D－二聚體兩種檢測方法的比較

馮 金，孟慶艷，胡宏波 (廣西柳州市柳鐵中心醫院檢驗科，廣西 柳州 545007)

D－二聚體(D－dimer，D－D)是交聯纖維蛋白在纖溶酶水解后所形成的特異性降解產物，是體內高凝狀態和繼發纖溶亢進的分子標志物。隨著研究的進展，D－二聚體已經逐漸被認為是確診深靜脈血栓(DVT)、肺栓塞(PE)、彌漫性血管內凝血(DIC)等疾病的關鍵指標［1－3］;此外，D二聚體還被認為是評估惡性腫瘤、心腦血管疾病和肝臟疾病等多種疾病的病情，療效及預后的可靠指標［4－6］。D－二聚體的測定應用于臨床，對多種疾病的診斷、療效觀察、預后判斷具有廣泛的應用價值。目前檢測的方法很多，主要有膠乳凝集法、免疫比濁法、酶聯免疫吸附法和免疫滲濾法等。近年來，筆者對免疫比濁法和膠乳凝集法兩種D－二聚體的檢測方法進行了比較，現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:標本均來自2012年在我院住院患者和健康體檢者，其中患病組150例，男89例，女61例，平均年齡(57±10.9)歲，為在我院神經內科住院的患者。健康體檢組50例，其中男35例，女15例，平均年齡(55±6.24)歲，均證實無創傷、血栓性疾病、肝病、無心腦血管疾病和腫瘤等。

1.2 方法:真空采血管(含枸櫞酸鈉溶液抗凝劑)采集患者清晨空腹靜脈血。3 000 r/min離心15 min，分離乏血小板血漿待測。并在2 h內完成檢測。免疫比濁法測定D－二聚體含量時采用SYSMEX CA7000全自動凝血儀，所使用試劑質控品和標準品均為siemens Dade(德靈)血凝試劑。嚴格按照儀器操作規程進行操作，測定的正常參考值為0～500 mg/L，超出500 mg/L判定為陽性結果。膠乳凝集法測定D－二聚體含量時所采用的試劑購自天津美德太平洋，嚴格按照膠乳凝集法操作手冊中操作步驟進行，測定的正常參考結果為陰性，即無肉眼可見的顆粒形成。

1.3 統計學分析;采用SPSS13.0統計分析軟件分析，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.01為差異有統計學意義。

2 結果

免疫比濁法和膠乳凝集法分別檢測患者及健康體檢者D－二聚體檢出率，結果如表1和表2所示，健康體檢者兩種方法檢測均未出現陽性結果，在150例患者中，免疫比濁法所檢測的陽性率為84%，顯著高于膠乳凝集法的陽性檢測率(34.6%)，差異具有統計學意義(P＜0.01)。

表1 健康體檢者血漿D－二聚體兩種方法檢測陰性率和陽性率比較(n=50)

表2 患者血漿D－二聚體兩種方法檢測陰性率和陽性率比較(n= 150)

3 討論

D－二聚體的檢測在國內已開展多年，為血栓性疾病的診斷治療、纖溶活性的鑒別以及腫瘤患者的治療、觀察、預后等都提供了重要的參考價值［7－8］。

D－二聚體的檢測方法可分為半定量和定量。半定量檢測方法中比較常用的方法是乳膠凝集法，其原理是被檢血漿中D－二聚體與包被在乳膠顆粒上的單抗相作用，產生絮狀沉淀反應。乳膠凝集法由于其簡單的操作方法，不需要復雜的儀器，適用于床邊檢測(POCT)，適合臨床上個體檢測;此外，由于乳膠凝集法快速、經濟，該方法在各個基層醫院中得到廣泛推廣。免疫比濁法是定量方法中較常用的方法之一。其工作原理是:標本中D－二聚體與包被有高特異性D－二聚體單克隆抗體的乳膠顆粒結合后，乳膠顆粒發生凝集，在405 nm波長下檢測透射光強度的變化，凝集程度與標本中D－二聚體的含量成正比。免疫比濁法由于其準確、快速、簡便的特點，尤其通常是由自動化儀器完成檢測，具有更高的靈敏度與精密度，避免了人工加樣的偶然誤差，在臨床上也得到廣泛應用。

根據上述試驗結果，D－二聚體的兩種檢測方法——乳膠凝集法和免疫比濁法均有良好的陰性預期值，但兩者的敏感性存在很大差異。經χ2檢驗分析比較，兩種檢測方法的結果，結果發現免疫比濁法的敏感性顯著高于乳膠凝集法。在本研究中，筆者發現，只有在含量＞5 000 mg/L的標本(采用免疫比濁法檢測)，乳膠凝集法才呈現陽性結果，因此，乳膠凝集法的陽性預期值不佳。反觀使用SYSMEX CA7000免疫比濁法檢測D－二聚體，該法能夠對標本中的D－二聚體進行準確快速的定量，具有良好的陰性預期值和陽性預期值。此外，在陽性結果的判斷上，乳膠凝集法往往存在主觀差異，且無法給出具體的數值，因此乳膠凝集法檢測標本中的D－二聚體雖然對排除和診斷DIC、深靜脈血栓、肺栓塞有一定幫助，但無法給臨床醫生提供治療效果的依據及病情的監測。而免疫比濁法使用方便、操作簡單，可適用于各種生化分析儀，并可實現定量測定，為疾病的治療、觀察、預后等都提供了重要的參考價值。

綜上所述，筆者認為，免疫比濁法準確、快速、簡便，具有較高的靈敏度，并可實現定量測定，滿足了臨床急診需要，值得在各大中型醫院中推廣使用。

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