝唑在牙齦組織內藥物濃度與血藥濃度大體平行，說明該藥對牙齦組織有較好的穿透作用，同時該藥在牙齦組織的半衰期長達28.8h。該藥口服吸收好，口服和靜脈給藥差異無顯著性口腔臨床常見的牙周炎和冠周炎均以厭氧菌感染為主，本實驗通過塞克硝唑和甲硝唑對6株模式株和參考株及35株臨床分離株的測定表明，塞克硝唑的體外抗厭養菌活性相似或略強于甲硝唑。鑒于塞克硝唑的血液維持濃度較長，胃腸道不良反應小，耐受性良好，單劑口服方便等特點，塞克硝唑在治療口腔厭氧菌感染方面有較大的應用前景。

參考文獻：

[1]于佳輝 李淼 肖麗英 丁一 肖曉蓉 朱珠 龔其美，塞克硝唑對口腔厭氧病原菌體外抗菌活性的測定，論文網，2009，07