白芷提取物的穩定性研究

何珊珊，武尉杰，譚 睿

(西南交通大學生命科學與工程學院，四川 成都 610031)

本刊網址:http://www.nsmc.edu.cn 作者投稿系統:http://noth.cbpt.cnki.net 郵箱:xuebao@nsmc.edu.cn

白芷為傘形科植物白芷［Angelica dahurica(Fisch.ex.Hoffm.)Benth.et Hook.f.］或杭白芷［Angelica dahurica (Fisch.ex.Hoffm.)Benth.et Hook.f.var.formosana (Boiss.)Shan.et Yuan］的干燥根。現市面上所售白芷，按產地不同可以分為祈白芷(主要產地為河北)、禹白芷(主要產于河南)和川白芷(主要產地是四川和杭州)。由于白芷藥材植物來源和品種有所差異，收獲、加工及儲存的方式也不相同以及生態環境等因素的影響，不同產地的白芷產品之間會存在一定的差異［1］。白芷味辛，微苦，氣芳香。具有抗炎、解熱、鎮痛、祛風、通竅、行氣活血的功能。杭白芷脂溶性成分方面的研究，主要為香豆素和香豆苷類。趙興增等［2］對杭白芷的化學成分進行了進一步的研究，得到了8 個香豆素和香豆素苷，包括歐前胡素(imperatorin，Ⅰ)、異歐前胡素(isoimperatorin，Ⅱ)、水合氧化前胡素(oxypeucedanin，Ⅲ)、比克白芷素(byakangelicin，Ⅳ)等。白芷的提取方法有多種，經鄭翠英等［3］研究表明白芷中香豆素的提取證明提取方法中:滲漉法優于回流提取和超聲法。本實驗利用乙醇提取法提取白芷［4］，并用紫外分光光度法［5］對白芷提取物的穩定性進行研究，為白芷制劑的提取與儲存提供依據。

1 儀器與試劑

1.1 實驗儀器

旋轉蒸發器RE-52AA(上海亞榮生化儀器廠)，T6 新世紀紫外可見分光光度計(T6 spectrophotometer)(北京普析通用儀器有限責任公司)，數顯恒溫水浴鍋HH-4(金壇市岸頭良友實驗儀器廠)，電子分析天平AB204-S(上海精科天平)，玻璃比色皿(江蘇咸徳環保科技有限公司)

1.2 材料與試劑

白芷切片于2012 年3 月下旬購于蘭州榆中夏官營經三路春草堂，經檢驗符合藥典規定。無水乙醇(含量不少于99.7%，ρ = 0.789 ～0.791 g/mL(20℃)天津化學試劑有限公司)，CuCl2(三級，北京化工廠)，FeCl2(分析純(AR)天津市恒興化學試劑制造有限公司)，Na2HPO4(分析純，上海中秦化學試劑有限公司)，NaH2PO4(分析純，萊陽市雙雙化工有限公司)，H2O2(分析純，天津市百世化工有限公司)，二次純水。白芷提取物:把白芷切片壓碎至一定大小，稱取5.0 g，以25.0 mL 的70%的乙醇浸泡24 h，在常溫常壓下回流提取兩次，每次1 h。將兩次濾液合并后旋轉濃縮備用。

2 白芷提取物的穩定性研究

2.1 溶液的配制

白芷提取物溶液的配制:精確稱取所得提取物250.0 mg，以70%的乙醇溶液定容到250.0 mL，將其配制成1.0 mg/mL 的溶液，備用。

緩沖溶液的配制:精確稱取24.20 g NaH2PO4，加 水 至 1 000.0 mL，得 A 液;精 確 稱 量NaH2PO471.63 g，加水至1 000.0 mL 得B 液。分別取A、B 液的不同體積配制成pH 值分別為2.0、4.0、6.0、7.0、8.0、10.0 的磷酸鹽緩沖溶液，備用。

2.2 最大吸收波長的測定

以70%的乙醇溶液為參比液，在200 ～600 nm波長范圍內測定白芷提取物溶液的紫外吸收情況，根據結果確定在最大吸收A =0.944 處的波長即為最大吸收波長，即λ=299 nm(圖1)。

2.3 光照對提取物穩定性的影響

取提取物溶液兩份，各25.0 mL，分別放置在自然光和避光處，以70%的乙醇溶液為參比溶液，每隔1 h 分別測定一次溶液在最大吸收波長(299 nm)處的紫外吸收，觀測6 h 內溶液吸光度變化，結果見圖2。

2.4 溫度對提取物穩定性的影響

取白芷提取物溶液5 份，各15.0 mL，分別置于20 ℃、40 ℃、60 ℃、70 ℃、80 ℃水浴中保溫，以70%的乙醇溶液為對照，分別測定個溶液在299 nm 處的最大吸光度，觀察其變化情況，結果見圖3。

2.5 pH 值對提取物穩定性的影響

量取提取物溶液6 份，每份8.0 mL，分別以pH值為2.0、4.0、6.0、7.0、8.0、10.0 的緩沖液定容到10 mL，以70%的乙醇溶液為參比液，測定各溶液的紫外吸收情況，測定299 nm 處的吸光度變化，結果見圖4。

2.6 氧化劑對提取物穩定性的影響

精確配制濃度分別為5%、10%、15%、20%、25%、30%的過氧化氫溶液，量取提取物溶液6 份，各8 mL，分別用上述各溶液定容到10 mL，以70%的乙醇溶液為對照，測定所得6 份溶液的紫外－可見吸收，觀察各溶液在299 nm 處的紫外吸收情況，結果見圖5。

2.7 金屬離子對提取物穩定性的影響

Fe2+的影響:以FeCl2為藥品，分別配制濃度為0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL、0.6 mg/mL、0.8 mg/mL、1.0 mg/mL 的溶液。量取提取物溶液6份，每份8 mL，分別以上述溶液定容至10 mL，以70%的乙醇溶液為參比液測定各溶液在299 nm 波長處的吸光度，觀察其變化情況，見圖6。

Cu2+的影響:以CuCl2為試劑，配制濃度分別為0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL、0.6 mg/mL、0.8 mg/mL、1.0 mg/mL 的溶液。量取提取物溶液6份，各8 mL，分別以上述溶液定容至10 mL。以70%的乙醇溶液為參比測定各溶液在299 nm 處的紫外吸收，見圖7。

3 結果

利用乙醇提取白芷，并對白芷提取物的穩定性進行研究發現白芷的提取物(呋喃香豆素類化合物)的最大吸收波長為299 nm;避光放置時，6 h 內物質吸光度變化不大，在光照條件下，6 h 內物質的吸光度有明顯下降;隨溫度的升高，呋喃香豆素類化合物的穩定性先增加后降低，60 ℃時的穩定性最好;不同pH 值使提取物溶液的吸光度改變不同，酸性緩沖液會使溶液吸光度減小，堿性緩沖液會使溶液的吸光度變化不大;加入不同濃度的氧化劑使物質的吸光度變化不大;加入不同濃度的Fe2+和Cu2+溶液，提取物溶液的吸光度增大，因Fe2+具有一定的還原性，說明白芷提取物的抗還原性較好。

4 結論

利用紫外分光光度法測定出白芷的乙醇提取物(呋喃香豆素類化合物)的最大紫外吸收波長為299 nm。

白芷的穩定性研究結果表明:白芷的乙醇提取物對光照不穩定，應盡量避光保存。其身抗氧化性較好，對氧化劑的穩定性較好。白芷的乙醇提取液耐堿性較好，耐酸性較差。隨溫度的升高，呋喃香豆素類化合物的穩定性先增加后降低，60 ℃時的穩定性最好。此外，加入金屬離子有利于提取物的長期存放。

［1］ 袁亞洲，倪永年.不同產地白芷藥材高效液相色普指紋圖譜研究［J］.分析科學學報，2009，25(1):26 －30

［2］ 趙興增，馮 煦，賈曉東.杭白芷香豆素類成分的研究(Ⅰ)［J］.中草藥，2007，38(4):504 －506

［3］ 鄭翠英，夏艷嬌，徐超群.白芷中香豆素成分的提取［J］.華西藥學雜志，2008，23(6):683 －684

［4］ 鄧曉華，王 萍.正交設計法優化興安白芷莖中總香豆素的提取工藝［J］.中國林副特產，2009，100(3):19 －21

［5］ 羅鳳琴，張 錦，劉韻琪.紫外分光光度法測定鹽酸嗎啉胍片的含量［J］.川北醫學院學報，2003，18(3):93 －95