免疫細胞及相關細胞因子在格林－巴利綜合征和實驗性自身免疫性神經炎中的作用研究進展

賁 瑩，張鳳華，張 冬

格林 －巴利綜合征(Guillain-Barre syndrome，GBS)又稱急性感染性多發性神經炎［1］，其病理改變是周圍神經組織中小血管周圍淋巴細胞和巨噬細胞浸潤導致周圍神經炎癥及髓鞘脫失［2］，嚴重病例可出現繼發軸索變性。實驗性自身免疫性神經炎(experimental allergic neuritis，EAN)是T細胞介導的周圍神經系統炎性脫髓鞘性自身免疫病，與GBS有相似的臨床表現和免疫學特點，是人類研究GBS的理想動物模型［3-4］。近年來，對GBS、EAN的研究主要集中在其免疫學機制上，尤其是對免疫細胞及其分泌的相關細胞因子在疾病中所起的作用研究較多。現對此方面的研究作一綜述。

1 Th1細胞及其細胞因子的作用

Th1細胞主要分泌γ干擾素(IFN-γ)、α干擾素(TNF-α)、白介素 2(IL-2)、IL-1β 等，介導免疫應答。在EAN和GBS的周圍神經組織中有大量Th1細胞浸潤，促進炎癥發生、發展。

1.1 IFN-γ IFN-γ主要由Th1細胞分泌，現發現其免疫功能主要有:①激活巨噬細胞，使其產生自由基，導致髓鞘磷脂損傷。②增強毛細血管通透性，吸引T細胞向周圍神經系統移行、浸潤。③上調細胞間黏附分子1(ICAM-1)在T細胞、巨噬細胞和血旺細胞表面表達，誘導血旺細胞、血管內皮細胞和巨噬細胞主要組織相容性復合物Ⅱ類抗原(major histocompatibility complex classⅡ，MHC-Ⅱ)的表達。④刺激血旺細胞提呈外源P2蛋白給P2特異性T細胞。⑤誘導巨噬細胞、血旺細胞表達iNOS mRNA，加速一氧化氮(NO)的產生。⑥促進IL-2、IL-1β、腫瘤壞死因子α(TNF-α)等的產生，并與其有協同的促炎作用。Zhu等［5］研究發現，GBS患者急性期血清檢測，IFN-γ水平顯著升高，一般為IL-4的2～3倍。Wu等［6］發現在 EAN鼠淋巴結、脾臟中產生IFN-γ水平與EAN病情程度大致呈平行關系，并且在疾病開始前在脾臟以及淋巴結已發現有IFN-γ mRNA表達的T細胞，提示IFN-γ是EAN發病的關鍵因素。

1.2 TNF-α Th1細胞、巨噬細胞分泌 TNF-α。其免疫功能為:①激活巨噬細胞，上調iNOS特異性mRNA在血旺細胞表達，促進NO釋放［7］。②刺激T細胞、血旺細胞分泌 IL-6、IL-2、IFN-γ 等淋巴因子，并與他們產生協同作用，促進炎癥發展。Radhakrishnan等［8］檢測到急性期GBS患者血清及腦脊液中TNF-α水平顯著增高，并與疾病嚴重程度密切相關。Radhakrishnan等［9］研究顯示，未經治療的GBS患者血清TNF-α水平較對照組高。經過靜脈注射免疫球蛋白或血漿置換治療后，血清TNF-α的含量大幅度下降。TNF-α注射于鼠坐骨神經引起軸索變性，同抗髓磷脂的抗體一起注射，引起血管周圍神經纖維脫髓鞘，但單獨大劑量TNF-α的注射未引起 脫 髓 鞘［10］。Weishaupt 等［11］認 為 TNF-α 在EAN發病中的作用可能與誘導T細胞、施萬細胞凋亡有關。

1.3 IL-1β IL-1β是早期的促炎細胞因子。Th1細胞、巨噬細胞、血旺細胞、自然殺傷細胞(NK)均能分泌IL-1β。由于巨噬細胞移行、浸潤EAN和GBS的周圍神經系統，所以巨噬細胞是周圍神經系統內IL-1β的主要來源［12］。其作用為:①促進血旺細胞增殖，刺激巨噬細胞和血旺細胞分泌TNF和IL-6。②和TNF-α協同作用使ICAM-1分泌增加，并且促進蛋白酶的釋放［13］。③IL-1β還可增加T細胞表面MHC-Ⅱ類抗原的表達。在EAN大鼠臨床癥狀出現前就已經在其淋巴結和坐骨神經中檢測到IL-1β mRNA的表達。因此，在EAN的自身免疫反應中IL-1β可能起到了啟動因子的作用。

2 Th17細胞及其細胞因子的作用

Th17細胞是新發現的不同于Th1細胞和Th2細胞的新型CD4+輔助性T細胞亞群，其在固有免疫和適應性免疫中均發揮重要作用，通過分泌IL-17A/F、IL-22、IL-6、TNF-α、集落刺激因子等炎癥相關細胞因子參與自身免疫，并在誘導自身免疫的組織損害及炎癥過程中起著決定性的作用。Th17細胞分泌的IL-17具有促炎作用，能誘導促炎細胞因子(如 IL-6、TNF)、趨化因子(如 MCP1和 MIP2)和基質金屬蛋白酶的表達，刺激NO和前列腺素E2的產生，引起組織細胞浸潤和組織破壞。IL-17還能增加ICAM-1表達，對T細胞的活化起協同刺激作用，并能促進樹突狀細胞的成熟［14-15］。最近，Maurer等［16］研究發現，主要分泌 IL-17的 Th17細胞在受EAN侵襲的坐骨神經的血管周圍聚集，提示Th17細胞參與了EAN病理過程的進展。IL-17基因缺陷小鼠誘導產生的EAN臨床癥狀明顯減輕，組織病理學變化減輕，并更加容易緩解［17］，抗IL-17抗體可以使EAN癥狀明顯減輕［18］。

3 Foxp3+Treg細胞及其細胞因子的作用

Foxp3+Treg細胞是不同于Th1和Th2的具有調節功能的T細胞群體，具有免疫抑制功能，在多種免疫性疾病中起重要的調節作用。活化的Foxp3+Treg細胞主要通過細胞毒性T淋巴細胞抗原4(CTLA-4)傳遞抑制信號，以接觸抑制的方式抑制T細胞的活化和增殖。另外，Foxp3+Treg細胞能夠預防過度的炎性反應和(或)自身免疫，從而致免疫耐受和免疫穩態［19］，其可分泌細胞因子IL-10和β型轉化生長因子(TGF-β)抑制免疫反應。TGF-β可從以下3個方面對免疫功能起抑制作用:①抑制免疫效應細胞的增殖。②抑制免疫效應細胞的分化和活性。③抑制細胞因子的產生及其免疫調節作用。在EAN臨床癥狀發生前或到疾病活動早期或高峰期EAN大鼠的坐骨神經中沒有Foxp3+調節性T細胞聚集。與此相對比的是在EAN恢復期發現了Foxp3+調節性T細胞在坐骨神經中的積聚，提示其作用是抑制炎癥，使EAN消退［16］。用髓鞘堿性蛋白、P2蛋白或P0蛋白培養EAN的脾細胞，檢測發現其TGF-β mRNA的表達增加，且在臨床恢復期時 TGF-β mRNA 的表達最高。Creange等［20］對GBS患者血清中的TGF-β進行了檢測發現，其含量明顯高于非炎性神經系統疾病和健康對照組。在GBS患者即將進入恢復期前TGF-β含量最高，在恢復期TGF-β含量有所下降，但仍明顯高于非炎性神經系統疾病和健康對照組。TGF-β含量的增加和恢復期的時間相關性提示，TGF-β在疾病的全過程中起著控制炎性反應，促進組織修復的作用。

GBS和EAN中由細胞免疫參與的自身免疫過程對疾病的發生、進展和轉歸起著決定性作用。在臨床癥狀的發展期、高峰期主要以Th1、Th17細胞及其分泌的促炎細胞因子如 IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-17等占優勢，而在恢復期以Foxp3+Treg細胞及其分泌的抑炎細胞因子TGF-β等為主。因此在該病的藥物治療中，應探索能促進Foxp3+Treg細胞的分化，或增加抑炎細胞因子表達的藥物，這將為GBS的治療開拓條新的思路。

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