不同廠家三黃片中鹽酸小檗堿溶出度的比較

陳曉蘭，石晉枝，張永萍，徐 劍，劉 毅

(貴陽中醫學院，貴州 貴陽 550002)

三黃片是由大黃、黃芩浸膏和鹽酸小檗堿經加工提取制成的糖衣片或薄膜片，可清熱解毒、瀉火通便，用于三焦熱盛所致目赤腫痛、口鼻生瘡、咽喉腫痛、牙齦腫痛、心煩口渴、尿黃、便秘，亦用于急性胃腸炎、痢疾[1]。其臨床應用廣泛，生產廠家眾多，但各廠家生產條件和生產工藝的不同，臨床療效也不同。三黃片中鹽酸小檗堿是發揮抗菌消炎作用的主要成分，即三黃片中鹽酸小檗堿的含量及在體內的釋放速度與程度都直接影響臨床療效。而在三黃片的質量標準中沒有對鹽酸小檗堿等有效成分溶出度的控制指標。本研究中測定了市場上10個廠家的三黃片中鹽酸小檗堿的溶出度[2]，計算溶出率且分別繪制累積溶出曲線，并對各溶出曲線進行方程擬合，為三黃片的質量評價提供參考和依據。

1 儀器與試藥

RC－80型藥物溶出測試儀(天津天光);紫外可見分光光度計(GBC Cintra，澳大利亞照生公司);AE/240型電子天平(上海梅特儀器有限公司);科導SK8210HP型超聲波清洗器(上海科導超聲儀器有限公司);JA2030型全自動天平(上海良平儀器表有限公司)。鹽酸小檗堿對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為110713－200911);甲醇(色譜純，天津市科密歐化學試劑有限公司);鹽酸(重慶川東化工有限公司，批號為20101101);水為純化水。10個廠家樣品分別為:A廠家(襄樊隆中藥業有限責任公司，批號為100901，50片/袋);B廠家(河南圣光集團三恩藥業有限公司，批號為11051501，規格為50片/袋);C廠家(廣西恒拓集團仁盛制藥有限公司，批號為100902，規格為50片/袋);D廠家(河南濟源濟世藥業有限公司，批號為20110917，規格為24片/盒);E廠家(亞寶藥業集團股份有限公司，批號為110507，規格為20片/盒);F廠家(廣西金頁制藥有限公司，批號為100901，規格為50片/袋);G廠家(河南創新藥業有限公司，批號為1103211，規格為48片/袋);I廠家(陜西盤龍制藥集團有限公司，批號為2011001，規格為24片/盒)。H廠家(安徽華佗國藥股份有限公司，批號為20110404，規格為24片/盒);J廠家(湖北仁悅藥業有限公司，批號為110803，規格為50片/袋)。前8種均為糖衣片，后兩種均為薄膜片。

2 方法與結果

2.1 測定波長選擇

取鹽酸小檗堿對照品溶液，在200～400 nm波長范圍進行紫外掃描，選擇具有較大較穩定吸收的波長345 nm為測定波長。

2.2 溶液制備

精密稱取鹽酸小檗堿對照品9.46 mg，加0.1 mol/L鹽酸溶液制成9.46 g/L的貯備液。再精密量取貯備液0.1 mL置10 mL容量瓶中，用 0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋并定容至 9.46 μg/mL，即得對照品溶液。取各廠家的三黃片各兩片，分別研細，倒入具塞錐形瓶中，精密加入甲醇－鹽酸(500∶1)的混合溶液60 mL，并用溶劑潤洗研缽，密塞，稱定質量，超聲處理30 min，放冷，再稱定質量，用甲醇補足失重，濾過，精密量取續濾液1 mL，置25 mL容量瓶中用甲醇－鹽酸(500∶1)的混合溶液稀釋至刻度線，即得供試品溶液。

2.3 方法學考察

標準曲線繪制:取鹽酸小檗堿對照品溶液，分別取鹽酸小檗堿的貯備液 0.05，0.10，0.30，0.50，0.70，0.90，1.10，1.30 mL 用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋并定容至50 mL容量瓶中，以0.1 mol/L鹽酸溶液為空白對照，在345 nm波長處測定吸收度。回歸方程為Y=45.367 X+0.035(R2=0.999 3)。結果表明，鹽酸小檗堿質量濃度在0.946～24.600 μg/mL范圍內與吸光度的線性關系良好。

精密度試驗:取鹽酸小檗堿對照品溶液，重復測定6次。結果的 RSD=1.53%，表明儀器的精密度良好。

重復性試驗:取同一批供試品，依法制備6份供試品溶液，測定吸光度。結果的 RSD=2.70%，表明方法重復性良好。

穩定性試驗:取同一批供試品溶液，分別于 0，2，4，6，8，12 h時進行測定。結果吸光度無明顯變化，RSD=1.27%，表明鹽酸小檗堿在甲醇－鹽酸(500∶1)的混合溶液中12 h內穩定。

2.4 樣品含量測定

按照2010版《中國藥典(一部)》，三黃片中鹽酸小檗堿的含量測定方法中供試品溶液制備方法處理供試品，在測定波長345 nm處測定吸收度，計算鹽酸小檗堿的含量，每個廠家平行測定2片，結果三黃片中鹽酸小檗堿平均含量分別為A廠家10.91 mg/片，B 廠家 24.70 mg/片，C 廠家 12.80 mg/片，D 廠家 15.54 mg/片，E 廠家 14.65 mg/片，F 廠家 12.48 mg/片，G廠家 16.30 mg/片，H 廠家 16.55 mg/片，I廠家 18.13 mg/片，J廠家 19.75 mg/片。

2.5 溶出度測定

溶出介質選擇:取A廠家的三黃片3片，平行3份，分別放入水、0.1 mol/L鹽酸溶液及人工胃液(不含胃蛋白酶)等溶出介質(經超聲脫氣處理)中，溶出介質體積為1 000 mL(符合漏槽條件)，轉速是100 r/min，(37±0.5)℃恒溫，將供試品置溶出杯中，開始計時，至規定時間(10，20，30，60，90，120 min)時取樣(取樣位置固定)，每次取樣5 mL(同時補加同溫度的上述溶出介質5 mL)，趁熱過濾，取續濾液照2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅤA中紫外－分光光度法，即時測定吸收度。結果以0.1 mol/L鹽酸溶液為溶出介質時，鹽酸小檗堿的累積溶出量最大。

溶出時間考察:取A廠家的三黃片1片，平行3份，溶出介質為0.1 mol/L鹽酸溶液1 000 mL(經超聲脫氣處理，符合漏槽條件)，轉速是100 r/min，(37±0.5)℃恒溫，將供試品置溶出杯中，開始計時，至規定時間(10，20，30，60，90，120，180，300 min)時取樣(取樣位置固定)，每次取樣5 mL(同時補加同溫度的上述溶出介質5 mL)，趁熱過濾，取續濾液照2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅤA中紫外－分光光度法，即時測定吸收度。結果至120 min時多個廠家三黃片中鹽酸小檗堿的累積溶出量達最大值，至180min時鹽酸小檗堿的累積溶出量減少或不再增加，故測定溶出度的取樣時間為 10，20，30，60，90，120 min。

樣品溶出度測定:取各廠家三黃片1片，平行6份，溶出介質為0.1 mol/L鹽酸溶液1 000 mL(經超聲脫氣處理，符合漏槽條件)，轉速是100 r/min，(37±0.5)℃恒溫，將供試品置溶出杯中，開始計時，至規定時間(10，20，30，60，90，120 min)時取樣(取樣位置固定)，每次取樣5 mL(同時補加同溫度的上述溶出介質5 mL)，趁熱過濾，取續濾液照2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅤA中紫外－分光光度法，即時測定吸收度。結果見圖1。

溶出方程擬合:通過數學模型對試驗中的溶出數據進行擬合，推測溶出機制。在藥物釋放研究中常用的數學模型有動力學模型，包括零級動力學模型、一級動力學模型、Weibull分布模型、Higuchi模型等[3－4]。結果見表 1。

3 討論

圖1 不同廠家三黃片累積溶出曲線(n=6)

表1 不同廠家三黃片中鹽酸小檗堿溶出模型擬合結果

雖然各廠家執行的同一標準，但由于生產條件和生產工藝及輔料的不同，各廠家生產的三黃片中鹽酸小檗堿的含量測定結果存在明顯的差異。多數廠家的三黃片中鹽酸小檗堿在30 min時就能溶出50%，在2 h時溶出曲線可達到平衡，僅有J廠家能達到90%以上。另外除E廠家的三黃片外，其余均符合Weibull模型分布。然而中藥成分多樣復雜，其療效受多方面因素的影響，這些建立在西藥制劑上的溶出模型對中藥制劑的適用性還有待進一步的考察。

在試驗過程中發現，鹽酸小檗堿的溶出度易受溫度的影響，在熱水中的溶解度較高而在冷水中的溶出度較低，在取出溶出液到測定的過程中若溫度降低，很有可能會使鹽酸小檗堿析出，溶出液中鹽酸小檗堿的濃度變小，導致測定時吸光度減小，試驗結果的不準確。所以在試驗過程中應保證即取即測，盡量避免對試驗結果產生影響。

本試驗對不同廠家三黃片中鹽酸小檗堿的溶出度進行了研究，分析不同廠家生產的三黃片的體外溶出度的差異，為三黃片的質量控制和質量提升奠定基礎，同時也為三黃片的臨床應用提供參考依據。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫藥科技出版社，2010:457.

[2]龔海紅.藥物溶出度試驗的應用概述[J].海峽藥學，2008，20(11):123－125.

[3]黎 陽.基于擬合方法的藥物溶出度數據的計算機處理[J].廣西民族學院學報:自然科學版，1998，4(3):46－47.

[4]蘇銀發，陳浩華，白學敏，等.Excel規劃求解法在藥物溶出模型擬合和優選中的應用[J].中國醫院藥學雜志，2007，27(6):839－841.