基于ZnS量子點熒光淬滅恢復方法測定還原型谷胱甘肽

摘要：水相中合成了3巰基丙酸保護的非重金屬ZnS量子點。根據Ni2+存在的情況下，ZnS量子點熒光強度的恢復程度與

谷胱甘肽濃度成正比的現象，建立了基于ZnS量子點熒光淬滅恢復測定谷胱甘肽的新方法。考察了溶液pH值以及Ni2+濃

度對檢測體系的影響。在pH 8.5，Ni2+ 60 μmol/L條件下，谷胱甘肽在0～600 μmol/L 濃度范圍內與量子點熒光恢復程度呈

良好的線性關系，檢出限為3.3 μmol/L。本方法可用于實際樣品中谷胱甘肽的檢測，回收率為94.0%～102.0%。

關鍵詞：ZnS；量子點；谷胱甘肽

1引言

還原型谷胱甘肽（GSH）是一種特殊的氨基酸衍生物[1]，占谷胱甘肽總含量的99.5%，在氨基酸轉運，蛋白、核酸合成等方面發揮著巨大作用，建立準確快速測定GSH的方法能為臨床提供很多有用信息。通常用于檢測GSH的方法有高相液相色譜法[2]、酶法[3]、電化學方法[4]等。這些方法各有優點，但存在操作繁瑣，儀器設備昂貴等不足。熒光傳感器因其靈敏度高，方便快捷，經濟，在諸多方法中具有明顯的優勢。

相比于傳統的熒光有機染料，量子點（QDs）具有寬激發光譜、窄發射光譜、高熒光量子產率和壽命長等優點，是一種理想的分析探針[5～7]。近年來，基于QDs熒光淬滅恢復現象建立的分析方法[8～10]多見報道。但是大多數工作所用的QDs都含有有毒重金屬元素Cd、Hg、Pb等[11，12]，生物相容性是這種納米材料臨床應用的瓶頸。金納米團簇和碳QDs是兩種新型的QDs[13，14]，但碳QDs的制備條件比較復雜，金納米團簇只有在低于一定尺徑時才具有熒光性能。ZnS是典型的半導體發光材料，與其它ⅡⅥ簇（如CdSe， CdTe， CdS等）的半導體QDs相比，ZnS QDs的低毒性使其更加適用于生物體系。本研究以3巰基丙酸為保護劑，在水相中合成了水溶性好、低毒穩定

的ZnS QDs。本研究表明，利用Ni2+可以調控ZnS QDs的表面性質，降低其熒光強度；當體系中加入GSH后，QDs熒光恢復，且恢復程度與GSH濃度相關，從而實現對GSH的測定。本方法操作簡單，靈敏度高，成本低，可用于實際樣品中GSH的測定。測定原理如圖1所示。

2.2.2熒光測定 向一系列5 mL比色管中依次加入0.5 mL ZnS QDs溶液，不同濃度的Ni2+，用PBS緩沖溶液定容，反應5 min后檢測熒光強度。為檢測GSH濃度，向一系列5 mL比色管中依次加入0.5 mL ZnS QDs，一定濃度的Ni2+，以PBS定容后，向上述混合液中加入不同濃度的GSH， 反應5 min后檢測熒光強度。熒光測定選定激發波長305 nm，激發狹縫寬度5 nm，發射狹縫寬度10 nm。