戴新華 暴海霞 蘇福海 方 向 黃 挺 張 偉 李紅梅 王海峰
(中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院,北京 100013)
氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)分子的基本單位,與生物的生命活動(dòng)密切相關(guān)。如果人體缺乏任何一種必需氨基酸,就可導(dǎo)致生理功能異常,影響抗體代謝的正常進(jìn)行,最后導(dǎo)致疾病。例如:纈氨酸是組成蛋白質(zhì)的基本氨基酸,是人體8種必須氨基酸之一,它與異亮氨酸和亮氨酸一起工作,促進(jìn)正常生長(zhǎng),修復(fù)組織,調(diào)節(jié)血糖,并給身體提供能量,提高動(dòng)物機(jī)體免疫機(jī)能,影響動(dòng)物內(nèi)分泌水平。
由于氨基酸分析在蛋白質(zhì)組學(xué)、生物化學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的研究中起著重要作用,因此,對(duì)氨基酸分析方法的研究得到世界各國(guó)的高度重視。大多數(shù)氨基酸不含芳香環(huán)等生色團(tuán),無(wú)法直接用紫外檢測(cè)器檢測(cè),需要先將氨基酸衍生為具有較強(qiáng)紫外或熒光吸收的衍生物后進(jìn)行檢測(cè)。目前,對(duì)氨基酸的分析測(cè)定方法主要為以下幾種:1)衍生化離子交換色譜法[1],2)衍生化高效液相色譜法[2-4],3)衍生化氣相色譜法[5],4)衍生化氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[6],5)衍生化毛細(xì)管電泳法[7-9]。上述方法都屬于間接法,需要先對(duì)樣品中的氨基酸進(jìn)行衍生后才能利用紫外檢、熒光、火焰離子化等檢測(cè)器或者質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè),衍生法操作繁雜,衍生試劑昂貴,而且可能漏掉無(wú)法衍生的雜質(zhì)或者在衍生化過(guò)程中生成新的雜質(zhì)而導(dǎo)致錯(cuò)誤的檢測(cè)結(jié)果。因此,急需研究直接法對(duì)氨基酸進(jìn)行高準(zhǔn)確度的測(cè)量,為研制氨基酸類(lèi)純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體中目標(biāo)氨基酸的檢測(cè)奠定基礎(chǔ),為復(fù)雜基體中氨基酸定量和蛋白質(zhì)定量提供可溯源的標(biāo)準(zhǔn),為實(shí)現(xiàn)國(guó)際互認(rèn)奠定堅(jiān)實(shí)的技術(shù)基礎(chǔ)。……