馬氏珠母貝糖胺聚糖毒理學安全評價

范秀萍，吳紅棉*，葉慶俊，鐘 敏，胡雪瓊，雷曉凌

(廣東海洋大學食品科技學院，廣東 湛江 524006)

馬氏珠母貝糖胺聚糖毒理學安全評價

范秀萍，吳紅棉*，葉慶俊，鐘 敏，胡雪瓊，雷曉凌

(廣東海洋大學食品科技學院，廣東 湛江 524006)

目的：研究珠母貝糖胺聚糖作為保健食品使用的毒理學安全性。方法：利用大鼠急性毒性實驗、小鼠骨髓細胞微核實驗、小鼠精子畸變實驗、Ames實驗和大鼠30d喂養實驗進行毒理學研究與評價。結果：急性毒性實驗結果表明珠母貝糖胺聚糖對雌、雄大鼠急性經口最大耐受量(MTD)均大于20.0g/kg，其劑量大于人體推薦量的300倍，說明受試物屬于無毒級物質。小鼠骨髓細胞微核實驗、小鼠精子畸變實驗、Ames實驗3項遺傳毒性實驗的結果皆為陰性，未顯示出致突變性。30d喂養實驗表明，珠母貝糖胺聚糖高、中、低3個劑量組(分別為2.5、1.25、0.625g/kg)動物的身體、臟器的生長發育及血液生化指標等均無明顯不良影響。結論：珠母貝糖胺聚糖具有較好的安全性，可作為保健食品使用。

珠母貝糖胺聚糖；急性毒性；遺傳毒性； 30d喂養實驗

馬氏珠母貝(Pinctada martensii Dunder)是我國南海珠母貝的主要貝種，在廣東、廣西部分地區養殖量極大。珠母貝全臟器俗稱珍珠貝肉，價格低廉(約3～4元/kg)，在珍珠養殖地區如廣東省的雷州市及徐聞縣、廣西壯族自治區的北海市及欽州市、海南省的部分地區，當地珠農及居民常以珠母貝全臟器用作食療食品，北部灣沿海有服用珍珠貝肉治療乙肝的傳統方法，也有食用珍珠貝肉湯以退發燒的，效果甚佳[1]。

珠母貝糖胺聚糖(glycosaminoglycan from Pinctada martensii，CPG)是從馬氏珠母貝全臟器中分離提取出來的一種酸性多糖，糖胺聚糖含量為33%，結構與硫酸軟骨素類似，具有顯著的免疫增強作用與抗腫瘤作用[2-4]。本研究依據《保健食品檢驗與評價技術規范》[5]對其進行毒理學安全性評價，旨在為珠母貝糖胺聚糖用作保健食品及藥品提供科學的參考。

1 材料與方法

1.1 材料、實驗動物與菌株

珠母貝糖胺聚糖，灰白色粉末，糖胺聚糖含量為33%，由本實驗室提取制備。

SPF級KM小鼠(合格證號：2007A006)、SPF級SD大鼠(合格證號：SCXK(粵)2007A015)，均由廣東省醫學實驗動物中心提供。實驗動物室溫度：22～25℃，相對濕度：55%～70%。

鼠傷寒沙門氏菌突變型菌株(Salmonella typhimurium) TA97、TA98、TA100和TA102，來源于華中科技大學同濟醫學院武漢環境醫學研究所。

1.2 試劑與儀器

敵克松(DAPA)、2-乙酰氨基芴(2-AAF)、大鼠肝微粒體酶復合物(S9) 廣州市疾病預防控制中心；伊紅 廣州市中南化工有限公司；丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、總蛋白(TP)、尿素氮(BUN)、總膽固醇試劑(T-CHO)、天冬氨酸轉氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、肌酐(Crea)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU) 上海復旦張江生物醫藥股份有限公司；血常規稀釋液(DH-640：050929)、血常規清洗液(DH-520：050817)、血常規溶血劑(DH-680：20050507) 日本光電公司。

全自動血液生化分析儀 意大利Echo公司；MEK-7222K全自動血球計數儀 日本光電公司；TS-12N生物組織全自動脫水機、BM-VII生物組織包埋機及冷凍機、CS-VI攤片烤片機、RS-18生物組織全自動染色機 湖北孝感醫用儀器有限公司；RM2135輪轉切片機 德國Leica公司。

1.3 方法

1.3.1 急性毒性實驗

選取18～22g健康KM小鼠20只，雌雄各半。根據最大耐受劑量法，珠母貝糖胺聚糖粉末質量濃度為0.25g/mL。灌胃前24h禁食，于次日分4次灌胃(每次灌胃量為20mL/kg)，灌胃總量達20g/kg，連續觀察14d，記錄中毒癥狀及死亡情況。1.3.2 遺傳毒性實驗

1.3.2.1 Ames實驗

選用經鑒定符合要求的鼠傷寒沙門氏組氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102共4株實驗菌株，采用平板摻入法，分加與不加S9混合液兩種。受試物加熱滅菌后，共設4個劑量組，分別為每皿1.25、2.50、5.00、10.00mg/mL。同時設空白對照、陽性對照(DAPA、2-AAF)，每組均做3個平行皿。在37℃條件下培養48h，計數每皿回變菌落數，重復實驗1次，求出每組平均菌落數。當受試物回變菌落數超過自發回變的2倍以上并有劑量-反應關系時即可判定為陽性。

1.3.2.2 小鼠精子畸形實驗

SPF級KM小鼠(25～30g)50只，隨機分為5組。對照組給予相同體積蒸餾水；陽性對照組為環磷酰胺(CY，50mg/kg)；CPG高、中、低劑量組分別為2.5、1.25、0.625g/kg(為人可能攝入量的100、50、25倍)。各組均按20mL/kg經口灌胃，每日1次，連續5d。首次給藥35d后頸椎脫臼法處死小鼠，制備精子標本， 1%伊紅染色。高倍鏡下觀察，每只動物計數1000個精子，記錄畸形精子數，計算精子畸變率()。

1.3.2.3 小鼠骨髓紅細胞微核實驗

SPF級KM小鼠(25～30g)50只，隨機分為5組。對照組給予相同體積蒸餾水；陽性對照組為環磷酰胺(50mg/kg)；CPG高、中、低劑量組分別為2.5、1.25、0.625g/kg。采用2次經口給受試物，中間間隔24h，于第2次給受試物6h后處死動物，取一側股骨制備骨髓涂片。Gimsa染色后鏡檢計數嗜多染紅細胞中的微核發生率()。

1.3.3 大鼠30d喂養實驗

選取SPF級SD大鼠(100～130g)88只，雌雄各半，隨機分為4組，每組22只。對照組給予蒸餾水，CPG高、中、低劑量組分別為2.5、1.25、0.625g/kg，各組均按10mL/kg經口灌胃，每日定時灌胃1次，連續30d。動物自由進食和飲水，每天觀察并記錄動物的一般表現，每周稱體質量及進食量，最后計算食物利用率。

實驗結束時，摘眼球取血，用全自動生化分析儀測定血清生化指標。用全自動血細胞計數儀測定血液學指標。然后將實驗動物脫頸椎處死，進行大體解剖，觀察有無異常，取肝、腎、脾、睪丸(卵巢)用福爾馬林固定，進行組織病理學檢查[5-6]。

1.4 數據處理

2 結果與分析

2.1 急性毒性實驗

在14d的觀察期內，動物的活動及體質量增長正常，無一動物死亡；外觀、體征、行為活動、精神狀態、飲食、大小便等均未有異常改變；口、眼、鼻等處也無異常分泌物。經解剖小鼠，肉眼觀察其心、肝、脾、肺、腎、腸等臟器，與正常小鼠比較，皆未發現明顯病變和差異。表明該受試物對雌、雄小鼠經口最大可耐受劑量(MTD)≥20g/kg。根據《保健食品檢驗與評價技術規范》附錄D急性毒性劑量分級表的規定，珠母貝CPG屬無毒級，可用于食品生產。

2.2 遺傳毒性實驗

2.2.1 鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶實驗(Ames實驗)結果

由表1可知，CPG 4個劑量組在添加活化系統(+S9)和未添加(—S9)的情況下，實驗菌株TA97、TA98、TA100和TA102的回變菌落數與陰性對照組近似，無倍量關系，CPG組間無劑量-反應關系；而陽性對照組的回變數明顯高于陰性對照組，且符合標準誘變劑的測試結果。因此，依據Ames實驗的結果判定原則可知：陽性對照物致使鼠傷寒沙門氏菌的突變型發生回復突變；而CPG未顯示明顯的致突變性。且重復實驗結果一致，表明CPG沒有明顯的致突變性。

2.2.2 小鼠精子畸形實驗由表2可知，與對照組相比，CY組的畸變率有極顯著性升高(P＜0.01)；CPG劑量組中，0.625g/kg劑量組與對照組相比畸變率有顯著性降低(P＜0.05)；其他兩組無顯著性差異(P＞0.05)。說明，CPG無致小鼠精子畸形作用。

表 1 Ames實驗結果(x±s，n=3)Table 1 Results of Ames test(x ±s，n=3)

表 2 珠母貝CPG對小鼠精子畸形的影響(x±s，n=10)Table 2 Effect of CPG on mouse sperm abnormality (x±s，n=10)

2.2.3 小鼠骨髓細胞微核實驗

表 3 珠母貝CPG對小鼠骨髓細胞微核的影響(±s，n=10)Table 3 Effect of CPG on micronucleus rate of mouse bone marrow polychromatic erythrocytes (±s，n=10)

表 3 珠母貝CPG對小鼠骨髓細胞微核的影響(±s，n=10)Table 3 Effect of CPG on micronucleus rate of mouse bone marrow polychromatic erythrocytes (±s，n=10)

性別組別劑量/(g/kg)微核率/PCE/RBC雄對照組0.7f1.01.12 CY組0.0522.4f2.8**0.91 CPG劑量組0.6251.3f1.51.13 1.251.1f1.11.11 2.50.5f0.81.11雌對照組0.3f0.51.10 CY組0.0525.7f2.2**0.87 CPG劑量組0.6251.0f0.91.12 1.250.7f0.51.15 2.50.5f0.51.13

由表3可知，在兩性小鼠中CPG各劑量組的嗜多染紅細胞數/成熟紅細胞(PCE/RBC)與相應對照組相比無顯著性差異；而且也未少于對照組的20%，表明CPG未對骨髓細胞分裂產生抑制。與對照組相比，兩性小鼠的CY組微核率均有極顯著性差異(P＜0.01)，表明發生了突變；兩性小鼠的CPG各劑量組微核率均無顯著性變化(P＞0.05)，且無劑量-反應關系。結果表明，CPG對兩性小鼠骨髓嗜多染紅細胞的微核發生率無影響。

2.3 30d喂養實驗

2.3.1 一般狀況

珠母貝CPG連續喂養30d，SD大鼠外觀體征無異常改變，行為活動正常；實驗組和對照組動物毛色均有光澤且緊貼身體，口、眼、耳、鼻均無異常分泌物；呼吸規則，糞便成形無黏液，無稀爛。

表 4 珠母貝CPG 30d喂養SD大鼠體質量的影響(±s，n=11)Table 4 Effect of CPG on body weight of SD rats±s，n=11)

表 4 珠母貝CPG 30d喂養SD大鼠體質量的影響(±s，n=11)Table 4 Effect of CPG on body weight of SD rats±s，n=11)

體質量/g基礎值第1周第2周第3周第4周對照組125.5f8.5172.0f13.1244.5f17.4295.0f20.4337.9f23.3組別劑量/ (g/kg) 0.625125.6f7.8176.9f14.3244.1f16.7293.9f18.2336.8f20.1 1.25123.1f10.9168.9f10.9232.3f14.8282.5f15.6320.5f18.5 2.50126.3f9.5175.5f15.6240.7f23.6286.1f26.0328.9f29.4對照組114.2f8.7149.9f8.1199.2f11.8224.2f14.3237.5f16.7雄雌0.625113.1f7.1141.8f10.5191.2f8.6218.0f9.6233.3f11.5 1.25109.8f5.5145.7f7.3192.1f6.9215.3f13.8233.3f14.8 2.50111.0f7.1147.5f11.0190.2f13.2216.2f14.4237.4f16.6

由表4可知，連續喂養30d，各劑量組大鼠體質量呈正常增長，與對照組比較，無顯著性差異(P＞0.05)。由表5、6可知，各劑量組攝食量及食物利用率、飲水量與對照組比較均未見明顯異常。

表 5 珠母貝CPG 30d喂養對SD大鼠平均進食量的影響(±s，n=24)Table 5 Effect of CPG on average daily feed intake of SD rats (±s，n=24)

表 5 珠母貝CPG 30d喂養對SD大鼠平均進食量的影響(±s，n=24)Table 5 Effect of CPG on average daily feed intake of SD rats (±s，n=24)

組別劑量/ (g/kg)平均進食量/g第1天第8天第15天第22天第28天對照組22.9f2.927.2f7.531.2f9.128.2f9.729.7f10.2 CPG劑量組0.62522.8f2.223.3f7.830.0f8.226.4f5.226.0f6.7 1.2519.9f1.621.8f0.826.7f5.825.4f2.326.4f6.0 2.5021.8f2.622.6f2.427.4f5.327.5f5.425.4f6.1

表 6 珠母貝CPG 30d喂養對大鼠食物利用率的影響±s，n=11)Table 6 Effects of CPG on feed conversion ratio of male SD rats (±s，n=11)

表 6 珠母貝CPG 30d喂養對大鼠食物利用率的影響±s，n=11)Table 6 Effects of CPG on feed conversion ratio of male SD rats (±s，n=11)

食物利用率/(g/100g飼料)第1周第2周第3周第4周總利用率對照組27.2f8.436.4f9.024.0f5.217.6f3.526.3f7.8組別劑量/ ( g/kg) 0.62529.6f6.033.9f2.321.2f2.020.1f1.8*26.2f6.6 1.2531.2f6.138.2f3.424.4f2.719.6f3.828.3f8.1 2.5029.1f4.535.9f6.820.4f3.119.5f2.326.2f7.8對照組22.3f3.330.5f6.213.8f5.08.9f5.818.9f9.5雄雌0.62518.9f3.4*35.9f7.916.7f5.59.8f5.420.3f11.1 1.2526.8f3.9*30.8f3.915.2f6.510.8f5.320.9f9.5 2.5026.4f4.8*28.3f3.415.7f4.214.1f3.2*21.1f7.2

從表6可知，珠母貝CPG連續30d喂養雄性大鼠，低劑量組動物在第4周的食物利用率與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)；對雌性大鼠，低劑量組、中劑量組和高劑量組動物在第1周的食物利用率與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。高劑量組動物在第4周的食物利用率與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)，其余各劑量組動物在各周的食物利用率與對照組比較，無顯著性差異(P＞0.05)。低、中、高劑量組對雌雄小鼠在30d喂養期間的總食物利用率與對照組比較均無顯著性差異(P＞0.05)。

2.3.2 對大鼠血液血常規的影響

從表7可知，珠母貝CPG連續30d喂養雄性大鼠，中劑量組和高劑量組動物血清中的血紅蛋白(HGB)與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)，但在正常范圍值內，無病理學意義(HGB：120～175g/L)。其余各劑量組動物血清中的紅細胞(RBC)、血紅蛋白(HGB)、血小板(PLT)、白細胞(WBC)及分類與對照組比較，無顯著性差異(P＞0.05)。對雌性大鼠，各劑量組動物血清中的紅細胞(RBC)、血紅蛋白(HGB)、血小板(PLT)、白細胞(WBC)及分類與對照組比較，無顯著性差異(P＞0.05)。2.3.3 對大鼠血液生化的影響

CPG連續30d喂養雄性大鼠，低劑量組動物的葡萄糖(GLU)含量與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。中劑量組動物血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。高劑量組動物血清中的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、總蛋白(TP)、尿素氮(BUN)含量與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)，但均在正常范圍值內，無病理學意義。

對雌性大鼠，低劑量組動物的葡萄糖(GLU)含量與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。中劑量組動物血清中總膽固醇(TC)含量、天冬氨酸轉氨酶(AST)活力、尿素氮(BUN)含量、總蛋白(TP)含量與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。高劑量組動物血清中的總膽固醇(TC)含量、天冬氨酸轉氨酶(AST)活力、葡萄糖(GLU)含量與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。但均在正常范圍值(GLU：4.4～8.39mmol/L；TC：1.0～2.76mmol/L；TG：0.2～1.49mmol/L；ALB：25.9～38.5g/L；TP：43.3～80.5μmol/L；BUN：4.05～8.46mmol/L；AST：71.51～196.98U/L[7])內，無病理學意義。

表 7 珠母貝CPG 30d喂養對SD大鼠血常規指標的影響(±s，n=11)Table 7 Effects of CPG on hematological indexes of SD rat±s，n=11)

表 7 珠母貝CPG 30d喂養對SD大鼠血常規指標的影響(±s，n=11)Table 7 Effects of CPG on hematological indexes of SD rat±s，n=11)

注：WBC.白細胞；RBC.紅細胞；HGB.血紅蛋白；PLT.血小板；NE.中性粒細胞；MO.單核細胞；LY.淋巴細胞；EO.嗜酸性粒細胞；BA.嗜堿性粒細胞。

組別劑量/(g/kg)WBC/(109/L)RBC/(10/L)HGB/(g/L)PLT/(10/L)NE/(10/L)MO/(10/L)LY/(10/L)EO/(109/L)BA/(109/L)對照組11.4f2.67.30f0.37153.0f6.18244.4f36.03.06f1.280.30f0.248.00f1.410.08f0.040.01f0.03 0.62510.8f2.27.23f0.31155.2f6.9241.4f52.62.72f1.190.29f0.167.75f2.140.08f0.040.01f0.03 1.2510.3f2.47.22f0.40159.2f5.0*244.4f52.42.52f1.020.25f0.127.44f1.490.06f0.070.02f0.04 2.5011.5f2.47.28f0.36158.6f5.8*205.2f30.23.26f1.150.39f0.157.70f1.250.09f0.030.01f0.03對照組8.87f1.667.07f0.51152.4f8.6234.2f38.12.01f0.450.31f0.186.46f1.550.08f0.090.01f0.03雄0.6258.68f2.107.14f0.17151.6f12.5241.4f52.61.87f0.670.25f0.136.56f1.950.08f0.060.02f0.04 1.258.52f1.136.81f0.43156.0f7.9234.6f56.62.24f0.600.31f0.185.87f1.140.08f0.060.02f0.04 2.508.96f2.026.92f0.33155.4f6.5210.8f34.22.30f0.690.26f0.086.31f1.460.08f0.060.01f0.03雌

表 8 珠母貝CPG30d喂養對SD大鼠血生化指標的影響(x±s，n=11)Table 8 Effects of CPG on blood biochemical indexes of SD rat (x±s，n=11)

表 9 珠母貝CPG 30d喂養對SD大鼠臟器指數的影響(±s，n=11)Table 9 Effects of CPG on organ/body weight ratios of SD rat (±s，n=11)

表 9 珠母貝CPG 30d喂養對SD大鼠臟器指數的影響(±s，n=11)Table 9 Effects of CPG on organ/body weight ratios of SD rat (±s，n=11)

胸腺睪丸卵巢子宮對照組0.34f0.043.21f0.340.21f0.040.50f0.080.68f0.040.18f0.050.79f0.090.06f0.010.28f0.11組別劑量/(g/kg)臟器指數/%心肝脾肺腎CPG劑量組0.6250.33f0.043.19f0.370.22f0.030.47f0.050.71f0.090.18f0.050.85f0.140.07f0.020.27f0.11 1.250.34f0.053.04f0.490.21f0.050.49f0.120.66f0.050.17f0.050.83f0.210.06f0.010.24f0.08 2.500.32f0.043.05f0.340.20f0.020.47f0.070.67f0.050.16f0.040.81f0.150.07f0.050.37f0.20

2.3.4 病理學檢查

2.3.4.1 系統尸解與臟器指數

珠母貝CPG連續30d喂養后，各實驗組動物主要臟器大小正常，表面光滑，無腫脹，無出血點，無異常分泌物，彈性良好，無包塊，無結節等。胃腸黏膜無糜爛，無缺損等改變。與對照組比較，均未見異常改變。由表9可知，珠母貝CPG連續喂養30d后，各劑量組的臟器指數與對照組比較，無顯著性差異(P＞0.05)。

2.3.4.2 組織病理學檢查

對高劑量組雌雄大鼠進行肝臟、腎臟、脾臟、胃、腸、睪丸、卵巢的組織病理學檢查。均未見由受試物引起的中毒性病理變化。

由30d喂養實驗相關指標，可得出結論：馬氏珠母貝糖胺聚糖在本實驗劑量范圍內(0.625～2.5g/kg)，對實驗動物的生長發育、食物利用率、血液學、心、肝、脾、腎以及糖脂代謝均無不良影響。但在一定劑量內能夠增加食物利用率，并且中、高劑量具有降低血清膽固醇的作用(P＜0.05)。

3 討 論

海洋動物中的多糖類物質具有較好的生物活性與應用價值，如已經開發成產品的有：美國GNC的鯊魚軟骨片(其主要成分為硫酸軟骨素)、海參多糖膠囊、注射劑等。國內對海洋動物中多糖活性的研究也較為深入，如文蛤多糖[8]、鮑魚多糖[9]、烏賊墨多糖[10]、扇貝裙邊糖胺聚糖[11]等，吳涓等[12]也對貽貝多糖膠囊進行了安全毒理學的評價研究，但對其他動物多糖的安全毒理學的研究還未見詳細報道。本課題組一直對馬氏珠母貝糖胺聚糖進行研究，結果表明其具有顯著的抗腫瘤作用[13-14]。本研究從毒理學角度出發，以馬氏珠母貝糖胺聚糖粗品為研究對象，對其急性毒性、遺傳毒性和大鼠30d喂養實驗進行了研究，為其作為功能食品開發的安全性提供依據。

急性毒性實驗中采用最大耐受劑量法，結果表明：馬氏珠母貝糖胺聚糖對KM小鼠LD50大于20g/kg(以體質量計)，且動物活動正常，未發現不良癥狀，說明該受試物屬于無毒級物質。

根據對遺傳物質作用終點的差別，并兼顧原核細胞與真核細胞、體內實驗與體外實驗以及體細胞和生殖細胞相配套原則，進行了3項遺傳毒性實驗，即Ames實驗、小鼠骨髓細胞微核實驗、小鼠精子畸變實驗。Ames實驗主要是針對生物的基因突變進行評估；小鼠骨髓細胞微核實驗主要是對染色體結構完整性變化進行評估，小鼠精子畸變實驗所反映的遺傳學終點主要是對生殖細胞的遺傳毒性進行評估，而且精子畸形率升高表示具有一定的生殖毒性[15]。實驗結果表明3項遺傳毒性實驗結果皆為陰性，未表現出致突變性。且低劑量組的精子畸形率顯著降低(P＜0.05)。

30d喂養實驗顯示，馬氏珠母貝糖胺聚糖在2.5、1.25、0.625g/kg劑量時，對動物的身體、臟器以及血液學、血液生化指標等均無明顯不良影響，說明馬氏珠母貝糖胺聚糖對動物的生長發育、造血功能、肝腎等功能均無損害作用。在研究中發現，中、高劑量可顯著降低血清膽固醇水平，提示該受試物具有潛在的降脂、調脂功能，這與海洋貝類多糖具有降血脂功能結果一致[16]。

依據中華人民共和國衛生部《保健食品檢驗與評價技術規范》中保健食品毒理學評價程序的有關規定，綜合各項安全毒理學的研究結果，可以認為馬氏珠母貝糖胺聚糖作為保健食品是安全的。

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Toxicity Evaluation of Glycosaminoglycan from Pinctada martensii

FAN Xiu-ping，WU Hong-mian*，YE Qing-jun，ZHONG Min，HU Xue-qiong，LEI Xiao-ling (School of Food Science and Technology, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524006, China)

Objective: To evaluate the toxicological safety of glycosaminoglycan from Pinctada martensii (CPG) as a health food. Methods: Rat acute toxicity test, mouse bone marrow cell micronucleus test, mouse sperm aberration test, Ames test and 30-day rat feeding test were used. Results: Acute toxicity test showed that the acute oral maximum tolerated doses (MTD) of CPG to male and female rats were both more than 20.0 g/kg body weight, which were over 300 times higher than the recommended human dose, indicating that CPG was non-toxic. The results of genotoxicity tests, including mouse bone marrow cell micronucleus test, mouse sperm aberration test and Ames test, were all negative and without mutations. In addition, no obvious negative impact on body weight, the growth and development of visceral organs or blood biochemical indicators was observed during 30 days of feeding at doses of 2.50, 1.25 g/kg and 0.625 g/kg body weight. Conclusion: It is safe to eat CPG as a dietary supplement.

glycosaminoglycan from Pinctada martensii (CPG)；acute toxicity；genotoxicity；subchronic oral toxicity

R114

A

1002-6630(2013)01-0295-05

2011-10-07

廣東省科技廳科技計劃項目(2005B204012)

范秀萍(1979ü)，女，講師，碩士，研究方向為海洋生物活性物質。E-mail：fanxp08@163.com

*通信作者：吳紅棉(1953ü)，男，教授，碩士，研究方向為海洋生物活性物質。E-mail：hxwz247@163.com