咪康唑莫米松皮膚成膜凝膠皮膚用藥安全性試驗＊

賴東梅，張丹霞，陳惠英，廖朝峰，張呂釗

(廣東省深圳市寶安人民醫院藥劑科，廣東 深圳 518101)

咪康唑莫米松皮膚成膜凝膠為我院自制制劑。筆者以常用凝膠劑輔料泊洛沙姆407和188為基質材料[1]，將硝酸咪康唑糠酸和莫米松兩種治療皮膚病用藥配制成復方皮膚成膜凝膠[2]，并按照新藥審批辦法中有關皮膚毒理試驗要求[3]，進行安全性試驗研究，包括皮膚刺激性試驗和過敏性試驗。

1 試藥與動物

咪康唑莫米松皮膚成膜凝膠[2](批號為20120201，規格為每支10g);對照品成膜凝膠基質(批號為20120205，規格為每支10g)。均為本院制劑室研制產品。健康日本大白兔10只，體重1．8～2．5 kg，雄雌各半;豚鼠 30 只，體重 250 ～350 g，雄雌各半，均購自廣東省醫用實驗動物場(粵證12-059)，試驗期間，動物均飼養在室溫18～25℃、相對濕度45% ～65%、安靜的相同環境，自由進食。

2 方法與結果

2．1 皮膚刺激性試驗[4]

將10只家兔稱重后分成兩組，第1組為完整皮膚組，第2組為破損皮膚組，每組5只，雄雌各半。試驗前24 h對家兔脊柱雙側給藥區進行脫毛處理，剪去約3 cm×3 cm。破損皮膚制作:在給藥部位用碘伏消毒后，用無菌針頭劃“#”字，以輕度滲血為度。

家兔左側脫毛區給予咪糠唑莫米松成膜凝膠藥物，右側脫毛區給予成膜凝膠基質對照品，均每天每只1．0 g/只，然后用1層玻璃紙覆蓋，用無刺激的紗布和醫用膠布固定。敷藥4 h后，除去受試物并用溫開水清潔給藥部位。連續7 d。每次給藥前1 h和末次洗去藥物后1，24，48，72 h借助眼科反光鏡按照皮膚刺激反應評分表見表1，觀察并記錄敷藥部位有無紅斑和水腫等情況，以及上述變化的恢復情況的恢復時間，評價本品對皮膚的刺激強度。評價標準為分值在 0～0．49分為無刺激性，0．5～2．99分為輕度刺激性，3．0 ～5．99 分為中度刺激性，6．0 ～8．0 分為強刺激性。

咪糠唑莫米松成膜凝膠對家兔皮膚連續7 d的刺激反應，結果見表2。咪糠唑莫米松成膜凝膠(左側)及其基質(右側空白對照)對家兔完整皮膚和破損皮膚連續給藥7 d和停藥觀察3 d，均未見紅斑、水腫等情況，根據皮膚刺激評價標準，所試兩組藥物均屬于無刺激性。

表1 皮膚刺激反應評分表

表2 咪康唑莫米松成膜凝膠對家兔皮膚連續7 d的刺激反應結果

2．2 皮膚過敏性試驗[5]

將豚鼠稱重后按性別體重隨機分成3組，每組10只，雄雌各半。第1組為給受試藥物咪康唑莫米松成膜凝膠(1．0 g/只)，第2組為成膜凝膠基質(1．0 g/只)空白對照組，第3組為陽性物1%的 2，4-二硝基氯苯丙酮溶液(0．2 mL/只)陽性對照組。

致敏接觸:取上述受試物涂在試驗前24 h脊背兩側已脫毛的豚鼠左側皮膚上，用醫用繃帶、膠布固定，持續6 h，用溫開水擦洗干凈給藥部位。第7天和第14天以同樣方式重復1次，共3次。激發接觸:于末次給受試物致敏后14 d，將上述受試物再涂于豚鼠脊背部右側脫毛區，6 h后去除受試物，用溫開水擦洗干凈給藥部位，即刻借助眼科反光鏡觀察皮膚過敏反應情況，照表1、表3評分，于24，48，72 h再次觀察，按照國家藥品監督管理局藥物研究技術指導原則的評分標準[5]，對皮膚紅斑和水腫進行評分，空白對照與陽性物對照組同法觀察。結果見表4。

表3 皮膚致敏性評價標準

可見，在激發接觸觀察中，第1組豚鼠右側脊背脫毛部位涂擦硝酸咪康唑/糠酸莫米松復方成膜凝膠，第2組涂擦成膜凝膠基質，分別在0，24，48，72 h后與其自身左側對照觀察，均未見出現紅斑和水腫現象;第3組豚鼠右側涂1%的2，4-二硝基氯苯丙酮溶液，其分別在 0，24，48，72 h后與其自身左側對照觀察，有相當部分豚鼠皮膚出現明顯紅斑或(和)水腫現象。

表4 咪康唑莫米松成膜凝膠對豚鼠皮膚過敏反應的評定結果

3 討論

選用泊洛沙姆407和188為混合基質制配的成膜凝膠，具有良好的效果[6-7]，且其載藥量大，已廣泛應用于眼、耳、鼻[8]及陰道局部用藥[1]。本試驗結果表明，本皮膚成膜凝膠對家兔的完整皮膚和破損皮膚均無刺激性，對豚鼠的皮膚亦無過敏性反應，說明本品應用于臨床安全、可靠。

[1]金璐燕，李 娟．泊洛沙姆407在制劑中的應用進展[J]．藥學與臨床研究，2009，17(3):231-234．

[2]張丹霞，賴東梅，陳惠英，等．咪康唑莫米松成膜凝膠的制備及其質量控制[J]．中國藥業，2013，22(5):53-55．

[3]國家食品藥品監督管理局．藥物研究技術指導原則:2005[M]．北京:中國醫藥科技出版社，2006:234-250．

[4]孫敬方．動物實驗方法學[M]．北京:人民衛生出版社，2002:191，374-375．

[5]ZGPT5-1．中藥、天然藥物免疫毒性(過敏性、光變態反應)研究的技術指導原則[S]．

[6]Niu G，Du F，Song L，et al．Synthesis and characterization of reactive poloxamer 407s for biomedical applications[J]．J Control Release，2009，138(1):49-56．

[7]Dumortier G，Grossiord JL， Agnely F，et al．A review of poloxamer 407 Pharmaceutical and pharmacological characteristics[J]．Pharm Res，2006，23(12):2 709-2 728．

[8]Zakinm，Awad GA，Mortada ND，et al．Enhanced bioavailability of metoclopranide HCL by intranasal administration of a mucoadhesive in situ gel with modulated rheological and mucociliary transport Properties[J]．Eur J Pharm Sci，2007，32(4-5):296-307．