組織激肽釋放酶與缺血性腦卒中嚴重程度的相關性研究

馮 忠，汪立松，王希佳

組織激肽釋放酶(tissue kallikrein，TK)是一類絲氨酸蛋白酶，是組織型激肽釋放酶-激肽/緩激肽系統中的一個關鍵酶[1]。研究表明TK具有保護心腦血管作用[2]。我國一項12家醫院聯合的多中心、長達5年隨訪的前瞻性研究表明，TK與腦卒中的新發及再發均呈負相關[3]。然而TK與缺血性腦卒中(cerebral ischemic stroke，CIS)嚴重程度有無關系的研究較少。本研究探討TK與CIS患者嚴重程度的關系，并進一步探討TK在臨床中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年5月—2012年5月在我院神經內科就診的324例CIS患者為研究對象。納入標準：(1)CIS診斷參照《各類腦血管病診斷要點》[4]，均經顱腦CT或MRI檢查明確診斷；(2)發病至就診時間<72 h；(3)未經任何治療。排除標準：腎功能不全、心源性腦梗死、嚴重炎性疾病、自身免疫性疾病、血液病、腫瘤及其他神經系統疾病者。根據美國國立衛生研究院卒中量表評分(NIHSS)將患者分為兩組，其中NIHSS≤12分組238例，男136例、女102例，年齡43～73歲、平均(62.8±6.2)歲，病程1～62 h、平均(12.5±2.2)h，使用血管緊張素轉換酶抑制劑(ACEI)62例(26.05%)；NIHSS>12分組86例，男51例、女35例，年齡41～74歲、平均(63.1±6.4)歲，病程1～57 h、平均(12.2±1.9)h，使用ACEI 20例(23.26%)。兩組性別、年齡及使用ACEI比例具有均衡性。

1.2 方法 詳細記錄符合入選標準患者的姓名、年齡、性別、病史、個人史、NIHSS等情況。測量體質量、身高，計算體質指數。兩組患者均禁食12 h后清晨空腹采血，測定其血脂、肝腎功能及TK水平。其中血脂、肝腎功能采用奧林巴斯全自動生化分析儀檢測；TK采用生物素-親和素雙抗體夾心ELISA法檢測，具體方法參照張琴等[5]研究。

2 結果

2.1 不同程度CIS患者影響因素的單因素分析 NIHSS>12分組TK水平低于NIHSS≤12分組，差異有統計學意義(P<0.01)；NIHSS>12分組膽固醇、三酰甘油水平高于NIHSS≤12分組，差異亦有統計學意義(P<0.01)；兩組的年齡、男性比例、高血壓史發生率、糖尿病史發生率、吸煙率、飲酒率及體質指數比較，差異均無統計學意義(P>0.05，見表1)。

2.2 NIHSS與CIS影響因素的相關性分析 NIHSS與TK呈負相關(r=-0.425，P=0.038)；NIHSS與膽固醇(r=0.356，P<0.01)、三酰甘油(r=0.277，P<0.01)均呈正相關。

2.3 CIS嚴重程度影響因素的多元回歸分析 以NIHSS為應變量，TK、膽固醇、三酰甘油水平為自變量，進行多元線性回歸分析，結果顯示TK水平與CIS嚴重程度呈負相關；膽固醇、三酰甘油水平與CIS嚴重程度呈正相關(見表2)。

表1 不同程度CIS患者影響因素的單因素分析

注：NIHSS=美國國立衛生研究院卒中量表評分，TK=組織激肽釋放酶；*為χ2值

表2 CIS嚴重程度影響因素的多元回歸分析

Table2 The multiple regression analysis on influencing factor of severity of CIS

變量b標準誤b't值P值TK-0.7350.954-0.596-0.8610.021膽固醇1.1021.3531.1123.2210.036三酰甘油1.1161.5211.2314.2160.042

3 討論

我國每年有150萬～200萬新發腦卒中病例，發病率為(116～219)/10萬人口，年腦卒中死亡率為(58～142)/10萬人口。目前我國有腦血管病患者700余萬人，其中約70%為CIS，加強腦卒中患者的臨床研究是具有重要臨床意義的課題。盡管目前研究已經發現CIS與高血壓、糖尿病、脂代謝紊亂、肥胖、吸煙、飲酒、性別等因素有關，然而這些因素只能解釋部分患者，因此，尋找新的CIS發病相關指標具有重要的臨床意義。已有大量基礎研究證實TK具有神經保護作用[6]，然而其與CIS嚴重程度有無關系尚缺乏研究。

NIHSS是包括15個項目的神經功能檢查量表，包含每個主要腦動脈病變可能出現的神經系統檢查項目(如視野評測大腦后動脈梗死)，可反應腦卒中神經功能障礙嚴重程度[7]。本研究提示，NIHSS>12分組TK水平低于NIHSS≤12分組，為排除混雜因素影響，進一步進行相關分析和多元回歸分析，均顯示TK水平與NIHSS呈負相關，表明TK水平可以反映CIS患者的病情嚴重程度，這是本研究的新發現。TK是1930年由Kraut等在胰腺中發現高濃度此物質，命名為“Kallikrein”。近30年來，隨著分子生物學和細胞生物學技術的發展和應用，發現激肽釋放酶——激肽系統(kallikrein kinin system，KKS)作為一個復雜的內源性多酶系統，參與調控心血管、腎臟、神經系統等的生理功能，與腦卒中、心臟病、腎病、炎癥反應、癌癥等疾病的發生有著密切關系。基礎研究表明組織型激肽釋放酶——激肽/緩激肽系統具有抗血管損傷和預防腦卒中的作用[6]。TK可以減少局灶性腦缺血大鼠模型缺血誘導的神經缺陷和腦梗死體積，抑制神經細胞凋亡[1]。在高血壓大鼠發生腦梗死24 h后給予TK的治療仍然能夠促進成神經細胞的增殖、遷移和選擇性分化[8]。這些研究均提示了KKS可能具有腦卒中的防護作用。然而，TK與CIS患者病情嚴重程度是否相關既往報道較少。TK與CIS患者病情嚴重程度有關的可能原因在于[1-3，6，8]：(1)TK可以擴張腦動脈，改善缺血腦組織的血供和氧供；(2)TK可促進缺血腦新血管和神經形成；(3)TK可促進神經膠質細胞遷移，抑制細胞凋亡，減少炎癥細胞浸潤；(4)TK可拮抗血管損傷，抑制動脈肥厚；(5)TK可以抑制氧化應激、細胞凋亡和炎癥反應。Zhang等[3]對1 268例腦卒中患者進行長達5年的隨訪，發現TK不僅與腦卒中發生有關，且與二次卒中顯著相關，認為是腦卒中的保護因子，本研究與其結論相似，但本研究重在探討TK與CIS嚴重程度的關系。與既往研究[9-11]相似，本研究也發現膽固醇、三酰甘油水平與CIS患者病情嚴重程度相關。姬莉等[12]研究表明腦卒中急性期血糖水平越高，其病情越嚴重。但本研究并未發現CIS患者病情嚴重程度與糖尿病有關，可能與本研究入組患者并非全部為急性期患者有關。

綜上所述，本研究提示CIS患者TK水平下降，TK水平越低，CIS病情越嚴重。然而，本研究為單中心研究，病例數不多，尚需大樣本、多中心研究進一步證實。

1 Wang YD，Lu RY，Huang XX，et al.Human tissue kallikrein promoted activation of the ipsilesional sensorimotor cortex after acute cerebral infarction[J].Eur Neurol，2011，65(4)：208-214.

2 Liu L，Zhang R，Liu K，et al.Tissue kallikrein alleviates glutamate-induced neurotoxicity by activating ERK1[J].J Neurosci Res，2009，87(16)：3576-3590.

3 Zhang Q，Ding H，Yan J，et al.Plasma tissue kallikrein level is negatively associated with incident and recurrent stroke：a multicenter case-control study in China[J].Ann Neurol，2011，70(2)：265-273.

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5 張琴，冉曉，汪道文.社區人群中血漿人組織激肽釋放酶含量與血脂的關系[J].中國分子心臟病學雜志，2010，10(1)：57-60.

6 Liu L，Zhang R，Liu K，et al.Tissue kallikrein protects cortical neurons against in vitro ischemia-acidosis/reperfusion-induced injury through the ERK1/2 pathway[J].Exp Neurol，2009，219(2)：453-465.

7 黃小欽，賈建平，宋旸，等.急性缺血性卒中患者超急性期NIHSS評分與CT血管成像腦血管狹窄或閉塞關系研究[J].腦與神經疾病雜志，2010，18(6)：408-412.

8 Lu RY，Luo DF，Xiao SH，et al.Kallikrein gene transfer induces angiogenesis and further improves regional cerebral blood flow in the early period after cerebral ischemia/reperfusion in rats[J].CNS Neurosci Ther，2012，18(5)：395-399.

9 李偉，劉鳴，王麗春，等.腦卒中患者急性期血脂水平與病情嚴重程度的關系[J].臨床神經病學雜志，2007，20(3)：222-223.

10 李鵬翔，蘇慶杰，蔡毅，等.缺血性腦卒中二級預防中血脂調控現狀分析[J].中國全科醫學，2012，15(9)：3173.

11 馮俊強.缺血性腦卒中與血脂水平關系研究[J].實用心腦肺血管病雜志，2012，20(4)：642.

12 姬莉，劉夕珍，張宙，等.腦卒中患者急性期血糖水平與病情嚴重程度的關系[J].中國實用神經疾病雜志，2008，11(12)：55-57.