水貂氣單胞桿菌和大腸桿菌混合感染的診治

任 橋，徐 玉，劉煥奇，畢可東

（青島農業大學動物科技學院，山東 青島266109）

2012年1月山東省文登市一水貂養殖場突然發病。該水貂場飼養水貂已有4年，水貂共400只，母320只，公80只。從2011年12月開始發病，病程有一個月，死亡90多只，曾在某動物醫院按腸炎用氟苯尼考、頭孢他啶和黃芪多糖治療過，有短暫好轉，但現又反復發病。第二次發病后，將病死貂送來檢驗。本病通過臨床癥狀、病理剖檢及細菌學檢查，疑似為氣單胞桿菌和大腸桿菌混合感染。

1 臨床癥狀

病貂多數突然發病，表現食欲減退或廢絕，精神委靡，體溫升高到40.5℃以上。繼而出現腹瀉，腹瀉先以黃色糞便出現，后轉為排煤焦油樣的糞便。病程一般2～3d，快則1d左右死亡，慢則5d左右死亡。

2 病理變化

肺臟有大小不等的出血點或出血斑；肝臟彌漫性出血，紅黃相間，邊緣光滑，稍脆；脾臟腫，有少量黑色壞死灶；腎臟表面有出血點；腸系膜淋巴結腫大，有出血、壞死；胃內容物呈煤焦油樣。

3 實驗室診斷

3.1 涂片鏡檢 取新鮮病死貂的心血、肝臟、肺臟、脾臟直接進行涂片，分別進行革蘭染色，顯微鏡下觀察，見有菌體兩端鈍圓的的革蘭陰性桿菌，單個或成對存在；同時發現一種革蘭陰性直桿菌，無莢膜，散在或成對。

3.2 分離培養 取新鮮病死貂的肝臟、肺臟、脾臟及腸黏膜等病料分別接種于營養瓊脂和鮮血瓊脂平板上，放入37℃恒溫培養箱中培養24h。結果普通培養基上長出圓形、邊緣整齊、中央隆起、表面濕潤、光滑、半透明、顏色由灰白色至淺黃色、帶有芳香氣味及灰色、邊緣整齊、光滑、表面有光澤的兩種小菌落。挑選有芳香氣味、淺黃色的可疑菌落再接種于鮮血瓊脂培養基上進行純培養，得到細菌的純培養物，涂片鏡檢見有大量兩端鈍圓的革蘭陰性桿菌（以下簡稱病菌Ⅰ）。挑取另一可疑菌落再接種于伊紅美藍培養基，在培養基上產生黑色帶金屬閃光的菌落，涂片鏡檢見有大量的革蘭陰性直桿菌（以下簡稱病菌Ⅱ）。

3.3 病菌Ⅰ的鑒別

3.3.1 生化試驗 取分離純化后的培養菌進行生化試驗。結果表明，本菌能利用甘油、葡萄糖，產酸產氣；發酵水楊素、阿拉伯糖、蔗糖、麥芽糖、甘露糖；發酵乳糖、棉籽糖和肌醇。靛基質、M.R、V－P陽性，氧化酶、過氧化氫酶陽性。該生化反應試驗結果與氣單胞桿菌生化反應特點相符。

3.3.2 動物試驗 采取瀕死或剛死不久的病死貂的肝、脾病變組織，按比例制成1∶10的懸液，或純分離菌24h培養物，經口或皮下接種敏感水貂。通常3～7d致死。也可給小鼠腹腔注射，在2～4d發病死亡。從死亡鼠的心血中分離到與接種菌菌落形態Ⅰ菌體涂片、染色特征一致的細菌。根據以上綜合診斷，病菌Ⅰ為氣單胞桿菌。

3.4 病菌Ⅱ的鑒別

3.4.1 生化試驗 取分離純化后的培養菌進行明膠穿刺培養后進行生化試驗，結果表明，本菌能發酵葡萄糖產酸產氣；能發酵乳糖、甘露糖、D－木糖、海藻糖；吲哚和甲基紅試驗均為陽性；V－P和枸櫞酸鹽試驗均為陰性；不產生硫化氫；不液化明膠。該生化反應試驗結果與大腸桿菌生化反應特點相符。

3.4.2 動物試驗 取分離菌的肉湯22h培養液0.1mL、0.2mL，分別腹腔接種20g左右的小鼠各2只，18h4只小鼠全部死亡，對照組正常。從死亡鼠的心血中分離到與接種菌菌落形態Ⅱ菌體涂片、染色特征一致的細菌。根據以上綜合診斷，病菌Ⅱ為大腸桿菌。

4 診斷結果

綜合臨床癥狀、病理變化、實驗室診斷，確診為氣單胞桿菌和大腸桿菌混合感染。

5 藥敏試驗

分別選擇新霉素、慶大霉素、丁胺卡那霉素、先鋒霉素、頭孢噻呋、復方新諾明、氨芐青霉素、氟哌酸、氯霉素、林可霉素及強力霉素等10種藥物進行藥敏試驗，新霉素和頭孢噻呋高敏；強力霉素中敏；其他各種藥物未出現抑菌環。

6 防治

6.1 加強飼養管理 搞好衛生消毒工作，隔離發病貂，對籠舍、地面環境、糞便等用5%熱火堿水噴灑消毒，每天1次，連用1周；食槽及飲水槽，徹底清洗消毒，每天2次。對病死貂焚燒深埋，杜絕再用來飼喂貂。魚類飼料必須用自來水清洗干凈、充分煮熟后飼喂，不得生喂。供給新鮮清潔、無污染的飲水，避免本病的繼續傳播。

6.2 根據藥敏結果，選用敏感的藥物進行治療 按臨床常規劑量注射頭孢噻呋，1次/日，連用3d；新霉素，口服，15g/kg飼料，連用5d；葡糖糖、維生素C和復合維生素B 50mg/kg飼料，連用2周。

7 討論

水貂氣單胞菌病又稱水貂出血性敗血癥，是由嗜水氣單胞桿菌引起的一種出血性敗血性傳染病。嗜水氣單胞桿菌廣泛存在于淡水、海水、含有有機物的淤泥，以及魚類的體表；健康魚的帶菌率甚高，因此，水域和魚類是本病的主要傳染源［1］。本病主要由污染的魚類飼料通過消化道感染發病。在饑餓、飼料蒸煮不完全、抵抗力降低等因素誘發下可引起暴發流行。

大腸桿菌是腸道的一種常在菌，屬于條件致病菌，當水貂機體抵抗力降低時才呈現致病性。在氣候突變、管理不當時，幼貂容易受寒感冒，導致機體抵抗力下降，環境中和體內的條件性致病菌容易入侵機體，造成水貂發生疾病［2］。

該貂場發病原因可能是由于魚類飼料長時間生喂，使之存在于魚體表面的嗜水氣單胞桿菌感染機體導致發病，再加之氣候忽冷忽熱，水貂場的消毒工作不到位，繼發大腸桿菌的感染。通過藥敏試驗表明，嗜水氣單胞桿菌和大腸桿菌對多種抗生素都有一定的耐藥性，可能與平時濫用藥物有關。所以治療此類疾病時最好盡早做出正確診斷，并通過藥敏試驗，選擇最敏感藥物，才能收到顯著的防治效果，避免浪費藥物和延誤防治時機，減少損失。

［1］ 錢國成.毛皮動物細菌性病害（6）［J］.特種經濟動植物，2009（5）：19－20.

［2］ 鄒玲.水貂大腸桿菌病的診斷［J］.中國畜牧獸醫，2006，36（9）：147－148.

［3］ 呂俊，徐鑌蕊.雞大腸桿菌病的實驗室診斷［J］.中國畜牧獸醫，2008，35（9）：98－99.