巴拿巴對糖尿病模型小鼠血糖的影響

方 潔，張愛珍，陳建國

巴拿巴的植物名為“大葉紫薇”，又名滿堂紅、海棠樹等，為落葉灌木，主要生長在澳洲和熱帶地區，在我國主要分布于廣東、廣西、福建、臺灣等地。在菲律賓、新加坡等東南亞國家，大葉紫薇被稱為“巴拿巴”，其葉、花和果實都被用于糖尿病的治療。巴拿巴軟膠囊是一種保健食品，其主要成分是以科羅索酸為主的3種植物酸，對于糖尿病患者有輔助降血糖作用[1-2]。本研究就巴拿巴軟膠囊對四氧嘧啶造模糖尿病小鼠血糖的影響進行了實驗，現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及試劑 選取健康、成熟、體質量24～26 g、ICR小鼠200只，雌雄各半(由浙江省實驗動物中心提供)，屬清潔級動物。小鼠在室溫20～25 ℃、相對濕度60%～70%條件下分籠飼養，自由進食、飲水，密切觀察癥狀、體征和死亡情況。四氧嘧啶由Sigma公司生產，血糖試劑盒由寧波慈城生化試劑廠生產，0.9%氯化鈉注射液由揚州中寶制藥有限公司生產。巴拿巴軟膠囊由杭州青春寶健康產品有限公司和杭州巴拿巴健康科技有限公司共同研制，本實驗用的巴拿巴軟膠囊由杭州青春寶健康產品有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 小鼠糖尿病模型制備及分組方法 200只小鼠適應實驗環境5 d后，按隨機數字表法隨機抽取30只小鼠(雌雄各半)作為正常對照組(NC組)，其余小鼠禁食24 h后按200 mg/kg腹腔注射四氧嘧啶0.9%氯化鈉注射液，72 h后測空腹血糖，取血糖值在15～30 mmol/L的小鼠120只，按血糖值、體質量根據隨機表法分成糖尿病模型組(MC組)、巴拿巴高劑量組(HD組)、巴拿巴中劑量組(MD組)、巴拿巴低劑量組(LD組)，每組30只，雌雄各半。其中，MC組1只小鼠在實驗過程中死亡，最終為29只。

1.2.2 給藥方法 臨用時將巴拿巴軟膠囊內容物取出，用色拉油配置成所需濃度。巴拿巴按100、20、4 mg·kg-1·d-1溶于5 ml色拉油中分別給HD組、MD組、LD組小鼠灌胃，MC組和NC組小鼠等劑量色拉油灌胃。連續進行42 d，分別在實驗的第14天、第28天、第42天將小鼠禁食12 h，測量體質量后測定血糖。

1.2.3 空腹血糖測定方法 小鼠禁食12 h，尾部采血，取血清按葡萄糖氧化酶法用試劑盒、島津UV-2100型紫外-可見光分光光度計測定血糖水平。

2 結果

2.1 各組小鼠體質量的變化 各組小鼠給藥前及給藥后不同時間體質量比較，差異有統計學意義(F時間×組別=3.304，P<0.01；F時間=172.198，P<0.01；F組別=4.533，P<0.01)；MC組、LD組、MD組、HD組小鼠給藥前體質量較NC組小鼠下降，差異均有統計學意義(P<0.01)，符合糖尿病對機體體質量的影響，提示造模成功。而給藥后，除了第28天時MD組小鼠體質量高于MC組小鼠(P<0.05)外，其余各給藥組小鼠體質量與MC組比較，差異均無統計學意義(P>0.05，見表1)。

2.2 各組小鼠空腹血糖水平的變化 各組小鼠給藥前及給藥后不同時間空腹血糖水平比較，差異有統計學意義(F時間×組別=25.166，P<0.01，F時間=10.318，P<0.01；F組別=11.250，P<0.01)；給藥前，MC組、LD組、MD組、HD組小鼠空腹血糖較NC組升高，差異均有統計學意義(P<0.01)，造模成功；給藥后第14天，LD組、HD組小鼠空腹血糖低于MC組，給藥后第28天LD組、MD組、HD組小鼠空腹血糖均低于MC組，給藥后第42天MD組、HD組小鼠空腹血糖低于MC組，組間比較差異均有統計學意義(P<0.05，見表2)。

組別只數給藥前給藥后第14天 第28天 第42天NC組3026 5±1 2 27 4±1 329 4±1 6 29 6±1 4MC組2921 3±1 9?25 4±1 225 6±1 8 27 0±2 0LD組3022 8±2 7?26 0±3 027 0±3 1 27 1±3 5MD組3023 2±1 5?26 0±1 527 8±2 3△27 5±2 2HD組3023 0±2 8?24 1±2 327 4±1 9 28 4±1 8F組間8 0641 8724 2672 486P0 0000 1310 050 056

注：NC組=正常對照組，MC組=糖尿病模型組，LD組=巴拿巴低劑量組，MD組=巴拿巴中劑量組，HD組=巴拿巴高劑量組；與NC組比較，*P<0.01，與MC組比較，△P<0.05

組別只數給藥前給藥后第14天 第28天 第42天NC組30 6 2±1 1 6 7±1 2 5 8±0 7 5 2±0 6 MC組2920 5±5 0▲28 2±4 4 29 5±4 1 25 5±4 7 LD組3020 5±5 0▲22 4±7 7?23 5±8 7?20 5±9 8 MD組3020 3±4 9▲23 7±7 2 23 1±7 4?17 3±8 6?HD組3020 2±4 6▲17 4±7 6△18 9±7 1△16 7±8 2△F組間23 28919 16821 64711 612P0 0000 0000 0000 000

注：與NC組比較，▲P<0.01；與MC組比較，*P<0.05，△P<0.01

2.3 各組小鼠胰島素水平的比較 給藥后第42天小鼠禁食12 h后眼眶采血，進行胰島素水平測定。結果顯示NC組、MC組、LD組、MD組、HD組小鼠胰島素水平分別為(887±249)、(576±96)、(696±191)、(679±179)、(728±122)pg/ml，各組比較差異有統計學意義(F=4.232，P=0.005)；其中HD組小鼠高于MC組，差異有統計學意義(P<0.05)。

3 討論

近年來，糖尿病患病率在我國呈逐年上升趨勢，糖尿病及其并發癥已成為除腫瘤和心腦血管疾病之外嚴重威脅我國人民健康的疾病，也是我國百姓看病難、看病貴的主要疾病之一。全國流行病學調查顯示，目前我國糖尿病患者約4 000多萬人，90%以上是由于生活方式和飲食結構不當引起的，而且發病年齡提前。流行病學資料顯示，糖尿病患者發生心血管疾病的危險性是非糖尿病的2～4倍[3-5]，發生腦血管疾病的危險性是非糖尿病的2倍[6-7]。此外，糖尿病是一種慢性、終生性疾病。有效控制血糖水平一般需終身用藥，糖尿病的醫療費用占整個健康支出的比例已經從基礎的2.5%增加到15.0%，并

且有逐年增長的趨勢，給患者及家庭帶來了沉重的經濟負擔，特別對農村糖尿病患者來說，負擔更加沉重。目前臨床上使用的口服降糖藥都有一定的不良反應。因此開拓研究具有調節血糖水平且無不良反應的營養保健食品已引起廣泛關注。

本研究中所用的巴拿巴軟膠囊有效成分為科羅索酸，又名2α-羥基熊果酸，是一種三萜化合物，由巴拿巴葉子中提取出來的。大葉紫薇在東南亞國家作為一種東方傳統藥物用于治療糖尿病，它的葉子曾被報道有抗糖尿病功效。近年來，對大葉紫薇功能作用的研究越來越受到人們的關注，日本、美國、菲律賓等國家都對大葉紫薇的化學成分、功能作用等進行研究。Syoichi等[8]用含1%科羅索酸的大葉紫薇提取物膠囊喂養小鼠，90 min后小鼠的血糖水平比對照組明顯下降。Judy等[9]臨床研究表明，科羅索酸能降低2型糖尿病患者的血糖。然而，其具體確切的機制尚不十分清楚。可能的機制為科羅索酸能刺激細胞膜的葡萄糖運輸通道，增強細胞對葡萄糖的利用，進而降低血糖水平。本研究亦發現，巴拿巴灌胃后隨著時間的延長小鼠空腹血糖有降低趨勢，尤其是高劑量灌胃的小鼠空腹血糖降低更為顯著，提示巴拿巴降血糖作用具有劑量依賴性及時間依賴性。

本研究還發現，HD組小鼠巴拿巴給藥后第42天胰島素水平顯著高于糖尿病模型小鼠，提示巴拿巴有促進胰島素分泌的作用。2型糖尿病患者由于胰島素抵抗的發生和發展，人體對胰島素的利用率降低，先期會導致高胰島素血癥，引起代謝綜合征。晚期由于高血糖、高血脂對胰島β細胞產生的“糖毒性”和“脂毒性”作用，使胰島β細胞凋亡和死亡，引起胰島素分泌減少。而巴拿巴促進胰島素分泌的作用，能促進體內血糖調節，有效幫助糖尿病患者控制血糖。

總之，巴拿巴能夠降低糖尿病小鼠的血糖水平，且此作用具有劑量依賴性和時間依賴性，但具體的作用環節和靶點還有待于進一步研究。

1 Wen X，Sun H，Liu J，et al.Pentacyclic triterpenes.Part 1：the first examples of naturally occurring pentacyclic triterpenes as a new class of inhibitors of glycogen phosphorylases[J].Bioorg Med Chem Lett，2005，15(22)：4944-4948.

2 梁茂雨，陳怡平，縱偉.降血糖功能因子科羅索酸研究進展[J].中國食物與營養，2007(5)：17-18.

3 Raza J A，Movahed A.Current concepts of cardiovascular diseases in diabetes mellitus[J].Int J Cardiol，2003，89(2/3)：123-124.

4 李兵強,李廣平，袁如玉，等.正常空腹血糖與心血管疾病危險因素的相關性研究[J].中國全科醫學，2011，14(1)：136.

5 范慧，張鵬睿，徐援.2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝與胰島素抵抗及心血管病變發生的關系研究[J].中國全科醫學，2011，14(1)：147.

6 呂仁和.糖尿病及其并發癥中西醫診治學[M].北京：人民衛生出版社，1979：10.

7 王瑾.高血糖對腦血管病急性期患者預后的影響[J].實用心腦肺血管病雜志，2012，20(5)：859.

8 Syoichi H，Hideharu K，Katsuya K.Glucose effect on blood glucose in rats[J].Yakuri to Chiryo，1999，27(6)：1075-1077.

9 Judy WV,Hari SP,Stogsdill WW,et al.Antidiabetic activity of a standardized extract(Glucosol) from Lagerstroemia specious leaves in type Ⅱ diabetics.A dose-dependence study[J].Journal of Ethnopharmacology，2003，87(1)：115-117.