日糧ω6/ω3多不飽和脂肪酸構成比對育肥豬背最長肌脂肪酸組成和血清抗氧化指標的影響

劉顯軍，楊 營，邊連全*，陳 靜

(沈陽農業大學畜牧獸醫學院，遼寧 沈陽 110866)

日糧ω6/ω3多不飽和脂肪酸構成比對育肥豬背最長肌脂肪酸組成和血清抗氧化指標的影響

劉顯軍，楊 營，邊連全*，陳 靜

(沈陽農業大學畜牧獸醫學院，遼寧 沈陽 110866)

研究日糧中ω6/ω3多不飽和脂肪酸(PUFA)構成比對育肥豬背最長肌脂肪酸組成和血清抗氧化指標的影響。采用質量替代法使各處理日糧ω6/ω3比例分別為26:1、19:1、12:1、8:1、6:1、3:1。選擇體質量70kg左右的杜h長h大育肥豬90頭，將實驗豬隨機分為6個處理組，每個處理15頭豬，每個處理組設5個重復，每個重復3頭豬。結果表明，隨著日糧ω6/ω3降低：ω3 PUFA中α-亞麻酸(ALA，C18:3)、二十碳五烯酸(EPA，C20:5)的含量顯著增加(P＜0.05)，二十二碳六烯酸(DHA，C22:6)含量各組間差異不顯著(P＞0.05)，但也表現出升高的趨勢；ω6 PUFA中亞油酸(LA，C18:2)、C20:4、C22:4含量顯著降低(P＜0.05)；各實驗組背最長肌ω6/ω3的比值顯著降低；豬血清中丙二醛(MDA)有逐漸增加的趨勢；各組谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總抗氧化能力(T-AOC)活性差異不顯著(P＞0.05)；ω6/ω3比值為19的組的SOD活性顯著高于比值為12:1、8:1、6:1、3:1的組(P＜0.05)。結果表明：日糧ω6/ω3多不飽和脂肪酸構成比能不同程度調整育肥豬背最長肌脂肪酸組成，并對血清中抗氧化指標有一定的影響。

ω6/ω3；育肥豬；脂肪酸組成；抗氧化指標

近年來，越來越多的研究證明，各種癌癥特別是冠心病發病率的增高與日糧攝入的脂肪酸組成高度相關，人們對控制肉類脂肪酸組成的研究熱情日益高漲。

多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids，PUFA)是一類重要的營養物質，它主要包括兩類脂肪酸：ω3系列和ω6系列脂肪酸。豬肉作為人膳食中PUFA，尤其是ω3 PUFA的主要來源之一，其脂肪酸組成對人類健康非常重要，目前人類食物中ω6/ω3 PUFA比例(ω6/ω3)極不平衡，已經遠超過中國營養學會推薦膳食ω6 PUFA/ω3 PUFA的比例(4:1～6:1)[1]，降低ω6/ω3比例是提高豬肉質量和提升人類膳食質量的重要途徑。本實驗根據日糧的脂肪酸組成實測值，設計了不同ω6/ω3 PUFA比例的日糧，研究在油脂添加量相同的情況下，不同ω6/ω3的日糧對肥育豬脂肪酸組成和血清抗氧化指標的影響，為通過營養調控途徑生產健康肉品提供生產和理論依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及日糧

表 1 實驗日糧組成及營養水平Table 1 Ingredients and nutrient levels of diets

表 2 日糧脂肪酸組成Table 2 Fatty acid composition of diets with different dietaryω6/ω3 PUFA ratios

選用健康、體質量相近的杜h長h大三元去勢育肥豬90頭，參照美國美國國家研究委員會(National Research Council，NRC)豬營養需要(1998)和中國瘦肉型豬飼養標準，并結合豬場實際情況配制日糧。在玉米-豆粕型日糧的基礎上添加不同比例的不飽和脂肪酸(分別用0、0.1%、0.3%、0.5%、0.8%、1.5%的亞麻籽油(紅井源亞麻籽油)代替等量的玉米油(金龍魚玉米油))，使日糧的多不飽和脂肪酸ω6/ω3比例分別為26:1、19:1、12:1、8:1、6:1、3:1，油的總添加量為日糧的2%，日糧組成及各處理組脂肪酸組成分別見表1和表2。

1.2 試劑與儀器

谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)試劑盒南京建成生物工程研究所。

m225060純水系統 武漢中西儀器公司；DK-98-Ⅱ電熱恒溫水浴鍋 天津市泰斯特儀器有限公司；LDZX-30KBS立式壓力蒸汽滅菌器 上海申安醫療器械廠；5804R高速臺式冷凍離心機 德國Eppendorf公司；GC-9A氣相色譜儀 日本島津公司。

1.3 實驗設計與飼養管理

采用單因子試驗設計，選擇體質量70kg左右的杜h長h大肥育豬90頭，將實驗豬隨機分為6個處理組，每個處理15頭豬，每個處理組設5個重復，每個重復3頭豬。飼喂多不飽和脂肪酸ω6/ω3比例分別為26:1、19:1、12:1、8:1、6:1、3:1的日糧。實驗預飼期為7d，正式期為38d，實驗期間實驗豬自由采食，自由飲水，保持圈舍清潔，定期消毒，防疫注射等其他管理按豬場常規程序進行。

1.4 樣品采集和保存

實驗結束后，每個重復選擇實驗豬1頭，共30頭，禁止飲水12h后采血，于37℃水浴中靜置，待析出血清后吸取血清，于3000r/min條件下離心10min，取上清液，置于—20℃冰箱中保存待測。屠宰后取左側胴體第10胸椎處背最長肌中心部位肌肉，冷凍干燥后置冰箱中—20℃條件下保存，待測。

1.5 指標的測定與方法

1.5.1 抗氧化指標的測定

GSH-Px、SOD、T-AOC、MDA按試劑盒方法測定及計算。

1.5.2 背最長肌中脂肪酸測定

脂肪酸處理方法：稱取適量樣品于厭氧培養管中，加入氯乙酰甲醇4mL，氯乙酰:甲醇 = 1:10(V/V)，精確加入1mL含有C19:0內標的正己烷溶液，內標質量濃度為1mg/mL，蓋緊管蓋，80℃水浴2h，取出冷卻至室溫，加入7%的碳酸鉀溶液5mL，振蕩均勻，靜置10min。1000r/min離心5min分層，吸取上清液于2mL進樣小瓶中，上機待用。

氣相色譜條件：進樣量：1μL；進樣模式：分流模式；分流比：20:1；載氣：氦氣；載氣流速：24cm/s；進樣口溫度：250℃；色譜柱型號：J&W DB-23；色譜柱規格：65.0mh250μmh0.25μm；柱溫：180℃；升溫程序：180℃保持10min，以4℃/min升溫至200℃保持15min，以10℃/min升溫至230℃保持6min；檢測器：FID；檢測器溫度：250℃；尾吹氣：氦氣；尾吹氣流速：45mL/min。

1.6 數據統計分析

所得數據，用SPSS16.0統計軟件進行分析，oneway ANOVA方差分析，用Duncan氏法進行多重比較，以P＜0.05(差異顯著)作為差異顯著性判斷標準。

表 4ω6/ω3多不飽和脂肪酸構成比對血清抗氧化指標的影響Table 4 Effect of different dietary ω6/ω3 PUFA ratios on serum antioxidant parameters in fi nishing pigs

2 結果與分析

2.1 育肥豬背最長肌脂肪酸的組成

表 3ω6/ω3多不飽和脂肪酸構成比對育肥豬背最長肌脂肪酸組成的影響Table3 Effect of different dietary ω6/ω3 PUFA ratios on the fatty acid composition of longissimus dorsi in fi nishing pigs

由表3可知，背最長肌脂肪酸組成受日糧脂肪酸組成的變化而發生改變，日糧中ω6/ω3比值的降低(從26:1到3:1)，ω3 PUFA中α-亞麻酸ALA(C18:3)從0.15mg/g上升到1.72mg/g(P＜0.05)，EPA(C20:5)從0.05mg/g上升到0.09mg/g(P＜0.05)，C22:5各組間差異不顯著(P＞0.05)，C20:3上升到0.09mg/g，降低日糧ω6/ω3比值對背最長肌中DHA(C22:6)影響差異不顯著，但是日糧中ω6/ω3比值為8:1、6:1和3:1的組，也表現出上升的趨勢。ω6 PUFA中亞油酸LA(C18:2)從10.16mg/g降至6.33mg/g(P＜0.05)，對C20:2的影響不顯著(P＞0.05)，C20:4卻呈上升趨勢，從1.62mg/g到1.96mg/g(P＜0.05)，對C22:4總體變化不大(0.24mg/g到0.29mg/g)，但日糧ω6/ω3比例為26:1和3:1的組別差異顯著。各實驗組背最長肌中總ω3 PUFA的含量有極顯著升高的趨勢，ω6/ω3的比值顯著地降低，日糧ω6/ω3比值為3:1、6:1、8:1的組，背最長肌中的ω6/ω3比例降到了10以下，而日糧ω6/ω3比值為3:1的組，背最長肌中的ω6/ω3比例降到了4.39，達到了中國營養學會推薦的膳食多不飽和脂肪酸比例。

2.2 血清抗氧化指標測定結果

從表4可知，在日糧ω6/ω3比值為6:1、8:1、12:1的組GSH-Px活性相對較高，而其他的組GSH-Px活性相對低些，比值為26:1的組GSH-Px活性最低，但各組間GSH-Px的活性沒有達到顯著程度(P＞0.05)。

隨著日糧ω6/ω3比值的降低，SOD活性有也隨之降低(P＞0.05)。ω6/ω3比值為19:1、26:1的組SOD活性較高，兩組之間差異不顯著(P＞0.05)，但與其他組相比差異顯著(P＜0.05)，ω6/ω3比值為3:1、6:1、8:1、12:1的組之間差異不顯著(P＞0.05)。

實驗結果顯示，日糧ω6/ω3比值對血清T-AOC活性影響差異不顯著(P＞0.05)。ω6/ω3比值為19:1的組最高，ω6/ω3比值為8:1、12:1、26:1的組T-AOC活性處于中等水平，ω6/ω3比值為3:1、6:1的組T-AOC活性最低。

隨著日糧ω6/ω3比值的降低，MDA的含量越大，各處理組血清中MDA的含量差異顯著(P＜0.05)，ω6/ω3比值為3:1的組最高，與其他組相比差異顯著(P＜0.05)，比值為26:1的組MDA的含量最低，ω6/ω3比值為6:1、8:1、12:1、19:1的組之間差異不顯著(P＞0.05)。

3 討 論

3.1 ω6/ω3多不飽和脂肪酸構成比對背最長肌脂肪酸組成的影響

PUFA經消化道吸收后不經氫化，直接合成胴體脂肪[2]，因此豬肉中的脂肪酸類型受日糧脂肪酸類型的影響很大。本實驗表明，育肥豬背最長肌的脂肪酸組成可以通過日糧ω6/ω3多不飽和脂肪酸構成比的調整而改變。關于肉中脂肪酸組成的研究多集中于脂肪組織，因為大部分脂肪酸存在脂肪組織。蔡傳江等[3]認為飼料中添加亞麻油可提高豬皮下脂肪中α-亞麻酸(ALA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳五烯酸(DPA)含量，以及ω3 PUFA總含量。人們對豬肌肉中的脂肪酸組成也越來越重視，因為它更大的意義在于豬肉是人類膳食的重要組成部分，而且人們對于豬肉中可見的脂肪越來越反感[4]。

很多研究多集中于在豬的日糧中添加單一油類，以此增加豬肉中多不飽和脂肪酸的沉積，徐彬等[5]研究，日糧中添加亞麻油可顯著增加豬肉中C18:3(ω3)和C20:5(ω3)的含量，C22:5(ω3)和C22:6(ω3)的含量有所增加，但并未達到顯著水平。Wang Haifeng等[6]研究，飼喂大豆油的實驗組豬背最長肌的ω6 PUFA和ω3 PUFA明顯高于對照組，背最長肌的ω6 PUFA/ω3 PUFA也相比對照組明顯的降低。Nuernberg等[7]研究結果顯示，飼喂亞麻籽油的豬的肌肉脂肪中的亞麻酸含量和長鏈ω3脂肪酸明顯的增加，飼喂橄欖油的豬的肌肉中油酸的含量有所積累。Hallenstvedt等[8]研究，在豬的日糧中添加魚油，結果顯示，背最長肌脂肪酸組成受日糧脂肪酸組成的影響，所有添加魚油的組都顯著降低了ω6/ω3比值，增加了背最長肌的EPA、DHA的含量，尤其是DPA的含量。呂玉麗等[9]在育肥豬飼料中添加魚油，結果顯示添加2.5%的魚油組雖然對育肥豬的生產性能和肉質的影響不明顯，但是很明顯地提高了脂肪組織和肌肉組織中的EPA和DHA的含量。魚油作為飼料ω3 PUFA來源可使肉中產生不良氣味，而使用植物性ω3 PUFA來源的油(如亞麻籽油)，能顯著增加ω3 PUFA中的C18:3(ω3PUFA的前體物)，并且能降低飼料成本。單一油脂中各類脂肪酸含量都不一樣，使得這種單一油脂日糧中的脂肪酸組成并不均衡，從而使豬肉中的多不飽和脂肪酸組成的比值達不到膳食要求，從改善豬肉中不飽和脂肪酸平衡比例的效果出發，在日糧中添加混合油，生產出更加均衡的脂肪酸組成的豬肉顯得尤為重要，安文俊等[10]研究不同配比油脂飼料對肉雞胸肌中脂肪酸組成的影響，在ω3脂肪酸方面，棕櫚油為主的配比油脂組以及多種植物油為主的配比油脂組高于基礎日糧組，但均顯著低于豆油組，在ω6脂肪酸方面，豆油組與以椰子油為主的配比油脂組顯著高于基礎日糧組。Haak等[11]研究發現，ω3多不飽和脂肪酸在動物體內的沉積受到添加油脂的時間和飼喂的持續時間的影響。

玉米油中富含C18:2(ω6)，亞麻籽油中富含C18:3(ω3)，調整玉米油和亞麻籽油的添加比例，改善豬肉的脂肪酸組成，使得沉積于豬肉中的ω6 PUFA和ω3 PUFA的比例接近膳食適合比例。本實驗中，隨著日糧ω6/ω3比值的降低，ω3 PUFA中ALA(C18:3)、EPA(C20:5)、C20:3含量都有增加的趨勢，C22:5的含量在各組間無顯著差異。降低日糧ω6/ω3比值對背最長肌中DHA(C22:6)含量影響差異不顯著，但有逐漸增加的趨勢，EPA在酶系統的作用下可經去飽和作用轉化成DHA。ω6 PUFA中LA(C18:2)的含量顯著的降低，C20:2含量各組之間無明顯差異，C20:4含量有上升的趨勢，C22:4含量在ω6/ω3比例為3:1的組最高，在比例為26:1和3:1兩組間表現差異顯著。各實驗組背最長肌中總ω3 PUFA的含量有顯著升高的趨勢，而且ω6/ω3的比值顯著降低。隨著日糧ω6/ω3比值的降低，沉積在豬肉中C20:5和C22:6含量極少，但含量均有增加的趨勢，表明降低ω6/ω3有利于提高C18:3向其長鏈衍生物的轉化效率，這是因為短鏈ω3 PUFA(亞麻酸)在動物機體中在相關酶的作用下通過去飽和以及碳鏈延長等步驟，轉變成長鏈ω3PUFA(EPA和DHA)，但這種轉變過程很緩慢[7]。此外，豬肉中脂肪酸的組成也受遺傳的影響[4]。

3.2 ω6/ω3多不飽和脂肪酸構成比對血清抗氧化指標的影響

動物在應激狀態下，機體抗氧化酶活性降低，消除氧化代謝產物的能力下降，從而打破體內自由基產生與清除的動態平衡，自由基逐漸積累并產生氧化損傷。SOD、GSH-Px等具有很強的清除活性氧和自由基的作用，可提高機體的抗氧化能力，是常用的抗氧化指標[12]。

GSH-Px可與有機氫過氧化物反應，還原其為有機羥化物；以還原型谷胱甘肽(GSH)作為氫供體，GSH-Px使H2O2變為H2O，具有清除自由基和衍生物的作用，并能與其他酶類組成多水平的還原有機氫過氧化物系統，抑制脂質過氧化物的形成，增強機體抗氧化損傷的能力[13]。本實驗結果顯示，隨著日糧ω6/ω3比值的降低，各組GSH-Px活性差異不顯著(P＞0.05)，在ω6/ω3比值為6:1、8:1、12:1的組GSH-Px活性相對較高。夏兆剛[14]研究發現，產蛋雞血漿和肝臟GSH-Px活性隨著ω6/ω3比值的升高顯著增加(P＜0.10)，與本實驗中血清中GSH-Px活性的變化有相似的結論。

SOD是體內清除氧自由基的主要酶之一，能有效地消除氧自由基，當疾病過程中產生過多氧自由基從而超過)清除能力時，會造成細胞膜與基因的損傷，進而對細胞起保護作用[15]。楊小軍等[16]研究發現，日糧魚油和玉米油改善脾臟SOD活性主要發生在肉仔雞21日齡；增強腸道SOD活性主要發生在42日齡。本實驗中，不同ω6/ω3比值的日糧中，比值為26:1和19:1的組與其他組相比血清中SOD活性差異顯著，其他組之間未表現出差異性影響，但是整體有活性降低的趨勢。

T-AOC的大小可代表和反映機體抗氧化系統對外來刺激的代償能力以及機體自由基代謝的狀態。從表4可見，隨著日糧ω6/ω3比值的降低，各組T-AOC含量差異不顯著(P＞0.05)，但是血清T-AOC有不同程度的降低。夏兆剛[14]研究發現，不同比例PUFA對產蛋雞血漿和肝臟T-AOC的影響達不到顯著水平，但隨著ω6/ω3比值的升高存在著增加的趨勢。

正常情況下，動物機體存在著一個完整的抗氧化體系，SOD、GSH-Px、過氧化氫酶(CAT)等都屬于機體的抗氧化酶系，并在酶防御系統發揮了重要作用[17-18]。機體通過酶系統與非酶系統產生氧自由基，后者能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發脂質過氧化作用，并因此形成脂質過氧化物[19]，氧自由基不但通過生物膜中多不飽和脂肪酸的過氧化引起細胞損傷，而且還能通過脂氫過氧化物的分解產物引起細胞損傷。MDA是生物膜脂質成分受自由基攻擊后的產物，是評價脂質過氧化程度的指標。從表4可以看出，隨著日糧ω6/ω3比值的降低，豬血清中MDA的含量有逐漸增加的趨勢，提示體內脂質過氧化作用加強，多不飽和脂肪酸易于發生脂質過氧化，使機體MDA的含量增多，同時也表明與玉米油中長鏈脂肪酸相比，亞麻籽油中長鏈ω3 PUFA更容易氧化酸敗，脂質過氧化作用與PUFA中雙鍵的數目有關，ω3 PUFA雙鍵數目多于ω6 PUFA，使得ω3 PUFA脂質過氧化作用較強。

4 結 論

育肥豬日糧中ω6/ω3PUFA構成比可明顯影響豬背最長肌的PUFA的構成，而且ω6/ω3為3:1的日糧可使豬背最長肌ω6和ω3比值降至中國營養學會推薦膳食ω6PUFA/ω3PUFA的比例(4:1～6:1)，接近人的健康飲食推薦水平。

從抗氧化酶和脂質過氧化物整體來看，日糧ω6/ω3比值為8:1、12:1、19:1的組，機體的抗氧化能力較強，這與機體的抗氧化系統存在動態平衡的自我平衡機制有關。

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Effect of Dietary ω6/ω3 Polyunsaturated Fatty Acid Ratio on longissimus dorsi Fatty Acid Composition and Serum Antioxidant Parameters in Finishing Pigs

LIU Xian-jun， YANG Ying， BIAN Lian-quan*， CHEN Jing
(College of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, China)

The effect of dietary ω6/ω3 polyunsaturated fatty acid (PUFA) ratio on longissimus dorsi fatty acid composition of and serum antioxidant parameters were investigated in fi nishing pigs with body weight of approximately 70 kg. ω6/ω3 PUFA ratios of 26:1; 19:1; 12:1; 8:1; 6:1 and 3:1 were obtained by replacing corn oil with the same amount of linseed oil. Ninety fi nishing Duroc h Landrace h York shine pigs of similar body weight (approximately 70 kg) were divided randomly into 6 groups of 15 pigs (5 replicates in each group, 3 pigs per replicate). The contents of ω3 PUFAs such as ALA (C18:3), EPA (C20:5) in longissimus dorsi signif i cantly increased (P＜0.05), and DHA (C22:6) content increased but not signif i cantly (P＞0.05) as the dietary ω6/ω3 PUFA ratio decreased. However, the contents of ω6 PUFAs such as LA (C18:2), C20:4and C22:4signif i cantly decreased (P＜0.05) and ω6/ω3 PUFA ratio in longissimus dorsi also showed a signif i cant downward trend. In contrast, MDA content in porcine serum tended to gradually increase. There were no signif i cant changes in serum GSH-Px or T-AOC activities (P＞0.05). A signif i cantly higher level of serum SOD activity was obtained at an ω6/ω3 PUFA ratio of 19:1 compared to 12:1, 8:1, 6:1 and 3:1 (P＜0.05). These results indicated that dietary ω6/ω3 PUFA ratio could modify the fatty acid composition of pork longissimus dorsi and affect serum antioxidant parameters to a certain extent.

ω6/ω3；f i nishing pigs；fatty acids composition；antioxidant parameters

S816.4

A

1002-6630(2013)01-0272-05

2011-10-30

十一五國家科技支撐計劃項目(2007BAD71B03)；十二五國家科技支撐計劃項目(2011BAD28B01-02)

劉顯軍(1972ü)，男，副教授，博士，研究方向為動物營養。E-mail：lchenj@163.com

*通信作者：邊連全(1955ü)，男，教授，碩士，研究方向為動物營養與肉品質調控。E-mail：bianlq@163.com