施加秸稈和蚯蚓活動對麥田N2O排放的影響

羅天相 ，胡 鋒，李輝信

(1.宜春學院生命科學與資源環境學院，宜春 336000;2.南京農業大學資源與環境科學學院，南京 210095)

氧化亞氮(N2O)是一種重要的大氣微量氣體，是致臭氧層破壞和溫室效應的主要因素。全球N2O排放量60%以上來源于土壤的生物活動，其中農田土壤約占土壤排放源的40%，達4.2 Tg N-N2O/a［1］。N2O主要由微生物活動引起的土壤硝化和反硝化過程產生，這些過程受到不同的土壤理化因素的調節，比如土壤水分和通氣狀況，土壤類型和土壤pH的影響。蚯蚓是土壤生物的重要組成部分，與土壤理化性狀的改變有密切的關系。蚯蚓活動能混合土壤，改善土壤結構，提高土壤透氣、排水和深層持水能力，間接影響土壤硝化和反硝化過程，可能成為陸地生態系統N2O排放的生物源之一［2-3］。近年來在微系統［4］和不同土壤類型上的中觀試驗［5-12］也證實了蚯蚓活動與土壤N2O排放有密切關系。

由于試驗土壤類型和蚯蚓生態型的差異，有關蚯蚓對土壤N2O排放影響的研究結果還不盡一致。蚯蚓對土壤N2O排放的影響與施加的外源作物秸稈及取食對策均有關聯［5］。蚯蚓能促使植物殘體進入土壤，并將植物殘體中的N轉化為無機態形式，從而易于被植物和土壤微生物吸收利用，在秸稈還田時輔以蚯蚓處理，有助于植物殘體向土壤有機碳的轉化［13］。當秸稈混施入土壤時，接種深層種(anecic)蚯蚓Apporectodea longa能促進土壤N2O 排放［10］;秸稈表施時，表層種(epigeic)蚯蚓 Lumbricus rubellus［5-6］和深層種蚯蚓 A.longa［6］將導致土壤N2O排放量的增加。壤土中，內層種(endogeic)蚯蚓A.caliginosa僅在秸稈混施入土壤或與表層種蚯蚓L.rubellus一同存在時才會對土壤N2O排放具有促進作用［5］，當A.caliginosa接種在沙質土壤中，即使和L.rubellus一同存在，該種蚯蚓也沒有如壤土中一樣增加N2O的排放，甚至表現出抑制作用［8］，這反映出蚯蚓生態型不同的取食策略。接種不同生態型蚯蚓時，甚至混施作物秸稈的不同深度也會影響到土壤N2O 的排放［14］。

此外，在探討蚯蚓活動對土壤溫室氣體N2O排放影響研究上，由于蚯蚓在森林和草地中具有較高的種群密度，過去的結論多來自于這2個生態系統［6-12］，對農田生態系統關注不多。但蚯蚓是農田生態系統的重要組成部分，麥田中蚯蚓種群全年平均密度可高達83.83條/m2［15］，明確農田生態系統中蚯蚓對N2O排放的影響，對于了解蚯蚓的生態功能，揭示蚯蚓活動對土壤溫室氣體代謝的影響，促進農田管理減排具有重要的意義。為此，在接種蚯蚓長期定位試驗的基礎上，通過農田冬小麥栽種試驗，對施用秸稈(表施和混施)及接種蚯蚓后土壤N2O排放通量的變化進行初步研究，并從土壤特性和排放量上對蚯蚓的作用進行評估，為正確評價農田土壤動物的生態功能提供依據。

1 材料和方法

1.1 試驗地點和材料

盆栽試驗于2007年11月—2008年5月在南京農業大學常年定位網室內實施。供試土壤為江蘇省如皋縣搬經鎮的高沙土。網室內用混凝土砌成2.8m×1m×0.6m的池子，填入深50cm的供試土壤。

盆缽用紫砂泥燒制而成，缽高和內圓直徑均為20cm左右，盆缽上口有1.5cm深的凹型槽用以在采樣時注水與采樣箱密封，盆缽底部有直徑為2cm的小孔多個以滲漏降水。每盆裝供試土壤4kg左右，各供試土壤設置3個重復。為使盆缽土壤的溫度與大田土壤溫度一致并減少盆缽間的溫度差異，盆缽的4/5高度埋入土壤。

冬小麥品種為揚麥158，小麥播種期為11月15日，11月18日移栽入盆缽內，每盆移栽4株，2008年5月10日收獲。

土壤有機C含量為5.86g/kg，總N含量為0.70g/kg，總P含量為0.66g/kg，速效P含量為0.66mg/kg，速效K含量為47.1mg/kg，pH為 8.25。

1.2 肥料施用

氮、磷和鉀肥用量分別為225kg/hm2(以純N計)、120kg/hm2(以P2O5計)和120kg/hm2(以K2O計)，肥料品種為尿素、過磷酸鈣和氯化鉀。其中氮肥的60%作為基肥，分蘗肥和穗肥各占20%，磷、鉀肥全作基肥。有機物料采用玉米秸稈，其基本性狀為14.63g N/kg，464.33g C/kg，2.85g P/kg，玉米秸稈C/N為31.74，用量為每盆缽施用23.5g，折合約7500kg/hm2。玉米秸稈(粉碎至2cm左右)與基肥一起施入，混施時與0—20cm土壤均勻混和，這種秸稈施用方式與自然還田的實際情況接近;表施時則均勻覆蓋于盆缽內土層表面。

1.3 蚯蚓接種

試驗所用蚯蚓為威廉腔環蚓(Metaphire guillelmi)，分類上屬于anecic，介于epigeics和endogeics之間，由于盆缽表面積小，蚯蚓活動范圍受到一定的拘束;試驗土壤采集地的蚯蚓自然密度約為60—80g/m2，故折合到每盆缽約2.5g蚯蚓生物量，即2條成年蚯蚓被接種入盆缽。作物移栽入盆缽后立即進行接種，接種之后澆適量水，以便蚯蚓盡快適應環境。

1.4 試驗處理

本實驗共設5個處理，各處理3次重復:(1)對照，即不施用玉米秸稈，不接種蚯蚓(CK);(2)秸稈混施，不接種蚯蚓(I);(3)秸稈表施，不接種蚯蚓(M);(4)秸稈混施，接種蚯蚓(IE);(5)秸稈表施，接種蚯蚓(ME)。

1.5 土壤、氣體采樣與分析方法

試驗的開始和結束期進行土壤理化性狀測試，采集各處理土壤表層(0—20cm)樣品。用K2Cr2O7氧化法測定土壤有機碳(SOC);用半微量凱氏定氮法測定全氮(TN)。NH+4-N用靛粉藍比色法;NO-N用鍍 Cu-Cd還原法。

本試驗氣體樣品采集采用靜態箱-氣相色譜法。采樣箱為圓筒型，用PVC材料制成，高1m，箱體直徑與盆缽凹型槽直徑一致。采樣箱外側先包有一層約5cm厚的海綿，然后覆蓋一層鋁箔以減少采樣期間由于太陽輻射引起的箱內溫度變化。氣體樣品用帶有開關的針筒采集，生長季節前中期每周1次，3月中旬后每兩周1次。根據試驗要求，采用2—3箱體平行采樣，采樣時間分別為關箱后的0、5、10、15、20min，每次抽樣60 mL。氣體樣品于采樣當天用改裝的Agilent 4890D氣相色譜儀分析N2O的排放通量。由于樣品采集時采樣箱中包含正常生長的作物，因此該研究的溫室氣體排放通量代表該生態系統的溫室氣體排放。

N2O排放通量結果用每次測定3個重復的平均值及標準偏差表示，排放量以生長季排放通量乘以生長季的時間。

1.6 統計學檢驗方法

數據統計分析采用二因素(蚯蚓×秸稈施用方式)方差分析蚯蚓和秸稈的交互作用，用單因素方差分析不同處理間差異，差異顯著性用Duncan檢驗，所有統計分析均采用SPSS統計軟件。

2 結果與分析

2.1 不同處理間土壤化學性狀的改變

經過冬小麥栽培，在收獲期后不同處理土壤中有機碳和全氮含量變化明顯(表1)。與對照相比，加施秸稈處理(M、ME、I、IE)土壤有機碳和全氮含量均顯著增加(P＜0.05)。混施稈秸處理(I和IE)有機碳和全氮含量顯著高于表施秸稈處理(M和ME)。接種蚯蚓未對有機碳(SOC)與全氮產生顯著影響，表明蚯蚓對有機物料的取食不會降低土壤有機碳和全氮含量。所有處理土壤碳氮比均為10左右，各處理間差異不顯著。這表明在秸稈常規施用量條件下接種蚯蚓并未引起土壤碳、氮總量的減少，土壤碳、氮基本維持平衡。加施秸稈使土壤有機碳的含量顯著提高，這個現象與其它研究結果是一致的。與表施秸稈相比，混施秸稈更有利于土壤有機碳提高［16］。

表1 不同處理土壤有機碳、全氮和礦質氮變化Table 1 Changes of soil organic carbon，total nitrogen and mineral nitrogen content under different treatments

2.2 蚯蚓和秸稈施用對N2O排放的影響

蚯蚓和秸稈施用對N2O排放的影響如圖1所示:在小麥生長季整體排放趨勢呈現兩頭高，中間低的走勢。其排放峰主要出現在小麥生長的苗期和生長的末期。在小麥生長前期，各處理間N2O排放較高的原因可能是基肥用量較大，提供了充足的N源，而且此時溫濕度仍較適宜土壤N2O的生成與排放;中期由于氣溫偏低，蚯蚓進入休眠停育階段，而冬春季降雨又較多，由于農田土壤N2O排放較強烈地受土壤濕度制約，土壤濕度過大，不利于N2O的生成與排放［17］;后期隨著溫度的升高，濕度條件適宜，蚯蚓開始取食、活動，小麥生長發育加速，有助于提高N2O的生成和排放通量。

相比對照CK處理，施加秸稈和接種蚯蚓均能顯著提高N2O排放量(表2)。在秸稈表施的情況下，接種蚯蚓ME處理N2O的排放量最大，全生育期達14.26 kg/hm2，顯著高于未接種蚯蚓M處理(P＜0.05)，且這種N2O排放的差異性無論在栽培前期還是后期均很顯著。在混施秸稈的情況下，接種蚯蚓IE處理在栽培前期較未接種蚯蚓的I處理差異仍顯著，但在后期兩處理間排放量無明顯差異。整個麥季對照CK處理N2O的排放量最低，為11.42 kg/hm2。

表2 不同處理N2O排放量(平均數±標準差)Table 2 Amounts(mean±SD)of N2O emission

3 討論

3.1 蚯蚓與N2O排放

蚯蚓對N2O排放的影響比較顯著，雖仍沒有達成一致的看法，但普遍認為蚯蚓促進了土壤N2O的排放。本研究中施加秸稈后，接種蚯蚓能顯著提高土壤N2O排放的通量。農田中作物秸稈(混施或表施)是土壤中產生N2O的主要微生物過程——硝化和反硝化作用的重要C和N源。與無作物秸稈還田相比，在土壤N源充裕條件下作物秸稈施用往往導致較高的反硝化作用和N2O排放。

圖1 麥季N2O排放通量的變化Fig.1 Variations of N2O flux in wheat season

在評估蚯蚓對植物殘體分解和溫室氣體排放影響的研究中，有些研究是將植物殘體表施在土壤上［18-19］，但秸稈混施于土壤則是更為常見的農業措施。本試驗中，在秸稈表施的情況下，接種蚯蚓后N2O的排放顯著增加(P＜0.05);而當秸稈混施時，蚯蚓的相對作用將減小。通過取食并分解有機殘體，蚯蚓使秸稈中的N素等營養物質在耕作層中更均勻的分布和均衡利用。這種混施秸稈的耕耘活動代替了蚯蚓的部分生態功能。所以當秸稈混施時，蚯蚓盡管在前期對N2O的排放產生一定的影響，但在后期，蚯蚓的存在與否并沒有顯著差異，這點與Rizhiya等觀測結果類似［6］。

目前，解釋蚯蚓在土壤中的生態功能機理有2種推論［20］，即養分富集過程(NEP)和腸道關聯過程(GAP)。NEP意味著蚯蚓通過混合并取食所添加的秸稈，導致土壤和蚓糞的養分富集，該過程將蚯蚓的作用主要歸因于蚯蚓在土壤中的遷移和取食作用，而不過多涉及其生理代謝過程。GAP則主要是包括與蚯蚓腸道相關聯的一系列生化反應過程，以及腸道分泌物和排泄分泌物中微生物和酶數量和活性的改變等。微系統試驗中，GAP一般能很好的解釋蚯蚓對于N2O排放的促進作用［21］。但本試驗中，在秸稈不同施用方式下(混施和表施)接種蚯蚓對農田N2O排放的影響是有差異的，在田間的中觀尺度下，NEP的推論能更好的解釋這種現象:因為蚯蚓的活動，在表施秸稈的情況下，通過取食活動將秸稈混入土壤，使秸稈的分解由原來的好氧和低硝化作用的環境轉移到一個硝化作用顯著加強的環境(NEP)，從而促進N的分解和N2O的排放;而在混施秸稈的情況下，蚯蚓的作用更多體現在腸道關聯過程(GAP)上時，接種蚯蚓未能始終表現出對N2O排放的促進作用。當然，蚯蚓在土壤中的生態作用同時包含了NEP和GAP兩個過程，在中觀試驗的尺度下接種蚯蚓后土壤所表現出的生態效應，但仍需大田試驗以進一步觀測。

3.2 土壤礦質氮與N2O排放

蚯蚓等土壤動物通過掘穴、取食和排泄等活動對生態系統的理化和生物特性產生影響，這些因素又直接或間接的影響著土壤的硝化與反硝化作用［22-23］。NH-N和NO-N分別是硝化和反硝化反應的底物，N2O的產生受這些底物濃度的制約。在本次試驗中，重點觀察了土壤礦質氮(包括NO-N和NH-N)含量的變化與N2O排放的關系。在盆栽試驗中，NO-N含量均顯著高于NH-N，土壤中NO-N濃度沒有成為N轉化的限制性因子。接種蚯蚓處理的NO-N含量顯著提高，混施秸稈時，接種蚯蚓NO-N含量最高，但在表施秸稈時，接種蚯蚓使NO-N有更大的增幅(20.1%)。蚯蚓對氮礦化的影響，可能與蚯蚓直接排泄富含有效氮的物質及自體代謝分泌有關，也可能是蚯蚓活動促進了土壤微生物活性的提高及其向營養源富集場所的擴散，從而加快了微生物對氮的周轉和釋放［24］。不同處理土壤礦質氮的分異主要取決于NO-N含量的變化。由于土壤中的NO-N不但促進反硝化速率，而且抑制或延遲N2O還原為N2［6］，所以蚯蚓可通過影響土壤NO-N含量間接促進土壤N2O的排放。通過相關性分析也發現，本試驗中的土壤NO-N含量與N2O排放量顯著正相關(見表3)。

表3 N2O排放量與土壤理化性狀的相關分析表Table 3 The correlation analysis of N2O emission and soil physical and chemical properties

在Malhi的研究中［25］，通過8a的田間試驗，他們同樣發現大多數情況下，耕作、施加作物秸稈和N肥的輸入并沒有對作物土壤中的NH-N產生顯著影響。但在施加秸稈的處理中，NO-N濃度在0—15 cm的土壤層中顯著高于對照處理。施加秸稈導致NO-N淋失加劇和N-N2O排放量的增加，尤其是在秸稈過量的情況下。當深層種和內層種蚯蚓多時，會導致土壤濾出液中的NH-N濃度升高，而表層種蚯蚓則導致NO-N的濃度升高［26］。考慮到土壤礦質氮含量與N2O排放的關系，不同生態型蚯蚓在土壤微量氣體代謝中的作用也會出現差異。

在本試驗場所早期進行的一項試驗表明，秸稈兩種施用方式下，蚯蚓于分蘗期顯著降低了礦質氮的含量(分別為24%和32%)，且在秸稈表施處理中降低程度更高。在土壤中植物殘體含量較高時，微生物加速繁殖，生物的固定作用加強，蚯蚓使土壤可溶性有機氮的含量提高，導致了N向下運移和流失［27］。在這個過程中，流失的N可能經由硝化和反硝化過程，部分轉化為N-N2O，以氣態的形式逸失。

4 結論

接種蚯蚓和秸稈施用對土壤N2O排放有顯著影響，不同的研究，由于所采用的有機肥料和試驗設計及方法的不同，會導致研究結果的差異。總體來說，施加秸稈后，蚯蚓的存在能夠顯著提高土壤中N2O的排放量，蚯蚓的這種作用當秸稈表施時更明顯，而當秸稈混施進土壤后，盡管接種蚯蚓后將產生較高的排放量，但蚯蚓的相對作用將減小。養分富集過程(NEP)較腸道關聯過程(GAP)更好的解釋了接種蚯蚓后田間土壤所表現出的生態效應。農田秸稈施用引起的N2O排放量的差異，應該受外源C、N供應水平、土壤供N水平、微生物對有機碳的分解及對N的爭奪利用等多因素制約。因此，有關秸稈殘體施用后接種蚯蚓對土壤N2O排放影響的機理尚需進一步深入研究，碳氮同位素分析，分子生物學技術和圖像分析技術等的應用將有助于蚯蚓生態功能的研究［28］，增加對蚯蚓生態型與土壤微生物群落之間的關系的了解。

［1］IPCC.Contribution of Working Group I to the Fourth Assessment Report of the intergovernmental Panel on Climate Change 2007，Cambridge University Press，2007.

［2］Han X G，Wang Z P.Soil biodiversity and trace gases(CO2，CH4，N2O)metabolism:a review.Biodiversity Science，2003，11(4):322-332.

［3］Karsten G R，Drake H L.Denitrifying bacteria in the Earthworm gastrointestinal tract and in vivo emission of nitrous oxide(N2O)by earthworms.Applied and Environmental Microbiology，1997，63:1878-1882.

［4］Luo T X，Li H X，Wang T，Hu F.Influence of nematodes and earthworms on the emissions of soil trace gases(CO2，N2O).Acta Ecologica Sinica，2008，28(3):993-999.

［5］Giannopoulosa G，Pullemana M M，van Groenigen J W.Interactions between residue placement and earthworm ecological strategy affect aggregate turnover and N2O dynamics in agricultural soil.Soil Biology and Biochemistry，2010，42(4):618-625.

［6］Rizhiya E，Bertora C，van Vliet P C J，Kuikman P J，Faber J H，van Groenigen J W.Earthworm activity as a determinant for N2O emission from crop residue.Soil Biology and Biochemistry，2007，39(8):2058-2069.

［7］Sperattia A B，Whalen J K.Carbon dioxide and nitrous oxide fluxes from soil as influenced by anecic and endogeic earthworms.Applied Soil Ecology，2008，38(1):27-33.

［8］Giannopoulos G，van Groenigen J W，Pulleman M M.Earthworm-induced N2O emissions in a sandy soil with surface-applied crop residues，Pedobiologia，2011(Supplement)，54:103-111.

［9］Gao B，Fu S L，Zhang W X，Liu S P，Zhou C Y.Short-term Effects of Earthworm and Evodia lepta on Soil N2O and CH4Fluxes in a Subtropical Plantation.Journal of Tropical and Subtropical Botany，2010，18(4):364-371.

［10］Bertora C，van Vliet P C J，Hummelink E W J，van Groenigen J W.Do earthworms increase N2O emissions in ploughed grassland?Soil Biology and Biochemistry，2007，39(2):632-640.

［11］Chapuis-Lardy L，Brauman A，Bernard L，Pablo A L，Toucet J，Mano M J，Weber L，Brunet D，Razafimbelo T，Chotte J L，Blanchart E.Effect of the endogeic earthworm Pontoscolex corethrurus on the microbial structure and activity related to CO2and N2O fluxes from a tropical soil(Madagascar).Applied Soil Ecology，2010，45(3):201-208.

［12］Lubbers I M，Brussaard L，Otten W，Van Groenigen J W.Earthworm-induced N mineralization in fertilized grassland increases both N2O emission and crop-N uptake.European Journal of Soil Science，2011，62(1):152-161.

［13］Lavelle P，Spain V A.Soil Ecology.New York:Kluwer Academic Publishers，2001.

［14］Paul B K，Lubbers I M，van Groenigen J W.Residue incorporation depth is a controlling factor of earthworm-induced nitrous oxide emissions.Global Change Biology，2012，18(3):1141-1151.

［15］Cao Z P，Qiao Y H，Wang B Q，Chu Q.Impact of soil fertility maintaining practice on earthworm population in high production agro-ecosystem in North China.Acta Ecologica Sinica，2004，24(10):2302-2306.

［16］Yu J G，Li H X，Chen X Y，Hu F.effects of straw application and earthworm inoculation on soil labile organic carbon.Chinese Journal of Applied Ecology，2007，18(4):818-824.

［17］Zhen X H，Wang M X，Wang Y S，Shen R X，Gong Y B，Luo D M，Zhang W，Jin J S，Li L T.Impact of soil humidity on N2O production and emission from a rice-wheat rotation ecosystem.Chinese Journal of Applied Ecology，1996，7(3):273-279.

［18］Borken W，Grundel S，Beese F.Potential contribution of Lumbricus terrestris L.to carbon dioxide，methane and nitrous oxide fluxes from a forest soil.Biology and Fertility of Soils，2000，32(2):142-148.

［19］Parkin T B，Berry E C.Microbial nitrogen transformations in earthworm burrows.Soil Biology and Biochemistry，1999，31(13):1765-1771.

［20］Devliegher W，Verstraete W.The effect of Lumbricus terrestris on soil in relation to plant growth:effects of nutrient-enrichment processes(NEP)and gut-associated processes(GAP).Soil Biology and Biochemistry，1997，29(3/4):341-346.

［21］Drake H L，Horn M A.As the Worm Turns:The Earthworm Gut as a Transient Habitat for Soil Microbial Biomes.Annual Review of Microbiology，2007，61:169-189.

［22］Edwards C A，Bohlen P J.Biology and Ecology of Earthworms，3rd edn.London:Chapman and Hall，1996.

［23］Fonte S J，Kong A Y Y，van Kessel C，Hendrix P F，Six J.Influence of earthworm activity on aggregate-associated carbon and nitrogen dynamics differs with agroecosystem management.Soil Biology and Biochemistry，2007，39(5):1014-1022.

［24］Li H X，Hu F，Shen Q R，Chen X Y，Cang L，Wang X.Effect of earthworm inoculation on soil carbon and nitrogen dynamics and on crop yield with application of corn residues.Chinese Journal of Applied Ecology，2002，13(12):1637-1641.

［25］Malhi S S，Lemke R.Tillage，crop residue and N fertilizer effects on crop yield，nutrient uptake，soil quality and nitrous oxide gas emissions in a second 4-yr rotation cycle.Soil and Tillage Research，2007，96(1/2):269-283.

［26］Sheehan C，Kirwan L，Connolly J，Bolger T.The effects of earthworm functional group diversity on nitrogen dynamics in soils.Soil Biology and Biochemistry，2006，38(9):2629-2636.

［27］Wang X，Hu F，Li H X，Shen Q R.Effects of earthworm on soil C，N on upland-rice soil under different manipulations of corn straw.Ecology and Environment，2003，12(4):462-466.

［28］James P C，Olaf S.The feeding ecology of earthworms-a review.Pedobiologia，2007，50(6):463-477.

參考文獻:

［2］韓興國，王智平.土壤生物多樣性與微量氣體(CO2，CH4，N2O)代謝.生物多樣性，2003，11(4):322-332.

［4］羅天相，李輝信，王同，胡鋒.線蟲和蚯蚓對土壤微量氣體排放的影響.生態學報，2008，28(3):993-999.

［9］高波，傅聲雷，張衛信，劉素萍，周存宇.蚯蚓和三叉苦對亞熱帶人工林土壤N2O和CH4通量的短期效應.熱帶亞熱帶植物學報，2010，18(4):364-371.

［15］曹志平，喬玉輝，王寶清，徐芹.不同土壤培肥措施對華北高產農田生態系統蚯蚓種群的影響.生態學報，2004，24(10):2302-2306.

［16］于建光，李輝信，陳小云，胡鋒.秸稈施用及蚯蚓活動對土壤活性有機碳的影響.應用生態學報，2007，18(4):818-824.

［17］鄭循華，王明星，王躍思，沈壬興，龔宴邦，駱冬梅，張文，金繼生，李老土.稻麥輪作生態系統中土壤濕度對N2O產生與排放的影響.應用生態學報，1996，7(3):273-279.

［24］李輝信，胡鋒，沈其榮，陳小云，倉龍，王霞.接種蚯蚓對秸稈還田土壤碳，氮動態和作物產量的影響.應用生態學報，2002，13(12):1637-1641.

［27］王霞，胡鋒，李輝信，沈其榮.秸稈不同還田方式下蚯蚓對旱作稻田土壤碳氮的影響.生態環境，2003，12(4):462-466.