穿心蓮內酯共研磨物的制備及其體外溶出考察

陳美儀??陳倩萍??黎鳳眉

[摘要] 目的 通過共研磨技術改善穿心蓮內酯體外溶出度水平。 方法 運用高效液相色譜法作為檢測方法，制備不同比例和輔料的穿心蓮內酯共研磨物，并考察其體外溶出度。 結果 F68，PEG6000和PVP所制備的共研磨物均能有效提高穿心蓮內酯的溶出度，其中F68 促進穿心蓮內酯的溶出最為明顯，且隨著載體比例的增加而提高，120 min內累計百分溶出率能達到95%。 結論 穿心蓮內酯F68共研磨物能明顯提高穿心蓮內酯的體外溶出度。

[關鍵詞] 共研磨法；穿心蓮內酯；溶出；泊洛沙姆

[中圖分類號] R917 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2013）08-40-03

穿心蓮內酯系穿心蓮中提取得到的二萜內酯類化合物，是穿心蓮的主要有效成分之一，具有清熱解毒、涼血消腫等功能，現代藥理學研究還表明，穿心蓮內酯還具有抗腫瘤、免疫調節、抗心血管疾病、保肝利膽等作用[1-4]。雖然穿心蓮內酯應用廣泛，但在進一步開發推廣的前景上，很大程度上仍受到其水溶性低的限制。

難溶性藥物在水中溶解度低，口服后難以達到治療濃度，這大大影響其在體內的轉運過程，使其難以為機體吸收而導致生物利用度差。共研磨技術是一種采用高分子材料為載體，通過藥物在研磨過程中的相互作用提高難溶性藥物體外溶出度的一種方法[5]。本實驗以穿心蓮內酯為傳統名優中藥的模型藥物，通過共研磨技術制備高分子材料與穿心蓮內酯的共研磨物，旨在提高難溶性中藥的溶出情況，使其產生更好的療效。

1 儀器與試劑

ZRS—8G智能溶出儀（天津大學無線電廠）；LC-10AT高效液相色譜儀（島津，日本）；SPD-10A紫外可見檢測器（島津，日本）；穿心蓮內酯（純度≥99%，成都歐康植化科技有限公司）；聚維酮（K30，天津市海納川科技發展有限公司），聚乙二醇6000（天津市福晨化學試劑廠）；泊洛沙姆188（F68，德國BASF化學公司）；甲醇（天津市四友精細化學品有限公司）。

2 方法

2.1 供試品制備

物理混合物制備：穿心蓮內酯和F68分別用研缽研磨20 min，并過80目篩，按1∶5的藥物-輔料比例進行混合。兩者混合均勻后即可得穿心蓮內酯F68物理混合物。

共研磨物制備：分別按一定的比例稱取穿心蓮內酯和三種輔料（F68，PEG6000，PVP），混合均勻后，在研缽中加液研磨40 min，烘干并過80目篩，得到穿心蓮內酯共研磨物。

2.2 溶出度測定

按中國藥典（2010版）附錄中有關槳法的規定進行，轉速為（100±1）r/min，水浴溫度為（37 ±0.5）℃，溶出介質為pH 6.8磷酸鹽緩沖液，溶出介質體積為1000 mL。

分別稱取原料藥，共研磨物及物理混合物適量，置于事先預熱的溶出儀中，分別于5、10、15、20、30、40、50、60、90、120 min時，取樣5 mL，隨后立刻補液5 mL，樣品液儲存待處理后測定。

2.3 含量測定

色譜條件[6]：色譜柱為Diamonsil-C18柱（250mm× 4.6mm，5μm，迪馬公司）；流動相為甲醇-水（70∶30），流速1.0 mL/min；檢測波長225 nm；柱溫為室溫。

對照液的制備：精密稱取穿心蓮內酯12 mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，作為標準儲備液。分別吸取一定量的甲醇儲備液用甲醇稀釋成穿心蓮內酯濃度為12、24、36、48、60、72、84、96μg/mL的對照品溶液，過0.45μm濾膜，進樣20μL測定。

供試品的制備：取溶出待測液0.5 mL，置10 mL容量瓶中，用甲醇稀釋定容后，過0.45μm濾膜，進樣20μL測定。

3 結果

3.1 HPLC分析方法學

結果表明，穿心蓮內酯在12～96μg/mL范圍內線性關系良好，輔料對藥物的測定無干擾，回歸方程為

Y=9.262×103C-1.328×104 （r=0.9998）。

在8 h內測定RSD為0.94%，表明樣品穩定性良好，高中低濃度平均回收率為99.7%、100.4%、100.2%，精密度測定RSD為0.73%，表明HPLC法符合穿心蓮內酯的測定要求。

3.2 穿心蓮內酯共研磨物的體外溶出考察

如表1所示，加入F68后制得的穿心蓮內酯物理混合物及共研磨物均不同程度提高了穿心蓮內酯原料藥的溶出度。在120 min內，原料藥的累計百分溶出率不到40%，而物理混合物則超過60%，共研磨物則高達95%。對于物理混合物和共研磨物而言，15 min的累計百分溶出率已經超過原料藥在120 min內的累計百分溶出率。對比物理混合物及共研磨物，共研磨物明顯具有更為顯著的促溶作用。在120 min內，共研磨物的累計百分溶出率超過95%，相比原料藥提高了約1.5倍。

3.3 不同載體制備的穿心蓮內酯共研磨物

F68，PEG6000和PVP所制得的共研磨物均顯示出對原料藥有促進溶出的作用。從表2中可以看出，在溶出實驗開始后的10 min，F68的促溶作用尤為顯著，隨后溶出速度逐漸放緩并趨于平緩，與PEG6000及PVP兩種輔料在10 min后的釋放速度相差不大。由于在開始階段的較強溶出促進作用，穿心蓮內酯F68共研磨物在120 min內能達到95%累計百分溶出率的理想水平，而以PEG6000及PVP作為共研磨物，120 min內的累計百分溶出率僅為70%和85%。因此，F68的促溶出效果明顯好于其他兩種輔料。

3.4 不同比例的穿心蓮內酯F68共研磨物

如表3，當改變研磨輔料的載體比例時，結果表明促溶作用與輔料的用量成正比。當輔料用量為藥物的3倍時，120 min內累計百分溶出率為82%，而比例提高至5倍后，累計百分溶出率可達95%，再將比例提高1倍，輔料量提至10倍后，累計百分溶出率已達到99%。根據結果，我們認為藥物輔料1∶10的比例已達到飽和作用，再提高輔料的比例也只能某種程度上提高藥物的初始釋放速度，對120 min內的釋放度提高已無重要意義。

4 結論

實驗證明，加入有藥物促溶作用的輔料，無論是利用物理混合還是共研磨法，均能有效提高藥物溶出度，而其中共研磨的作用效果尤為顯著。在所選取的幾種藥物促溶輔料中，F68的促溶作用明顯優于其他兩種輔料，而且隨著輔料用量的增加，促溶效果則隨之越來越明顯，在藥物輔料比例為1∶10的比例時，促溶作用達到飽和狀態。共研磨物的制備工藝簡單可控，從實驗室條件到大生產的過渡具有切實可行性。本實驗中所制備的穿心蓮內酯F68共研磨物，將為此類難溶性藥物的開發提供了一條切實可行，高效快捷的途徑。

[參考文獻]

[1] 覃林花，鄭智武，孔玲，等.穿心蓮內酯對腫瘤壞死因子- A和白介素- 12表達的抑制作用[J].第二軍醫大學學報，2011，32：717-720.

[2] 楊瓊，李曙光，董建華，等.穿心蓮內酯及其衍生物的抗腫瘤作用及機制[J].山東醫藥，2009，12：108-109.

[3] 何曉東，龔萍，亓翠玲，等.穿心蓮內酯滴丸抗小鼠黑色素瘤作用的研究[J].廣東藥學院學報，2011，27：163-165.

[4] 杜紅，牛欣，李海燕，等.穿心蓮內酯微乳抗炎作用研究[J].中華中醫藥雜志研究，2012，27：94-96.

[5] 秦凌浩，王曉明，胡巧紅，等.酮康唑固體分散體及共研磨物的制備及其體外溶出作用研究[J].中國藥房，2011，22：2740-2743.

[6] 張火旺.高效液相色譜法同時測定止痢寧片中穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯含量[J].中國藥業，2011，20：30-31.

（收稿日期：2013-03-27）