景曉敏
培養基(Medium)即生物實驗中一種為微生物、植物及動物組織提供生存及生長的人工配制養料。此養料通常富含多種生物所需的水、維生素、碳水化合物、含氮物質以及微量元素等。而也有專用的培養基含有抗菌素及色素,特針對于對單種微生物培養及鑒定工作。然而隨著近年來其醫療及科研技術的不斷成熟與發展,生物實驗及微生物檢驗中所需的培養基呈現著越來越廣泛的運用趨勢,而隨之市面上出現的培養基生產廠商也不斷增多。此種由規模化量產的培養基雖然為廣大微生物檢驗提供了極大的方便,但據多項調查及研究結果指出,此行業量產的培養基,其制作工藝、生產質量等還未達到規范化指標,產品的有關質量更是存在一定的問題,且有待完善。而實驗室中微生物檢測的質量與其使用的培養基息息相關,培養基的質量保障正是微生物檢驗結果準確性的前提[1]。故嚴格進行實驗室微生物檢驗中培養基的質量控制,對提高檢驗質量具有重要的意義。本文就對現今如何進行培養基質量控制的方法作一簡要的闡述。
現今市面上的培養基生產廠家非常多,但是其產品質量均有一定的差異。故我們在進行實驗室微生物培養基的采購方面,需要嚴格控制其采購質量。首先,采購培養基的生產廠家必須是通過國家相關企業質量認證的,如ISO9001體系認證及其他資質認證。其次采購的培養基產品均需通過各項國家相關規定的質量檢測,且達到標準,產品出廠后有各項嚴格指標,如名稱、成分、添加成分、技術數據、質量控制證、性能評價數據及有效期等相關數據[2]。最后則是采購的產品產商需選擇市面上信譽度高,服務好的企業。而培養基的驗收則包含了對采購完成的培養基進行的各項檢驗工作,包括核對生產廠家名稱、產品名稱、生產批號及規格數量,對比真實產品與各項數據清單有無差異,確定產品的外觀、質量以及保質有效期。發現采購后的培養基出現上述各項中的任何差異及問題,一律歸為驗收不合格,且不得使用。
商品化規格的培養基及干粉培養基均應嚴格按照其產品說明上的存放環境進行保存,產品存放于干燥且陰涼的位置。通常培養基的有效保存期為2年,但若一但開封且未使用完的培養基很易吸收室內空氣中所含的水分,造成損壞。故一經開封應盡快使用完,保存則嚴格注意防潮。檢驗人員對保存中的培養基應作詳細的定期檢查,確保其密封性及是否處于有效使用期。若發現培養基在保管中出現問題,如過期、變色、結塊等情況,需及時廢棄。
首先制備培養基所選用的水必須是專用純凈水或者經消毒過后的無菌水。水中電阻率需在25℃時大于300000Ω/cm,重金屬含量需小于0.05 mg/L。而在進行培養基的稱量時需專業人員在干燥通風的環境中采用專門的角匙,且操作過程需嚴格規范。培養基進行復水的容器則需要采用專用的盛裝容器,其容器的體積須大于復水后培養基總體積的2倍,預防出現溢出情況。在對培養基進行加熱時,若培養基內含有瓊脂粉成分,則需要將其充分浸泡一段時間。加熱的過程中不斷進行攪拌防止出現培養基結底炭化從而造成成分損害。部分培養基則需要使用沸水進行加熱,預防發生局部燒焦及沸騰溢出。而當對培養基實施滅菌時,需嚴格按照說明規范操作。通常均會采用121℃行15 min高壓滅菌,但是也不能盲目按照說明的時間進行,需結合實際情況,合理調節滅菌時間,防止出現培養基滅菌過度而造成的成分變性。為有效體現培養基其生物學特性,其制備生長及繁殖需要特定的PH范圍[3]。當在實施培養基滅菌過程中,往往PH值會因滅菌而產生改變。可采用適量的NaOH1 mol/L及鹽酸1 mol/L對培養基的PH值進行適當調節,但也應注意調節次數不宜過多。
當經過上述步驟而制備好的培養基均會出現不同的顏色及質感。故對培養基的性能測定可根據其顏色、形態、質感的觀察來進行。完成培養基需顏色清晰、質感明顯,無脫水、渾濁及沉淀現象。
通過以上環節可以有效提高培養基的質量,但人為因素也是影響其實驗室微生物檢驗的重要因素之一[4]。故無論是檢驗人員還是培養基的制備人員,都必須對其自身素質及技術水平進行認真的認識及學習,端正其工作態度,加強各方面業務知識、技術能力,進一步提高實驗室檢驗人員的從業水平。
綜上所述,培養基是微生物檢驗過程中必不可少的關鍵因素,而我們則需通過嚴格產品的采購、規范其操作以及提高從業人員水平素質等手段進一步加強其培養基的質量控制,從而有效提高其微生物檢驗的準確性及質量。
[1]顧文輝.微生物實驗室質量控制.職業與健康,2010,26(16):1906-1908.
[2]周小明.微生物實驗室的質量控制和質量保證.職業與健康,2009,25(15):1667-1668.
[3]童小平,楊更發.培養基有效保存期內的質量控制.浙江預防醫學,2009,(8):89-91.
[4]王綏家,黃宏星.微生物實驗室培養基的質量控制.檢驗醫學與臨床,2011,(20):112-114.