中藥對缺血心肌血管內(nèi)皮細胞生長因子、堿性成纖維細胞生長因子水平的影響

王 勤 于俊民 張小波 姜 文 王慧冬 王凌云 曹濱冬

哈爾濱醫(yī)科大學附屬第四醫(yī)院老年病1 科，黑龍江哈爾濱 150001

中醫(yī)藥在缺血性心臟病的治療方面療效肯定，可改善患者癥狀，大量動物實驗證實，中藥單體、方劑及中成藥具有促進血管新生作用，對中醫(yī)藥促進缺血心肌血管新生機制的研究目前成為關(guān)注的熱點[1]。在對其機制的探討中，眾多學者對影響血管新生的相關(guān)細胞因子進行了大量研究，從分子水平為冠心病心肌缺血中藥治療提供了依據(jù)。

1 冠心病的中醫(yī)理論基礎(chǔ)

中醫(yī)認為“氣血互根、脈為血之府”，“脈”可理解成解剖學中較大的血管，脈絡(luò)則與中小血管、微循環(huán)基本相同。冠心病的發(fā)生為心之絡(luò)脈瘀阻亦或心之絡(luò)脈絀急所致[2]，心氣虛乏，絡(luò)脈瘀阻可致心絡(luò)瘀塞引起真心痛發(fā)作，即急性心肌梗死（AMI）。冠心病為本虛標實之證，氣虛血瘀貫穿疾病的不同病理階段[3]，因此，益氣活血、去瘀生新是中藥治療冠心病的方法。“生新”代表新的血液，同時也可以解釋為血管的再生[4]。血管新生是指在缺血心肌已有的血管床上，促進內(nèi)皮細胞發(fā)芽長出新支，形成血管網(wǎng)[5]。血管新生與中醫(yī)學“生脈”理論相關(guān)聯(lián)，中醫(yī)“生脈”理論包括三層含義：一是血管管腔增粗，血流量增加；二是處于關(guān)閉狀態(tài)的血管出現(xiàn)再通現(xiàn)象；三是生成新的血管[6]。醫(yī)學文獻中關(guān)于“生脈”、“生血”、“生肌”等方面的論述，為中藥促進血管新生奠定了理論基礎(chǔ)。

2 中藥與血管新生

目前在中藥促血管新生作用研究中，中藥及中藥單體包括丹參、白藜蘆醇、人參皂苷、西洋參莖葉總皂苷、葛根素、川芎嗪等，方劑與中成藥包括當歸補血湯、保心湯、溫養(yǎng)益心方、芪參益氣浸膏、芪丹通脈片等。血管新生是一個較為復雜的、程序化的級聯(lián)事件[7]，包括活化內(nèi)皮細胞，使內(nèi)皮細胞釋放蛋白酶，蛋白酶溶解血管基底膜，從而使內(nèi)皮細胞侵入周圍組織，形成血管萌芽，萌芽增殖與內(nèi)皮細胞分化形成管腔，而在此過程中細胞因子起到了重要的作用，目前證實血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）、堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）、血小板源性生長因子（PDGF）、胰島素樣生長因子（IGF-1）、轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β1）、表皮生長因子（EGF）等20多種細胞因子參與了血管新生的調(diào)控。

3 細胞因子在血管新生中的作用

有實驗證實中藥能夠通過調(diào)控VEGF、bFGF水平而影響血管新生，另有學者發(fā)現(xiàn)PDGF-B 能通過誘導血管周細胞聚集，促進血管成熟，對維持有功能的血管有重要的意義[8]。在體外研究中發(fā)現(xiàn)TGF-β1具有促血管生成的作用，同時還可調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞基因表達，增加纖維蛋白等細胞外基質(zhì)形成，是體內(nèi)血管生成的重要因素之一[9]。目前研究認為VEGF 和bFGF是體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的最為有效的促血管因子[10]。

4 中藥治療與VEGF

4.1 VEGF

VEGF 又稱血管通透性因子（vascular permeability factor，VPF）或血管調(diào)理素（vasculotropin），是一組功能強大且能產(chǎn)生多種效應(yīng)的細胞因子[11]。VEGF 活性為組胺的5 000倍[7]，能夠增強血管的通透性從而誘導新血管的形成。VEGF 家族包括 VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D 以及胎盤生長因子（PIGF）等，具有調(diào)解大量血管內(nèi)皮細胞的增殖、遷移、存活、分化和細胞間通訊等作用。有文獻報道，缺氧是刺激VEGF 過度表達的作用因素之一[7]。

4.2 中藥對VEGF的影響

人參皂苷Rg1（Ginsenoside-Rg1）作為人參提取物中的一種重要皂苷成分，在體內(nèi)能夠誘導血管新生[12]。尹慧秋等[12]通過建立大鼠心肌梗死模型及模擬人臍靜脈內(nèi)皮細胞低氧狀態(tài)方法，證實人參皂苷Rg1 誘導血管新生與較高的VEGF表達水平有關(guān)，并且是通過激活PI3K/AKT 和抑制p38MAP 途徑發(fā)揮作用的。

丹酚酸B（Bsalvianolic acid B）為丹參有效成分之一，He等[13]證實丹酚酸B 能夠增加梗死周邊區(qū)以及左心室非梗死區(qū)VEGF 相對高表達，從而促進血管新生實現(xiàn)心肌保護作用。

動物實驗提示川芎嗪（Tetramethylpyrazine）注射液可提高大鼠梗死心肌VEGF、PDGF-β等細胞因子水平，梗死周邊區(qū)毛細血管數(shù)（MVC）及毛細血管密度（MVD）較對照組出現(xiàn)明顯增加趨勢，推測其促進或誘導缺血心肌血管新生作用可能通過促進VEGF等相關(guān)細胞因子而發(fā)揮效用[14]。

巴戟天糖鏈（MOO）是巴戟天醇的主要有效成分，楊景柯等[15]研究發(fā)現(xiàn)MOO 具有促進AMI后大鼠缺血心肌血管新生作用，機制可能是通過增加梗死周邊區(qū)VEGF表達實現(xiàn)的。

葛根素（puerarin）為傳統(tǒng)中藥葛根中的主要有效成分，張淑娟等[16]證實其能夠促進缺血心肌血管新生，且血管的新生程度與VEGF mRNA表達水平大體上保持一致，提示其促進血管新生的作用與增加VEGF mRNA表達相關(guān)。

舒脈湯含由黃芪、三七、水蛭、丹參等七種組成成分，是治療缺血性心肌病傳統(tǒng)中藥之一，已證實該藥能使AMI大鼠梗死周邊區(qū)MVD 增加，心肌VEGF 蛋白表達量增高，并證實該藥促進血管新生作用是通過PI3K/AKT 信號通路產(chǎn)生作用的[17]。

5 中藥治療與bFGF

5.1 bFGF

bFGF是目前研究最多、生物效應(yīng)最強、作用最廣泛的成纖維細胞生長因子（FGF）之一[18]，在體內(nèi)和體外均能明顯促進新生血管形成[19]。bFGF 與FGF 受體（FGFR）結(jié)合發(fā)揮效應(yīng)，激活信號轉(zhuǎn)導途徑蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）、Ras/Raf/MEK/ERK、蛋白酪氨酸激酶（Janus kinase，JAK）/信號轉(zhuǎn)導子及轉(zhuǎn)錄激活因子（signal transducer and activator of transcription，STAT）、磷脂酰肌醇-3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase， PI3K）等通路[19]。bFGF 能夠趨化血管內(nèi)膜的各類細胞[19]，促進血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞增殖遷移[20]，促進外溶酶原激活物和膠原酶分泌，加速損傷部位的細胞外基質(zhì)部分溶解，使毛細血管長入細胞外基質(zhì)，拮抗心肌損傷，并且可促進一氧化氮（NO）產(chǎn)生。NO 能促進內(nèi)皮細胞增殖、遷移、抑制凋亡，為血管新生早期一種重要的血管生成介質(zhì)[13]。

5.2 中藥對bFGF的影響

芪丹液由黃芪、丹參等六味益氣活血藥物組成，已證實丹參能促進一些器官黏膜的細胞再生和組織修復，同時可以消除陳舊性的瘢痕疙瘩，對缺氧所致的心肌損傷也具有一定的保護作用[21]。殷惠軍等[22]發(fā)現(xiàn)芪丹液能夠上調(diào)心肌梗死大鼠促血管新生因子VEGF、bFGF 基因及蛋白的表達，14 d MVD 較7d時顯著增高，表明芪丹液可以將VEGF、bFGF水平維持較長時間，有易于側(cè)支循環(huán)形成。

西洋參莖葉總皂苷（PQS）由西洋參莖葉中提取，王承龍等[23]通過觀察不同PQS 劑量組VEGF 和bFGF表達的情況得出結(jié)論：PQS 可促進大鼠AMI后缺血心肌內(nèi)源性VEGF 和bFGF 合成和分泌，從而促進心肌血管新生，血管密度增加，改善心肌微循環(huán)。

雙龍丸為蜈蚣和全蝎等蟲類按比例組成的中藥配方，具有破瘀散結(jié)的作用。楊祖福等[24]觀察到大劑量和小劑量組較同時期心肌梗死組新生血管數(shù)顯著增加，表明雙龍丸具有促進血管新生的作用，并推測大劑量雙龍丸對VEGF、bFGF的分泌及其基因轉(zhuǎn)錄水平都有一定的上調(diào)作用。

侯仙明等[25]通過給予AMI大鼠和血生絡(luò)方3周治療，發(fā)現(xiàn)該藥物能夠使血清及心肌組織中bFGF 和bFGF mRNA表達增加，有利于大鼠心肌缺血區(qū)血管新生。

6 展望

心肌梗死后心肌缺血，損傷的心肌細胞結(jié)構(gòu)與功能發(fā)生改變，隨時間推移導致心室重塑，加重心肌纖維化，促血管新生治療可以在不同程度上減小梗死面積，從而改善心功能。細胞因子在中藥促血管新生過程中具有重要的調(diào)控作用，尤其中藥對VEGF、bFGF表達可產(chǎn)生一定的影響，已知某些中藥能夠激活PI3K/AKT 通路，但中藥對VEGF、bFGF 與相應(yīng)受體結(jié)合后，下游轉(zhuǎn)導途徑機制的影響研究仍在進行中，已有學者證實可能存在其他信號通路和下游介質(zhì)參與纖維化損傷[13]。

中藥方劑與中成藥的成分較為復雜，主要為大分子化合物的混合物，其促進細胞因子表達的確切成分研究仍處在探索階段，如何將有效成分進行提純并深入研究中藥單體作用及其機制尚在進一步的探索中。

[1]于俊民，鞠禮，王慧冬，等.中藥促缺血心肌血管新生機制研究進展[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2012，12（20）：3978-3980.

[2]吳以嶺.“脈絡(luò)—血管系統(tǒng)疾病”新概念及其治療探討[J].疑難病雜志，2005，4（5）：285-287.

[3]韓麗華，王振濤，索紅亮，等.益氣活血方促心梗后大鼠缺血心肌血管新生及對VEGF-B表達的影響[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學雜志，2006，12（4）：263-265.

[4]陳衛(wèi)星，吉中強，紀文巖.活血化瘀中藥與冠心病血管新生[J].遼寧中醫(yī)藥大學學報，2010，12（5）：135-136.

[5]王培利，雷燕，陳可冀.血管新生—治療心血管疾病的心策略[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2006，26（2）：173-175.

[6]武相，陳曉虎.中醫(yī)藥促冠心病缺血心肌血管新生的最新研究進展[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，20（13）：1689-1690.

[7]商瑋.整合素和血管內(nèi)皮生長因子在血管新生中的作用[J].醫(yī)學研究生學報，2008，21（8）：881-884.

[8]王勇，黃從新，程勁松，等.缺血預處理對大鼠血管生長物質(zhì)表達及新生動脈形成的影響[J].中華心血管病雜志，2010，38（9）：819-822.

[9]王峰，石蕊，趙琳.TGF-β1、VEGF 在兔角膜縫線后新生血管形成中的表達及及意義[J].眼科新進展，2008，28（2）：96-99.

[10]徐杰.堿性成纖維細胞生長因子促進血管再生的研究進展[J].實用醫(yī)學雜志，2008，24（24）： 4317-4318.

[11]Senger DR，Vande Water L，Brown LF，et al.Vascular permeability factor（VPF，VEGF） intumorbiology[J].CancerMetastasisRev，1993，12：303-324.

[12]Yin Huiqiu，Zhaoqiang Liu，F(xiàn)uhai Li，et al.Ginsenoside-Rg1 enhances angiogenesis and ameliorates ventricular remodeling in a rat model of myocardial infarction[J].J Mol Med，2011，89：363-375.

[13]He HB，Yang XZ，Shi MQ，et al.Comparison of cardioprotective effects of salvianolic acid B and benazepril on large myocardial infarction in rats[J].Pharmacological Reports，2008，60：369-381.

[14]王振濤，韓麗華，朱明軍，等.川芎嗪注射液促心梗后大鼠缺血心肌血管新生作用及對相關(guān)生長因子影響的研究[J].遼寧中醫(yī)藥雜志，2006，33（7）：888-890.

[15]楊景柯，馮國清，于爽，等.巴戟天醇提取物促大鼠缺血心肌治療性血管生成的實驗研究[J].中國藥理學通報，2010，26（3）：367-371.

[16]張淑娟，王振濤，韓麗華，等.葛根素注射液對心肌梗塞后大鼠缺血心肌血管新生及VEGF mRNA表達的影響研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2011，22（2）：391-392.

[17]Huiqiu Yin，Jidong Zhang，Haiqing Lin，et al.Effect of traditional Chinese medicine shu-mai-tang on angiogenesis，arteriogenesis and cardiac function in rats with myocardial ischemia [J].Phytother Res，2009，23：92-98.

[18]張秋雁，蘇劍峰，王權(quán)禮，等.血府逐瘀湯超微飲片和傳統(tǒng)飲片對急性心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生及bFGF、ANG-1表達影響的比較研究[J].中醫(yī)研究，2010，23（11）：21-24.

[19]伊海英，孫曉艷，付小兵，等.堿性成纖維細胞生長因子的研究進展[J].解放軍醫(yī)學雜志，2008，33（6）：776-778.

[20]崔焱.護理學基礎(chǔ)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：156-162.

[21]杜武勛，朱明丹，馮利民，等.芪參益氣滴丸干預急性心肌梗死后早期心室重構(gòu)的臨床研究[J].中國循證血管醫(yī)學雜志，2008，1（1）：41-43.

[22]殷惠軍，劉穎，蔣躍絨，等.芪丹液促進大鼠急性心肌梗死后心肌血管新生的機理研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2006，26（9）：807-812.

[23]王承龍，史大卓，殷惠軍，等.西洋參莖葉總皂苷對急性心肌梗死大鼠心肌VEGF、bFGF表達及血管新生的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2007，20（4）：331-334.

[24]楊祖福，胡婉英，秦志強，等.雙龍丸對大鼠實驗性心肌梗死血管新生的影響與分子學機制[J].中國康復理論與實踐，2003，9（5）：293-295.

[25]侯仙明，王亞利，方敬，等.和血生絡(luò)方對心肌梗死大鼠堿性成纖維生長因子的影響[J].中國老年學雜志，2011，1（31）： 84-86.