復方豆蔻酊防腐劑的選擇

陳樹新，龐佩珊，陳翠環(huán)

(廣東省佛山市第一人民醫(yī)院藥劑科，廣東 佛山 528000)

復方豆蔻酊由肉桂、白豆蔻、小茴香等用乙醇浸漬提取而成，具有驅風健胃作用，用于食欲不振、胃腸氣脹、惡心、嘔吐等[1]，為我院制劑(驅風合劑、小兒驅風合劑)的自制中間產品。復方豆蔻酊含醇量為65%，應具備抑菌作用，但工作中發(fā)現該制劑出現微生物限度超標的現象，影響后續(xù)工序的進行和制劑的質量。參考文獻[2-4]，加入適量防腐劑可有效控制制劑的微生物限度，筆者通過加入不同濃度的3種不同防腐劑，比較其對復方豆蔻酊的抑菌效果，篩選適宜的防腐劑及其濃度控制復方豆蔻酊的微生物限度。

1 儀器與試藥

HH．B11型電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海市躍進醫(yī)療器械一廠);LRH-150B型生化培養(yǎng)箱(上海一恒科技有限公司);Ph-340型pH酸度計，DGH 80-B型電熱恒溫鼓風干燥箱(武漢瑞華儀器設備公司);10 000級潔凈細菌培養(yǎng)室、無菌室;玻璃儀器等。小茴香(批號為 110107)，白豆蔻(批號為 100806)，肉桂(批號為20110501)均由南海藥材公司提供;甘油(湖南爾康制藥公司，批號為20110215);95%乙醇(安徽安特生物化學制品，批號為1105113201);苯甲酸(鎮(zhèn)江前進化工公司，批號為100902);羥苯乙酯(臺山新寧制藥有限公司，批號為0100901);度米芬(重慶青陽藥業(yè)有限公司，批號為101001);氯化鈉(臺山市新寧制藥有限公司，批號為20110302);滅菌生理鹽水、純化水等均為藥用規(guī)格。牛肉浸膏(批號為20070412)，蛋白胨(批號為F20101012)，瓊脂粉(批號為F20080313)均由國藥集團化學試劑有限公司提供;玫瑰紅鈉瓊脂(北京陸橋技術有限責任公司，批號為100422);牛膽鹽(國藥集團化學試劑有限公司，批號為F20070710);乳糖(天津市永大化學試劑有限公司，批號為20100323);溴百里香草酚藍(廣州化學試劑廠，批號為970801);氯化-2，3，5-三苯基四氮唑(上海化學試劑采購供應站分裝廠，批號為861127)。以上均為分析純。

2 方法與結果

2．1 試驗用品準備

樣品:按復方豆蔻酊處方量，取已粉碎(過24目篩)的小茴香、白豆蔻、肉桂藥材，以65%乙醇潤濕后裝桶，用65%乙醇浸漬3次，每次48 h，滲漉，收集濾液，加入甘油，調節(jié)含醇量至65%，攪勻，即得。

供試品[5]:分別等量量取復方豆蔻酊樣品9組，向1～3組分別添加 0．06% ，0．08% ，0．1% 的苯甲酸，作為供試品 1，2，3;向4 ～6 組分別添加 0．01%，0．03% ，0．05% 的羥苯乙酯，作為供試品 4，5，6;向 7 ～9 組分別添加 0．01%，0．03%，0．05%的度滅芬，作為供試品 7，8，9。

培養(yǎng)基:按2010年版《中國藥典》附錄ⅪJ微生物限度檢查法中培養(yǎng)基及其制備方法[6]制備0．001%TTC營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、膽鹽乳糖增菌液。

陰性對照品:試驗用稀釋液0．9%無菌氯化鈉溶液。

2．2 檢測方法

2．2．1 樣品檢測[6]

檢測細菌、霉菌/酵母菌:取樣品10 mL，用0．9%無菌氯化鈉溶液按1∶10，1∶100稀釋，備用。取各梯度樣品稀釋液1 mL，分別注入到無菌平皿中，向每個平皿傾注15～20 mL不超過45℃的溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)，每稀釋級每培養(yǎng)基制備2個平板。取試驗用稀釋液1 mL，置無菌平皿中，注入營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，凝固，倒置培養(yǎng)，制備2個平板。在恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，計數，取平均值，檢測細菌用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，30～35℃培養(yǎng)3 d，檢測霉菌/酵母菌用玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，23～28℃培養(yǎng)5 d。

檢測大腸埃希菌:取樣品10 mL，直接接種至100 mL膽鹽乳糖增菌液中，在恒溫培養(yǎng)箱30～35℃培養(yǎng)18～24 h。同樣品檢查方法同時做陽性對照和陰性對照試驗。

2．2．2 供試品檢測

供試品的檢測按樣品檢測方法檢測。

2．3 檢測結果

檢測結果見表1和表2。由表1可知，復方豆蔻酊樣品的霉菌/酵母菌、大腸埃希菌含量測定結果為陰性，無菌生長;而其細菌含量超過100 cfu，不符合規(guī)定。由表2可知，每份供試品的霉菌/酵母菌、大腸埃希菌含量測定都呈陰性;供試品4～9，添加羥苯乙酯、度滅芬后，每1毫升供試品的細菌含量仍然超過100 cfu，超出規(guī)定范圍，其不同濃度時的抑菌效果無明顯差異;從供試品1，2，3的檢測可以看出，隨著苯甲酸的濃度的增大，抑菌效果增加，當濃度在0．08%時，已產生抑菌作用，檢測菌數小于100 cfu;濃度增加到0．1%時，抑菌效果較好，供試品細菌含量小于10 cfu。

表1 樣品微生物限度檢測結果

表2 供試品微生物限度檢測結果(細菌/霉菌或酵母菌/大腸埃希菌)

3 討論

酊劑是我國傳統中藥制劑，必須符合《中國藥典》酊劑項下的規(guī)定。復方豆蔻酊作為我院內服制劑的原料，微生物含量是其中一項質量控制指標。由于原材料生藥含水分過多、產品含醇量不足、空氣溶劑及生產環(huán)境污染等原因，制劑微生物限度超標情況時有出現。而中藥制劑微生物限度越來越受到人民關注，解決微生物限度超標可采用環(huán)氧乙烷對其消毒滅菌、高溫滅菌或加入防腐劑的方法。環(huán)氧乙烷消毒滅菌法存在影響生產進度、增加生產成本等缺點;高溫滅菌法會破壞制劑當中某些中藥有效成分的結構，使得藥效降低，影響療效;加入防腐劑來解決，有效、安全、可行。

本研究中，3種防腐劑均能溶于復方豆蔻酊中;復方豆蔻酊pH為6．1，符合苯甲酸及其鹽類在偏酸性使用條件。研究結果表明，添加0．1%苯甲酸對復方豆蔻酊的抑菌作用較為明顯，可有效控制復方豆蔻酊的微生物限度。當然，要有效控制制劑的微生物限度，還必須嚴格執(zhí)行操作規(guī)程和規(guī)范。

[1]中央人民政府衛(wèi)生部．中華人民共和國藥典 [M]．上海:商務印書館，1953:293．

[2]袁惠英．50%硫酸鎂溶液的防腐劑篩選研究[J]．中國藥房，2011，22(9):812-814．

[3]溫東妹，夏春森，馮柏康，等．利巴韋林口服溶液中抑菌劑的篩選[J]．中國藥房，2010，21(45):4 251-4 253．

[4]錢木水，葉興法，倪赤杭．液體制劑中防腐劑選用的體會[J]．海峽藥學，2009，21(3):32-34．

[5]崔福德，龍曉英．藥劑學[M]．北京:人民衛(wèi)生出版社，1980:144-146，181-184．

[6]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典(二部)[M]．北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄105-附錄115．