輸血前交叉配血不合原因分析及處理

胡飄萍，李松，楊麗云，鄒娟，辛建英，楊鵑

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科，江西南昌330006)

輸血前交叉配血不合原因分析及處理

胡飄萍，李松，楊麗云，鄒娟，辛建英，楊鵑

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科，江西南昌330006)

抗體篩查輸血安全交叉配血自身抗體

輸血是一項(xiàng)不可替代的臨床治療手段。隨著醫(yī)療水平的發(fā)展，臨床用血數(shù)量逐年增加，輸血安全成為日益關(guān)注的問(wèn)題。交叉配血是在血型鑒定的基礎(chǔ)上，體外模擬血液相容性實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)供血者和受血者的紅細(xì)胞和血清間是否存在抗原抗體反應(yīng)，是保證臨床用血安全的前提[1，2]。實(shí)際工作中，往往會(huì)發(fā)生交叉配血不相合的情況，即患者(供血者)血清可凝集供血者(患者)紅細(xì)胞。本文回顧性分析了我院2011年8月至2012年7月期間工作中遇見(jiàn)的交叉配血不合的病例，總結(jié)引起交叉配血不合的各種原因。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象2011年8月至2012年7月的南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血患者共計(jì)24913例次，其中交叉配血不合57例。

1.2 試劑及標(biāo)本微柱凝膠卡、不規(guī)則抗體篩選卡(長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn))。單克隆抗-A和抗-B、抗體篩選細(xì)胞、抗體鑒定細(xì)胞、抗人球蛋白試劑(由上海血液生物醫(yī)藥公司提供)。患者的不抗凝血用以做抗體篩查和抗體鑒定、交叉配血用EDTA-Na2抗凝血標(biāo)本。

1.3 儀器微柱凝膠卡專用離心機(jī)和孵育器由長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，BaSo離心機(jī)(型號(hào)2005-1)由臺(tái)灣貝索公司生產(chǎn)。

1.4 方法紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩選、交叉配血、抗人球蛋白試驗(yàn)均按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[3]執(zhí)行操作步驟，交叉配血同時(shí)采用鹽水介質(zhì)配血法和微柱凝膠卡配血法。微柱凝膠法交叉配血試驗(yàn)嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)操作。

2 結(jié)果

57例交叉配血不合標(biāo)本中，有男性患者23例，女性患者34例。23例患者檢測(cè)出不規(guī)則抗體，Rh血型系統(tǒng)的抗體最多，有16例(16/23，69.57%，抗-E抗體10例、抗-c抗體3例、抗-cE抗體3例)；MNS血型系統(tǒng)抗體5例(5/23 21.34%，抗-M 2例和抗-s 3例)；抗-K和抗-Lea各1例。29例患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)(DAT)陽(yáng)性，其中11例患者僅DAT陽(yáng)性，6例患者伴有不規(guī)則抗體(3例患者同時(shí)有不規(guī)則抗體和溫自身抗體)，6例患者體內(nèi)還同時(shí)存在冷凝集素，6例患者產(chǎn)生了溫自身抗體。9例僅存在冷凝集素影響交叉配血結(jié)果。

1例患者患慢性粒細(xì)胞性白血病，血液中白細(xì)胞增高，導(dǎo)致微柱凝膠交叉配血試驗(yàn)主側(cè)假陽(yáng)性；1例獻(xiàn)血員紅細(xì)胞直接抗人球蛋白陽(yáng)性，與患者血清交叉配血時(shí)發(fā)生凝集。

3 討論

從本批的標(biāo)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，交叉配血出現(xiàn)凝集，主要原因是受血者自身的紅細(xì)胞被致敏，其次是受血者存在不規(guī)則抗體、受血者含冷凝集素或自身抗體。

患者體內(nèi)存在的不規(guī)則抗體針對(duì)供血者的紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，交叉配血時(shí)主側(cè)凝集。在23例不規(guī)則抗體中，血型抗體所占比例與血型系統(tǒng)頻率基本一致，Rh血型系統(tǒng)的抗體最多，有16例(16/23 69.57%)，MNS血型系統(tǒng)抗體共5例(5/23 21.34%)，與吳勇[4]等所報(bào)道的不規(guī)則抗體的頻率分布有差異，可能原因是取材范圍不同，本文中僅包含出現(xiàn)交叉配血不和的標(biāo)本，而不是針對(duì)所有的就醫(yī)患者。發(fā)血時(shí)選擇不含與抗體相對(duì)應(yīng)的抗原血液給患者輸注。

受者紅細(xì)胞結(jié)合了不完全抗體時(shí)，直接抗人球蛋白結(jié)果呈陽(yáng)性。交叉配血時(shí)，受者紅細(xì)胞與供血者血漿反應(yīng)，非特異性地將血漿中的蛋白質(zhì)(免疫球蛋白、補(bǔ)體)吸附到表面而致敏，經(jīng)微柱凝膠卡離心時(shí)，被吸附物質(zhì)與柱中含有的抗人球蛋白試劑結(jié)合，發(fā)生凝集反應(yīng)。直接抗人球蛋白陽(yáng)性伴有自身抗體或不規(guī)則抗體時(shí)，可表現(xiàn)為主側(cè)、次側(cè)均出現(xiàn)凝集反應(yīng)。分別對(duì)受血者紅細(xì)胞和血清處理以去除自身抗體對(duì)交叉配血的干擾：(1)受血者紅細(xì)胞做放散試驗(yàn)，放散掉紅細(xì)胞表面吸附的自身抗體；(2)用受血者自身紅細(xì)胞進(jìn)行吸收試驗(yàn)，去除血清中的自身抗體。本文中有11例僅有直接抗人球蛋白陽(yáng)性，6例直抗陽(yáng)性伴有自身抗體，3例直抗陽(yáng)性患者同時(shí)伴有自身抗體和不規(guī)則抗體。由于直接抗人球蛋白陽(yáng)性的患者多為免疫性溶血性貧血患者，因此，建議輸注洗滌紅細(xì)胞以緩解臨床癥狀。

冷凝集是由冷凝集素在低溫時(shí)與紅細(xì)胞膜相關(guān)抗原結(jié)合，而導(dǎo)致的紅細(xì)胞凝集。溫度較低時(shí)，紅細(xì)胞表面膜物質(zhì)的構(gòu)型發(fā)生改變，顯露某些抗原決定簇，與相應(yīng)的冷凝集素相結(jié)合，而隨著溫度的升高，紅細(xì)胞膜物質(zhì)的構(gòu)型恢復(fù)，阻礙了冷凝集素與抗原決定簇的結(jié)合，凝集逐漸消失。患者血清有自身冷抗體時(shí)，采用的處理方法是將患者紅細(xì)胞經(jīng)37℃生理鹽水洗滌3～4次，患者血清用標(biāo)準(zhǔn)O型紅細(xì)胞4℃進(jìn)行冷抗體吸收，將處理之后的紅細(xì)胞和血清再進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)，可排除冷凝集的干擾。9例僅有冷凝集素的患者，經(jīng)上述處理后，鹽水法和微柱凝膠配血法均未見(jiàn)凝集。6例伴有直接抗人球蛋白陽(yáng)性的患者給予洗滌紅細(xì)胞輸注。血液發(fā)放后，囑咐臨床輸注之前，將血液制品在室溫放置復(fù)溫，緩慢輸注，輸血過(guò)程密切觀察。

1例新生兒患者標(biāo)本交叉配血主側(cè)陽(yáng)性，經(jīng)再次確認(rèn)血型，排除患者存在自身抗體或冷凝集，證實(shí)配血不合原因是獻(xiàn)血員紅細(xì)胞直接抗人球蛋白陽(yáng)性。

1例慢性粒細(xì)胞性白血病患者，血液中白細(xì)胞63×109/L，紅細(xì)胞1.21×1012/L，交叉配血前患者EDTA抗凝血液經(jīng)1300 g離心1min處理，交叉配血時(shí)鹽水法相合，微柱凝膠交叉配血試驗(yàn)主側(cè)凝集。由于血液中白細(xì)胞增高，經(jīng)常規(guī)離心后，血漿中混有大量的白細(xì)胞。由于白細(xì)胞平均體積大于紅細(xì)胞并且其變形能力僅為紅細(xì)胞的1/1000，離心時(shí)，交叉配血反應(yīng)體系中的細(xì)胞在微柱凝膠中下移，白細(xì)胞不能全部通過(guò)微孔進(jìn)而將微孔堵塞導(dǎo)致游離的紅細(xì)胞不能順利通過(guò)微孔到達(dá)底部，在反應(yīng)單元中出現(xiàn)假陽(yáng)性[5]。僅有主側(cè)出現(xiàn)假凝集而次側(cè)沒(méi)有出現(xiàn)的可能原因是混入紅細(xì)胞懸液的白細(xì)胞被稀釋(紅細(xì)胞懸液濃度0.5%～0.8%)，數(shù)量不足以影響結(jié)果。將患者EDTA抗凝血液經(jīng)1770 g離心5 min再次處理后，血漿中的白細(xì)胞被沉淀，微柱凝膠交叉配血法相合。

在發(fā)血過(guò)程中，交叉配血可因多種因素而不合，發(fā)生不合時(shí)，應(yīng)積極從各方面查找原因，并排除可能對(duì)配血結(jié)果產(chǎn)生干擾的因素，及時(shí)為臨床提供安全的血液治療。有輸血史或妊娠史的患者術(shù)前應(yīng)做血清抗體篩查，存在不規(guī)則抗體者預(yù)先配血以減少術(shù)中的取血時(shí)間。

[1]何子毅,劉赴平,車嘉琳.電子交叉配血的現(xiàn)狀和展望[J].臨床輸血與檢驗(yàn),2009,11(4):380-381.

[2]胡飄萍,交叉配血不合原因分析及處理[J],實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué), 2013,31(1):59-60.

[3]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006,253-266.

[4]吳勇,吳遠(yuǎn)軍,陳寶嬋.紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體的檢測(cè)和分析[J].臨床輸血與檢驗(yàn),2010,10(14):343-346.

[5]夏兵,戴書(shū)萍,裴寶芹.慢性粒細(xì)胞白血病致微柱凝膠法交叉配血假陽(yáng)性1例[J].中國(guó)輸血雜志,2011,24(2):152-153.

R457.1

B

1674-1129(2013)03-0280-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.03.034

江西省衛(wèi)生廳科技計(jì)劃(編號(hào)20133048)