探討三種梅毒血清學(xué)檢驗方法的臨床應(yīng)用

袁 柳

（株洲市一醫(yī)院檢驗科，湖南 株洲 412000）

探討三種梅毒血清學(xué)檢驗方法的臨床應(yīng)用

袁 柳

（株洲市一醫(yī)院檢驗科，湖南 株洲 412000）

目的 通過分析比較 3 種梅毒血清學(xué)檢測方法的敏感性和特異性，探討三種梅毒血清學(xué)檢測法臨床應(yīng)用。方法 甲苯胺紅不加熱血消試驗（TRUST）、應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗（TP-ELIA）、梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）三種梅毒血清檢測方法對 84 例確診的梅毒患者與 916 例非梅毒患者進行梅毒檢測實驗，比較三種方法值得正確率、靈敏度、特異性。結(jié)果 三種梅毒血清檢測方法靈敏度相比較，以TPPA 靈敏度最高、ELISA 的靈敏度次之。三種方法的特異性比較，TPPA 與 ELISA 的特異性最高，TRUST 的特異性最低。結(jié)論 ELISA檢測法特異性強、靈敏度較高、操作簡便，試劑價格比較便宜，是臨床梅毒血清檢測的首選方法。

梅毒；TRUST、TP-ELISA、TPPA

梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的慢性感染性疾病，主要通過性接觸傳播，梅毒孕婦則可以通過胎盤感染胎兒而引起先天性梅毒[1]。目前臨床上梅毒血清檢測的方法有：梅毒膠體金法（SYP）、甲苯胺紅不加熱血消試驗（TRUST）、梅毒螺旋體血球凝集試驗（TPHA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（TP-ELISA）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）等。梅毒血清檢測的方法很多，本文采用酶聯(lián)免疫吸附試驗 （TPELISA）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）、甲苯胺紅不加熱血消試驗（TRUST）三種梅毒血清檢測方法同時檢測了1000例標(biāo)本，并對檢測結(jié)果進行比較分析，為臨床選擇檢測方法提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 根據(jù)梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]

確定的早期潛伏梅毒15例，一期梅毒28例，二期梅毒32例，三期梅毒9例。臨床床確診類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎者9例、結(jié)核病患者12例、臨床治愈后復(fù)查者18例和健康體檢者877例。

1.2 試劑

TRUST試劑上海榮盛生物技術(shù)有限公司提供、TPPA由日本富士株式會社提供、ELISA試劑盒購自自珠海麗珠試劑有限公司。

1.3 方法

按照TRUST、TP-ELISA和TPPA試劑說明書進行操作，一份血清標(biāo)本采用這三種方法做平行檢測。

2 結(jié) 果

三種檢查方法檢查的結(jié)果：陽性率見表1，靈敏度和特異性見表2，臨床治愈后復(fù)查者因情況特殊，不參與靈敏度和特異性計算。

表1 TRUST、TP-ELISA和TPPA三種方法檢測出的結(jié)果

表2 3種檢測方法靈敏度和特異性結(jié)果比較

3 討 論

梅毒是一種性病，人是梅毒的唯一傳染源，可通過性傳播傳染或臍帶血傳給下一代。人感染梅毒后，血清會產(chǎn)生一系列反應(yīng)，產(chǎn)生兩種抗體，一種是特異性抗體，可將螺旋體殺死或溶解，對機體再感染有保護作用。另一種是非特異性抗體，能與正常生物組織的類脂抗原發(fā)生非特異性結(jié)合，對人體沒有保護作用。臨床梅毒血清檢測方法有有很多，主要可分為兩大類，一類是非梅毒螺旋體抗原血清試驗又稱類脂血清反應(yīng)，即用正常的牛心肌的磷脂作為抗原，檢測患者血清中抗心磷脂抗體。如性病實驗室試驗（VDRL）、快速血漿反應(yīng)素（RPR）、甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗（TRUST）均屬于類脂質(zhì)血清反應(yīng)。一類是檢測梅毒特異性抗體，用活的或死的梅毒螺旋體或其他成分作為抗原檢查抗梅毒螺旋體抗體，如酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）；用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒，此致敏顆粒與人血清中的抗梅毒螺旋體抗體結(jié)合，產(chǎn)生可見的凝集反應(yīng)，如梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗 （TPPA）。

通過本次試驗結(jié)果，結(jié)合臨床治療過程中試驗室梅毒血清檢測情況得知：TRUST 是用心磷脂作抗原，檢查患者血清中的反應(yīng)素。由表1、表2的結(jié)果可得知，TRUST檢測法的是非梅毒特異性抗體，容易出現(xiàn)假陽性。TRUST與TP-ELISA、TPPA相比靈敏度低、特異性差。由于非特異性抗體是在梅毒一期后增加，因此，TRUST不適合做梅毒的早期診斷。但是TRUST檢測方法，試劑價格便宜，操作簡單，反應(yīng)快，并且在二期梅毒滴度最高，臨床主要用于梅毒的篩選和療效觀察。TP-ELISA是將梅毒特異性抗原包于固相板孔中，檢測患者血清中的特異性抗體。TP-ELISA利用酶的 放大系統(tǒng)，提高了檢測的靈敏度，甚至可以比TPPA能更早檢測梅毒螺旋體特異性抗體[3]，適合做梅毒的早期診斷。TP-ELISA靈敏度、特異性均較高，操作簡單，試劑價格相對比較便宜，適用于血站梅毒篩選，醫(yī)院大批量體檢，梅毒的早期檢查。但是，此法是檢驗患者血清中抗梅毒螺旋體IgG抗體。由于，患者感染梅毒后，血清中產(chǎn)生抗體，經(jīng)過治療后仍然長期存在，甚至終身不會消失，復(fù)查患者血清中仍出現(xiàn)陽性反應(yīng)。因此，此法檢測的結(jié)果呈陽性，只能說明該患者曾經(jīng)或現(xiàn)在正感染梅毒。所以，此法不能用于患者的治療觀察。TPPA法靈敏度高、特異性高。但是，試劑成本高，用于半定量分析檢測時，操作過程繁瑣，所耗時間長，不能用于快速檢測。TPPA檢測是患者血清中梅毒的特異性抗體，復(fù)查患者陽性率高。鑒于TPPA靈敏度高、特異性強等優(yōu)點，建議用于臨床梅毒的確證實驗。

綜上所述，ELISA法有著操作簡單、快捷等優(yōu)點，檢測的結(jié)果假陰性率較低，用作篩選實驗，減少漏診率。檢測結(jié)果準(zhǔn)確率高，減少了患者心里壓力和家庭矛盾糾紛，也減少了醫(yī)療糾紛。但是，ELISA法檢測的是患者血清中的梅毒特異性抗體，復(fù)診患者出現(xiàn)假陽性率高。因此，有既往病史的患者應(yīng)采用ELISA法和TRUST法兩種方法進行篩選，檢查結(jié)果呈陽性，再用TPPA法確診，以免漏診。

[1]葉順章.性傳播疾病的實驗室診斷[M].北京:科學(xué)出版社,2001.

[2]龍振華,張石革.性傳播疾病診斷與藥物治療學(xué)[M].北京:北京科學(xué)技術(shù)出版社,1999:334-336.

[3]孫立平,陳勝明.兩種梅毒檢驗方法的適用性分析[J].中國輸血雜志,2002,15(4 ):247-248.

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