Her－2／neu和CD138在乳腺癌中表達及意義

陳 軍，胡永均，張桃華，陳玲玲

（1.上海市嘉定區中心醫院 病理科，上海201800；2.上海市第六人民醫院金山分院）

乳腺癌是我國女性最常見的惡性腫瘤之一，癌細胞的侵襲轉移是影響乳腺癌患者預后的重要因素。癌細胞的侵襲轉移是一個非常復雜的過程，與細胞－細胞和細胞－細胞外基質的黏附功能降低有關。CD138屬于Syndecans基因家族，是一類細胞表面跨膜蛋白多糖，作為膜表面黏附受體參與細胞與細胞及細胞－細胞外基質之間的黏附。大量實驗研究表明，CD138促進了惡性腫瘤的發生、發展、浸潤及轉移［1－3］。本研究采用免疫組織化學方法檢測乳腺癌和乳腺良性病變組織中CD138的表達，探討其與Her－2／neu的表達、乳腺癌轉移及各臨床病理因素之間的關系，以評價CD138在乳腺癌發生發展及轉移中的作用。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 收集我院1998－2005年手術切除

的乳腺癌根治標本102例，患者均為女性，年齡25－75歲，包括浸潤性導管癌78例，導管內癌9例，浸潤性小葉癌9例，特殊類型癌6例，并結合其相應的臨床資料，按國際抗癌學會（UICC）及美國癌癥聯合會（AJCC）建議的TNM分期法（第六版）對其進行臨床分期，同時選擇15例乳腺良性腫瘤（纖維腺瘤）和15例正常乳腺組織（巨乳癥患者的乳腺組織）作對照。其中93例（91.18%）有完整隨訪資料，生存超過5年者70例（68.63%），超過10年者49例（48.04%）。所有標本均經中性10%甲醛固定，常規石蠟包埋，4μm厚連續切片。

1.2 主要試劑和方法 Her－2／neu、CD138單克隆抗體，S－P試劑盒，DAB－酶底物顯色試劑購于福州邁新生物技術開發公司，采用免疫組化的方法，按照公司試劑盒的操作步驟執行。用已知陽性染色的乳腺癌切片為陽性對照片，用PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 結果判斷 Her－2／neu陽性定位于細胞膜和（或）細胞質內，表達結果判定標準：－（無染色或少于10%細胞膜染色），＋（＞10%細胞有不完整胞膜染色），＋＋（＞10%細胞有較弱但完整的胞膜染色），＋＋＋（＞10%細胞有較強的完整胞膜染色），（－＋）視為無或低表達，（＋＋－＋＋＋）為過表達。CD138陽性定位于細胞膜和（或）細胞質內，在10×40倍光鏡下隨機觀察5個視野，計算其平均數，每個視野計數100個細胞，以整張切片陽性細胞＞25%為陽性（＋），＜25%為陰性（－）。

1.4 統計學處理 Her－2／neu、CD138在組織中的陽性表達率比較用卡方檢驗，相關性用Spearman相關分析（統計軟件STATA8.0）。

2 結果

2.1 Her－2／neu、CD138在乳腺正常組織，良性腫瘤及乳腺癌組織中的表達（表1）

表1 Her－2／neu、CD138在乳腺正常組織、良性腫瘤及癌組織中的表達

由上表可見，Her－2／neu在癌組織中的表達與正常乳腺組織和良性腫瘤中的差異有顯著性（P＜0.05），在不同種類的乳腺癌中無差異（P＞0.05），Her－2／neu在0期與Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ－Ⅳ期分別為30%、38.09%、59.18%、81.81%，Her－2／neu陽性表達與臨床分期之間：0期與Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ－Ⅳ期差異有顯著性（P＜0.05），陽性表達與患者5年生存率差異有顯著性（P＜0.05），在有轉移和無轉移組中差異有顯著性（P＜0.05）。此外，Her－2／neu陽性表達與年齡、腫瘤大小、ER、PR無關。

CD138在癌組織中的表達與正常乳腺組織和良性腫瘤中的差異有顯著性（P＜0.05），在不同種類的乳腺癌中無差異（P＞0.05），CD138在0期與Ⅰ期、Ⅱ 期、Ⅲ－Ⅳ 期 分 別 為 80%、66.67%、34.69%、18.18%，CD138陽性表達與臨床分期之間：0期與Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ－Ⅳ期差異有顯著性（P＜0.05），陽性表達與患者5年生存率差異有顯著性（P＜0.01），在有轉移和無轉移組中差異有顯著性（P＜0.05）。此外，CD138陽性表達與年齡、腫瘤大小、ER、PR無關。

圖1 Her－2／neu表達于乳腺癌細胞膜和細胞質內SP×200

圖2 CD138表達于乳腺癌細胞膜和細胞質內SP×200

2.2 Her－2／neu、CD138在乳腺癌中表達的相互關系 見表2。

表2 Her－2／neu、CD138在乳腺癌中表達的相互關系

由上表可見，Spearman相關分析rs＝－0.259，P值為0.009＜0.01，顯示兩者在乳腺癌中的表達相關。

3 討論

CD138（Syndecans－1）基因是黏附分子整合素跨膜黏結蛋白的聚糖家族成員，人類基因位于2號染色體，亦稱蛋白聚糖，存在于所有哺乳動物中，是細胞間質、細胞質膜的重要組成成分。一般認為，硫酸乙酰肝素與胞外配體的結合是CD138功能活性的關鍵。這些配體主要包括多肽生長因子、胞外基質蛋白、細胞–細胞黏附分子、酶和其他蛋白（膠原Ⅰ、Ⅲ和Ⅴ型、層黏連蛋白、替拿素、纖黏連蛋白等）［4］。CD138具有一系列功能：①生長因子受體激活的調節。CD138的表達水平可直接影響肝素結合生長因子家族（如FGF）、肝細胞生長因子（HGF）、肝素－結合表皮生長因子（EGF）、血管內皮生長因子等與受體的結合。②參與細胞－胞外基質黏附。介導細胞黏附到胞外基質蛋白的主要受體為整合素家族受體，但胞外基質蛋白還具有結合起來糖胺聚糖的能力，尤其是硫酸乙酰肝素。實驗證明，細胞能利用整合素和CD138雙受體來介導細胞－胞外基質的黏附，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖增加了結合作用的總的強度。③促進細胞－細胞間黏附。細胞可通過其表面的CD138與鄰近細胞上的受體如血小板內皮細胞黏附因子、L－選擇素等結合達相互黏附目的。④與細胞移行有關。CD138表達量減少或缺失可降低細胞－基質間黏附力，加速細胞的移行。CD138是一種跨膜蛋白聚糖，可表達在各種來源的腫瘤細胞表面，包括骨髓瘤、卵巢癌，乳腺癌、肝癌、霍奇金淋巴瘤及某些HIV有關的淋巴瘤。在正常細胞惡變后，細胞膜表面CD138分子的表達常發生改變，并且與腫瘤的惡性程度、預后有一定相關性［2、3］。

本研究顯示乳腺癌組織中CD138陽性表達率為42.16%，顯著低于乳腺良性高變組織的表達率100.00%（P＜0.01）；CD138在高中分化、低分化乳腺癌中陽性表達率分別為47.5%和22.72%，分化程度越高，表達越強（P＜0.05）；在臨床分期組中分期越高，其表達降低，差異有顯著性（P＜0.05）；在有淋巴結轉移組的表達（33.85%）顯著低無淋巴結轉移組（56.75%，P＜0.05），這與史偉峰等［5］研究的結果一致，提示乳腺癌細胞CD138表達降低或缺失導致腫瘤細胞與細胞，細胞與細胞外基質黏附功能降低，細胞生長接觸抑制功能喪失，導致瘤細胞大量增殖，具有侵襲性，這可能與乳腺癌侵襲轉移密切相關。

Her－2／neu基因又稱 C－erbB－2基因，是一種原癌基因，主要在胚胎發育時開始表達，成年后正常組織可檢到少量表達。位于人第17號染色體長臂，分子量為185KD的跨膜糖蛋白，具有酪氨酸激酶的活性［6］，而氨基酸的序列和結構與表皮生長因子受體（EGFR）同源，故又稱為人表皮生長因子相關基因，參與調控細胞生長、增殖及分化，其產物過度表達與腫瘤惡性程度高、生長快、預后差相關。應用DNA雜交分析法發現 Her－2／neu只在腺癌中擴增，而Her－2／neu在乳腺癌中的擴增率為其他腺癌的3倍［7］。以上研究表明，Her－2／neu的表達對乳腺癌的發生、轉移和早期發現有重要意義。本研究顯示Her－2／neu在乳腺良性病變中的表達率低（6.67%），而在乳腺癌組織中的陽性表達率可達56.86%，差異有高度顯著性，與一些研究［8］結果一致，表明Her－2／neu與乳腺癌惡性程度有關，隨著陽性表達率的增高，惡性程度也增高。故它對良惡性病變有一定的鑒別診斷價值。本實驗還發現Her－2／neu在有淋巴結轉移的乳腺癌中的陽性率（66.15%）明顯高于無轉移者（43.24%），差異有高度顯著性。有學者［8］認為乳腺癌中 Her－2／neu的表達不僅與淋巴結轉移顯著相關，而且與淋巴結轉移數目相關。并對292例原發性乳腺浸潤癌中的Her－2／neu蛋白染色，證實Her－2／neu擴增及蛋白表達與組織分級、淋巴結轉移程度、死亡率、復發率呈正相關。其他學者也有相同的報道［8－10］。本實驗結果與以上學者的研究結果相吻合，這表明Her－2／neu表達與乳腺癌的轉移密切相關，與淋巴結轉移狀況一樣可以作為評估乳腺癌患者預后指標之一。

雌激素對女性生殖器官（包括陰道、子宮、輸卵管、卵巢）及乳腺的生長、發育起著最為關鍵的作用，而且對男性的睪丸功能、精子發生以及附后屬性器官也極為重要。本研究發現，CD138、Her－2／neu在乳腺癌組織中的表達與ER無關，對乳腺癌激素治療的判斷意義不大，與Tang等［11］報道一致。

本研究發現，CD138和 Her－2／neu密切相關，CD138在乳腺癌組織中低表達時 Her－2／neu高表達，乳腺癌組織中低表達時Her－2／neu高表達，表達率增高，CD138陽性表達率下降，二者呈負相關（P＜0.01）。兩者在乳腺癌的發生發展中起重要作用，在腫瘤診斷、病情進展、轉移潛能和預后的評價等方面具有很大的潛在價值。因此，隨著分子生物學的不斷發展，癌基因研究的不斷深入，相信該基因對癌的預測、診斷、治療、預后的價值會得到更為全面的認識。

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