生地黃總抗氧化物質超聲法提取工藝研究

王慧嬌　肖鳳艷

摘 要：以篩選生地黃總抗氧化物質超聲提取最佳工藝為目的，以FRAP法測定總抗氧化物質的抗氧化能力，并以其為評價指標。通過正交設計方法，優化超聲提取工藝。結果表明，提取因素的影響程度為乙醇濃度>提取時間>提取溫度>料液比，最佳提取工藝是在提取溫度為40 ℃的條件下，用20倍量的80%乙醇超聲提取40 min。生地黃總抗氧化物質的抗氧化能力值為0.896 mmol·g-1。

關鍵詞：生地黃；總抗氧化物質；超聲提取

中圖分類號：R284 文獻標識碼：A DOI編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.06.003

生地黃，為玄參科植物地黃（Rehmannia glutinosa Libosch.）的塊根，有提高免疫系統、降糖、抗腫瘤、抗炎、抗氧化等多種藥理作用 [1-2]。研究表明，生地黃具有多種抗氧化成分（酚類、黃酮類、萜類、甾體等化合物），且提取這些成分時宜選擇乙醇做為提取溶劑[3]。有關生地黃抗氧化物提取工藝研究的文獻報道[4-6]僅是針對某單一或一類成分，這樣做忽略了其它的抗氧化成分而浪費了資源；僅是以化學方法作為評價指標，這樣做不能體現多類成分綜合的抗氧化活性。鑒于用超聲法[7]提取生地黃總抗氧化物質未見文獻報道，本試驗采用FRAP法測定熟地黃提取液體外總抗氧化活性，并以其為評價指標，在單因素試驗的基礎上，采用正交試驗設計，對影響生地黃抗氧化物質提取效果的多個因素進行了考察，以期優選出超聲法提取生地黃總抗氧化物質的最佳工藝，為生地黃總抗氧化物質的開發利用提供依據。

1 材料和方法

1.1 材料與試劑

生地黃藥材（產地河南，購于河南省鄭州市藥材公司），低溫烘干，粉碎0.425 mm備用。抗氧化試劑盒（上海碧云天生物技術有限公司）；去離子水。

1.2 儀 器

AB204-N電子分析天平（上海梅特勒-托利多儀器有限公司），KQ-700DB型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），R206D旋轉蒸發儀（上海大顏儀器有限公司），SHB-Ⅲ循環水式真空泵（上海豫康科教儀器設備），UV-9200型紫外分光光度計（北京瑞利分析儀器設備有限公司） ，加樣槍（德國普蘭德公司）。

1.3 方 法

1.3.2 樣品溶液的制備和總抗氧化物抗氧化能力值的計算 準確稱取生地黃粉末 5.00 g置于100 mL具塞錐形瓶中，分別于不同的工藝條件下超聲提取，將提取液減壓濃縮，并定容至 100 mL容量瓶中，即為待測液。取各工藝條件下的待測液溶液10 mL，加入180 μL的FRAP工作液混勻，在37 ℃孵化3～5 min，于593 nm處測定吸光度。根據吸光度值和標準曲線，計算結果表示其抗氧化能力值（mmol·g-1）。

2 結果與分析

2.1 單因素試驗結果

2.2 正交試驗結果

2.3 驗證性試驗結果

為考察上述結果的準確性，以保證提取工藝的合理可行，取生地黃按最佳提取工藝條件重復6次試驗。結果見表3。驗證性結果表明：該工藝合理可行，穩定可靠，具有可操作性和重現性，生地黃總抗氧化物質的總抗氧化能力值為0.896 mmol·g-1。

3 小 結

以總抗氧化物的抗氧化能力值為評價指標的正交試驗結果表明，最優超聲提取最佳方案為A2B2C2D2，即用樣品20倍量的80%的乙醇在溫度40 ℃條件下超聲提取40 min。在3個因素中， 影響生地黃中總抗氧化物提取率最重要的因素是乙醇濃度，即80%乙醇。

參考文獻：

[1] 劉衛欣，盧兗偉，杜海濤，等.地黃及其活性成分藥理作用研究進展[J].國際藥學研究雜志，2009（4）：277-280.

[2] 曲運琴，任東植，儀蕙蘭，等.環境條件對地黃雜交種子活力的影響[J].山西農業科學，2006，34（4）：49-51.

[3] 袁保剛.生地黃提取物抗氧化活性研究[D].楊凌：西北農林科技大學，2011.

[4] 李文波.酶-超聲提取地黃多糖及其抗氧化性研究[J].德州學院學報，2009（4）：46-50.

[5] 田春蓮，丁文.湖北地黃梓醇超聲波提取及含量測定[J].安徽農業科學，2009，37（28）：3788-3789，3792.

[6] 宋子榮，譚梓駿，陳西松，等.地黃提取工藝的優化[J].中國實驗方劑學雜志，2006（1）：8-9.

[7] 鐘玲，尹蓉莉，張仲林.超聲提取技術在中藥提取中的研究進展[J].西南軍醫，2007（6）：84-87.