類風濕關節炎滑液MMPs表達與血清免疫球蛋白的相關性研究

周 濤 (湖北省武漢市普仁醫院風濕免疫科，湖北 武漢 430080)

類風濕關節炎(RA)的病因和發病機制目前尚不明確，RA是一種免疫介導以滑膜炎為病理特征的自身免疫病，關節破壞是RA最主要的表現，體液免疫參與RA的發病［1］。近些年研究表明，基質金屬蛋白酶(MMPs)可降解軟骨和骨質，在關節的破壞中占有極重要地位。筆者通過檢測RA患者和健康者血清免疫球蛋白及滑膜液MMP－1、MMP－3水平，探討體液免疫與MMPs在RA發病過程中的變化和兩者之間的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料:42例RA患者為2010年10月～2012年5月在武漢市普仁醫院風濕免疫科住院患者，男13例，女29例，年齡27～62歲，平均(47.91±13.79)歲;平均病程(5.3± 3.28)年;正常對照組27例，男10例，女17例，平均(45.64± 11.27)歲。兩組年齡、性別、職業構成等方面比較，差異無統計學意義(P＞0.05)。RA患者均符合美國風濕病學會2010年(ACR)修訂的RA診斷標準，排除其他風濕性疾病、感染、腫瘤、嚴重肝腎損害及心腦血管疾病等;根據RA疾病活動度積分(DAS28)將RA患者分為兩組:DAS28評分≥3.2為RA活動組(男7例，女15例)，DAS28評分≤2.6為RA緩解組(男6例，女14例)，兩組一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 取樣:①空腹取肘中靜脈血3 ml，3 000 r/min，離心15 min，分離血清，用1.5 ml Eppendorf管分裝，置－20℃保存待測。②抽取膝關節滑液1～2 ml，抽取前做關節屈伸運動，保障關節內滑液混合均勻，并無血液混入。

1.2.2 檢測:采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測滑液組織中MMP－1及MMP－3的表達(MMP－1，MMP－3檢測試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司);采用免疫散射比濁法測定滑膜液中免疫球蛋白IgG及IgM水平，兔抗人IgG、IgM血清由上海長征醫學科學有限公司提供.采用日立7600～020全自動生化分析儀進行檢測。

1.3 統計學方法:所有數據用SPSS17.0軟件處理，試驗數據以均數±標準差(±s)表示，采用ANOVA進行組間差異比較，MMPs與免疫球蛋白的相關性采用線性回歸分析，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 滑膜液中MMP－1及MMP－3的表達情況:MMP－1及MMP－3在RA活動組中的表達均顯著高于RA緩解組和正常對照組(P＜0.05)。詳見表1。

表1 滑膜液中MMP－1及MMP－3的表達情況比較(±s)

表1 滑膜液中MMP－1及MMP－3的表達情況比較(±s)

注:與正常對照組比較，①P＜0.05;RA活動組與緩解組比較，②P＜0.05

組別 例數 MMP－1(ng/ml) MMP－3(ng/ml) RA活動組 22 179.54±53.82② 243.79±78.56①②RA緩解組 20 118.41±35.74① 165.34±50.27①正常對照組27 47.6±25.93 76.61±36.50

2.2 血清中IgG及IgM表達情況:IgG及IgM在RA活動組中的表達均顯著高于RA緩解組(P＜0.05)。詳見表2。

表2 血清中IgG及IgM表達情況(±s)

表2 血清中IgG及IgM表達情況(±s)

注:與正常對照組比較，①②P＜0.05;RA活動組與緩解組比較，③P＜0.05

組別 例數 IgG(μg/ml) IgM(μg/ml) RA活動組 22 19.47±3.72①③ 6.18±0.46①③RA緩解組 20 14.62±2.59② 2.75±0.38正常對照組27 10.71±5.22 2.23±3.15

2.3 RA患者滑膜液中MMP－1及MMP－3與血清中IgG及IgM的相關性:RA患者滑膜液中MMP－1、MMP－3與血清中IgG及IgM均呈現直線正相關關系(P＜0.05)。詳見表3。

表3 RA患者滑膜液中MMP－1及MMP－3與血清中IgG及IgM的相關性

3 討論

目前RA被認為是一種病因不明的、以反復發作滑膜炎為主要病理表現的自身免疫病。近些年來研究表明，體液免疫在RA發病過程中發揮著重要作用，免疫球蛋白是一組具有抗體活性的蛋白質，血清IgG、IgM水平可作為RA病情、療效評價的客觀指標;本試驗研究結果顯示，RA患者隨著病情的緩解，血清IgG、IgM的表達水平顯著下降，與上述結論一致。RA致病因子通過活化Th細胞，激活B細胞分泌大量免疫球蛋白，形成大量免疫復合物，沉積于關節滑膜處，誘導滑膜炎性反應的產生;另外活化的Th細胞分泌多種細胞因子及炎性反應介質，亦會進一步加劇免疫聯級反應，加重關節滑膜組織損傷［2］。影像學研究顯示，RA患者在發病早期就會表現出顯著的軟骨侵蝕及骨髓內水腫，隨病情發展軟骨及骨質破壞進一步加劇，這與RA患者滑膜液中大量表達基質金屬蛋白酶(MMPs)有著密切聯系;研究發現，MMPs的異常表達可降解關節軟骨及骨質，從而造成關節破壞，參與RA發病［3］; MMP－3被認為是導致軟骨降解的最重要的蛋白酶，不僅能直接降解軟骨和骨質對RA患者關節產生破壞，還能激活間質膠原酶MMP－1發揮生物學效應破壞關節，而蛋白水解酶的釋放和其后在基質中的活化破壞了基質屏障，導致膠原崩解和蛋白多糖的分裂，從而導致軟骨細胞生存的微環境惡化。釋放的炎性細胞因子參加關節炎性反應，軟骨細胞無法從基質中獲得充分的營養而致功能受損，形成基質－軟骨細胞之間惡性循環，導致關節軟骨結構可溶性增加。同時血管增生形成血管翳－軟骨結合區纖維增生，造成關節變形畸形強直致殘［4］。本文試驗結果顯示，RA患者滑膜液MMP－1、MMP－3均顯著升高，當RA病情緩解時，MMP－1、MMP－3表達亦降低，這與文獻報道一致。本試驗對RA患者血清免疫球蛋白IgG、IgM與滑膜液MMP－1、MMP－3的相關性分析表明，MMPs與免疫球蛋白呈直線相關，提示RA致病過程中免疫球蛋白的異常表達會促進局部MMP－1、MMP－3水平的上調，這可能是加劇軟骨和骨質破壞的重要過程。筆者認為，抑制RA體液免疫反應，下調MMPs表達可能是緩解RA骨質破壞的有效治療方法。

［1］ 潘繼承，倪黎剛，朱 建.聯合檢測RA患者血清IG、C、ESR、RF和CRP的臨床意義［J］.江蘇醫藥，2011，7(5):598.

［2］ 徐 雯，陶 娟.血清免疫球蛋白、補體水平與初診類風濕性關節炎活動度的相關性［J］.臨床醫藥實踐雜志，2008，17(10):815.

［3］ 盧 潔，魏國忠，戴利亞.IL－17、MMP－3在類風濕關節炎患者滑膜液及血漿中的表達及意義［J］.放射免疫學雜志，2011，24(2):205.

［4］ 周沈賢，金忠棋，陳 健.基質金屬蛋白酶及活性酶在類風濕關節炎上表達研究［J］.浙江創傷外科，2006，11(1):12.