豬圓環病毒Ⅱ型及疫苗研究現狀

蔡良水

（武漢科前動物生物制品有限責任公司,湖北武漢430070）

豬圓環病毒分為Ⅰ型和Ⅱ型。PCV1無致病性，而豬圓環病毒Ⅱ型（PCV2）卻具有致病性，能引起豬表現多種臨床癥狀。PCV2是引起仔豬斷奶多系統衰竭綜合征的主要病原。自1991年在加拿大豬群中暴發以來，PMWS已經波及全球，給全世界養豬業造成了巨大的經濟損失。PCV2還與增生性壞死性肺炎、母豬繁殖障礙、豬皮炎與腎病綜合征和豬呼吸道疾病綜合征相關。PCV2感染性疾病引起的死亡率增高、飼料報酬降低，加上我國規模化主場飼養管理水平相對較為落后，所以PCV2及其疫苗成為最近幾年國內外學者研究的熱點。

1 豬圓環病毒病的流行病學

在我國雖然近幾年來才對豬圓環病毒引起重視，但是，對于豬血清中PCV2抗體所作血清學研究表明PCV2抗體至少從1969年起就已經存在于豬群中了。現已證明，圓環病毒病在規模化豬場中流行廣泛，血清學調查表明，在德國、加拿大、英國和愛爾蘭，豬血清抗體陽性率分別高達95%、55%、86%和92%，豬Ⅱ型圓環病毒病的死亡率約為10%～30%不等。較嚴重的地區，豬場在暴發本病時死亡率高達40%左右。在我國黑龍江省、浙江省、上海市、福建省、湖南省、云南省的血清學調查表明，豬血滑抗體陽性率分別高達63.59%、58.31%、79.7%、63.6%、62.29%、29%。 并在檢測中發現PCV2陽性率與豬繁殖與呼吸綜合征陽性率有一定的相關性,PCV2感染豬群的免疫功能受到損害，導致機體抵抗力下降，易受其他病原的并發或繼發感染，使病情加重導致死亡。PCV2與豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬偽狂犬病毒等病原有協同感染。

2 臨床癥狀

PCV2感染豬后主要可以引起以下5種疾病：

2.1 斷奶豬多系統衰竭綜合征（PMWS）

主要發生在哺乳期和保育期仔豬，影響6～8周齡的豬，很少影響吮乳的豬。一般斷奶后2～3天開始發病，急性發病豬群中，發病率4%～25%，病死率高達90%以上，豬感染后主要表現為漸進性消瘦，生長遲緩，采食量下降，被毛粗亂，有的豬出現貧血、體重減輕，皮膚與可視黏膜蒼白或黃疸，有相當一部分豬只出現呼吸困難、喘氣，呈腹式呼吸，少數豬只出現拉稀癥狀，由于細菌、病毒的二重感染，常常使PMWS的癥狀復雜化、嚴重化。臨床上約有20%的病豬呈現貧血與黃疸癥狀，具有診斷意義。剖檢病變：全身淋巴結異常腫脹，切片均勻的白凈，肺臟腫脹，堅硬似橡皮樣，肝臟發暗，肝小葉間結締組織增生。

2.2 豬皮炎和腎病綜合征（PDNS）

發病率為0.5%～2%，有時可達7%。病豬表現為厭食、呆滯、蒼白、發熱、結膜炎，呼吸困難、腹瀉，消瘦。剖解病變為腎臟腫大、蒼白、有病灶，成斑瀾狀，有時出血和水腫，淋巴結顯著腫大，腹水、胸腔、腹瀉、心包積液、黏膜，漿膜而出血，肺水腫或呈橡皮樣，有時皮下水腫、結腸、腸系膜水腫。特征性癥狀是會陰部、四肢、胸腹部及耳朵等處的皮膚上出現圓形或不規則形的紅紫色病變斑點或斑塊，有時這些斑塊相互融合成條帶狀，不易消失。

2.3 繁殖障礙

發病母豬主要表現為體溫升高達41℃～42℃，食欲減退，感染母豬發生流產、死產、產木乃伊胎，母豬的返情率增加，仔豬斷奶前死亡率上升，斷奶后母豬發情延遲，在死產和新生仔豬出現非化膿性、壞死性或纖維性心肌炎。此外，在公豬精液中也分離到豬II型圓環病毒。

2.4 豬間質性肺炎

發生PMWS的仔豬有呼吸困難、肺炎癥狀，多見于保育期和育肥期的豬，PCV2與豬肺炎霉形體、豬流感病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、多殺性巴氏桿菌等發生協同感染，咳嗽、流鼻汁、呼吸加快、精神沉郁、食欲不振、生長緩慢。

2.5 先天性震顫

其震顫為從輕度到重度。在出生后第一周，嚴重的震顫可因不能吃奶而死亡，活一周的仔豬可以存活下來，但多數在3周時間恢復。震顫為雙側，影響骨骼肌肉，當臥下或睡覺時震顫消失，外界刺激可引發或加重震顫，如聲音或溫度刺激；有的在整個生長和發育期間都不斷發生震顫。主要是母豬在懷孕階段感染了病毒。PCV2病毒通過胎盤感染胎兒的可能性很小，或者感染發生在胎兒免疫功能形成以前。

3 PCV2的防控措施

實驗獸醫生物安全措施：防止PCV2和使其感染惡化的二重因子，特別是細茵、支原體及其他病毒侵入豬群。認真地對待引種工作，引種不慎往往是暴發疫情的主要原因。引進的后備母豬應進行嚴格的檢疫，所購買的種公豬、精液必須無PCV2感染。

改進飼養管理，減少應激，合理配制日糧。注意通風與保暖，保持豬舍干燥，改善豬舍的空氣質量，降低氨氣濃度。去勢和注射須遵循良好的衛生和消毒習慣，PCV2是沒有囊膜的DNA病毒，和環病毒科的其他病毒一樣，對理化因素也有較強的抵抗能力，豬場應定期使用有效的消毒劑進行消毒。生產中應用3%的火堿溶液、0.3%的過氧乙酸溶液及0.5%的強力消毒靈和抗毒威消毒效果良好。

在豬場內禁養貓、犬，定期驅蚊蠅、投餌滅鼠。搞好種豬群的凈化，堅持自繁自養。定期監測，合理制訂免疫程序，避免過早或過多地對仔豬免疫，減少各種應激因素對仔豬的影響。

4 PCV2疫苗研究現狀

采用PCV2對豬群進行疫苗接種，是目前控制本病最有效的方法。

4.1 滅活苗

可用于經產母豬和初產母豬的滅活PCV2疫苗，現在已經在商業上應用，其中含有免疫佐劑，并且在一些歐洲國家獲得應用許可。該疫苗對PMWS的防控效果十分顯著。在國內已經有相應的進口和國產商品化PCV2滅活疫苗，且在實際應用中效果不錯。

4.2 弱毒苗

FenauxM等學者將分離到的一株PCV2在PK15上連續傳代數次，發現傳代至第120代的病毒對于豬的致病性明顯低于原分離株，表明體外傳代可增強PCV2在細胞中的增殖能力，弱化其致病性，這為研制PCV2疫苗提供了一個新的思路。

4.3 核酸疫苗

KamstrupS等克隆了PCV2的ORF2基因，并證實了此質粒能夠在體外(通過直接表達蛋白)以及體內(通過對小鼠用基因槍注射質粒，誘導小鼠免疫產生抗體)進行表達。免疫試驗結果表明，所構建的核酸疫苗均能誘導小鼠產生一定的體液免疫和細胞免疫反應。

4.4 亞單位疫苗

ZhouJY等首次在大腸埃希菌中對缺失了核定位信號序列(NLS)的PCV2Cap蛋白(dCap)與谷胱甘肽S轉移酶(GST)進行了融合表達，獲得了rGSTdCap蛋白，用rdCap蛋白制備的單抗，可與感染PK15細胞的病毒粒子以及在PK15細胞中表達的Cap蛋白發生反應，同時表現對PCV2病毒粒子的中和活性。表明rGSTdCap蛋白可以作為潛在的疫苗抗原和血清學診斷試劑。

4.5 嵌合疫苗

FenauxM等應用基因工程方法，構建了PCV1和PCV2相互嵌合的感染性克隆，對其免疫原性和致病性進行了研究，發現將PCV2的ORF2基因克隆進PCV1基因組中，對豬的致病性小于PCV2基因組，并可誘導機體產生PCV2核衣殼蛋白抗體，但是對豬的免疫反應性很弱。隨后的試驗表明，該減毒的PCV12嵌合感染性克隆可誘導機體產生免疫保護，抵抗PCV2野毒株的攻擊。用PCV12免疫后，攻毒豬的病毒血癥發生率、淋巴結腫大、淋巴結中PCV2基因組拷貝量、PCV2抗原量、淋巴組織的病變等方面均顯著低于非免疫豬，表明減毒的PCV12嵌合子可誘導機體產生針對PCV2的保護性免疫反應，有望作為疫苗使用。

4.6 活載體疫苗

JuC等用減毒的偽狂犬病病毒(PRV)作為活病毒載體，構建了表達PCV2ORF1ORF2的重組病毒PRV-PCV2。試驗表明，PRV-PCV2可誘導小鼠和豬產生強烈的抗PCV2和PRV抗體反應，在小鼠中產生針對PRV的免疫保護，可抵抗致死量的PRVEa株的攻擊，表明PRVPCV2可用于抵抗PCV2和PRV感染。WangXW等用表達PCV2 ORF2的重組腺病毒免疫小鼠，結果表明，所構建的重組腺病毒能夠表達ORF2蛋白，能夠在小鼠體內誘導抗PCV2免疫反應，對有效預防PCV2相關疾病的感染，重組腺病毒可能是一個比較理想的載體。