對(duì)2010年版《中國藥典》（二部）中鹽酸普魯卡因注射液鑒別試驗(yàn)（1）的探討

石天松（南寧食品藥品檢驗(yàn)所，南寧 530001）

鹽酸普魯卡因是一種局部麻醉藥，是國內(nèi)外臨床上廣泛應(yīng)用的基本藥物之一，國內(nèi)于1957年開始生產(chǎn)。《中國藥典》（以下簡稱藥典）自1953年版以來，歷版均有收載[1-5]，其化學(xué)名為4-氨基苯甲酸-2-（二乙氨基）乙酯鹽酸鹽，因其含有芳伯胺基及鹽酸根離子，所以歷版藥典均對(duì)這2個(gè)基團(tuán)（離子）進(jìn)行鑒別，作為驗(yàn)證鹽酸普魯卡因存在的依據(jù)之一。鹽酸普魯卡因注射液作為鹽酸普魯卡因的應(yīng)用劑型之一，也須對(duì)這2個(gè)基團(tuán)（離子）進(jìn)行鑒別。筆者在檢驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，由于鹽酸普魯卡因注射液中這2項(xiàng)鑒別試驗(yàn)是轉(zhuǎn)述于鹽酸普魯卡因，后者又轉(zhuǎn)述自藥典附錄Ⅲ中的“一般鑒別試驗(yàn)”中“芳香第一胺與氯化物的鑒別試驗(yàn)”，而品種標(biāo)準(zhǔn)與共性標(biāo)準(zhǔn)對(duì)物態(tài)的描述不一致，導(dǎo)致鑒別結(jié)果不一致、不明確，筆者對(duì)此分析如下。

1 材料

鹽酸普魯卡因注射液（天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司，批號(hào)：1011222、1012252；鄭州羚銳制藥股份有限公司，批號(hào)：1003272；規(guī)格均為：40 mg∶2 ml）。

稀硝酸、硝酸銀試液、氨試液、二氧化錳、硫酸、碘化鉀淀粉試紙、純化水、稀鹽酸、0.1 mol/L亞硝酸鈉溶液、堿性β-萘酚試液等試藥純度均符合要求（分析純），試液、溶液均按2010年版藥典（二部）所規(guī)定的方法制備并在有效期內(nèi)使用。

2 方法與結(jié)果

2.1 品種方法

2.1.1 鹽酸普魯卡因注射液[5]。鑒別：（1）取本品，照鹽酸普魯卡因項(xiàng)下的鑒別（3）、（4）項(xiàng)試驗(yàn)，顯相同的反應(yīng)。

2.1.2 鹽酸普魯卡因[5]。鑒別：（3）本品顯氯化物的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）；（4）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。

2.1.3 歷版藥典方法。除2005年版藥典與上述描述一致外，之前的版本均描述為鹽酸普魯卡因項(xiàng)下（1）、（3）鑒別試驗(yàn)。經(jīng)查證，這2項(xiàng)也分別為氯化物、芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)，故各版藥典品種方法對(duì)此要求是一致的。

2.2 共性方法

2.2.1 氯化物的鑒別試驗(yàn)（附錄Ⅲ）[2-5]。（1）取供試品溶液，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀復(fù)生成。如供試品為生物堿或其他有機(jī)堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進(jìn)行試驗(yàn)。（2）取供試品少量，置于試管中，加等量的二氧化錳，混勻，加硫酸濕潤，緩緩加熱，即發(fā)生氯氣，能使用水濕潤的碘化鉀淀粉試紙顯藍(lán)色。

2.2.2 芳香第一胺類的鑒別試驗(yàn)（附錄Ⅲ）[2-5]。取供試品約50 mg，加稀鹽酸1 ml，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1 mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

2.3 實(shí)際操作結(jié)果分析

2.3.1 氯化物鑒別試驗(yàn)。（1）銀鹽沉淀試驗(yàn)。取上述3批樣品，按照藥典附錄Ⅲ的方法（從結(jié)構(gòu)判定為有機(jī)堿的鹽酸鹽）進(jìn)行試驗(yàn)（即：先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進(jìn)行試驗(yàn)），其試驗(yàn)現(xiàn)象與結(jié)果均與附錄Ⅲ的描述不一致（實(shí)際情況為：加入氨試液后，開始迅速生成白色沉淀，振搖時(shí)，沉淀又慢慢溶解并生成油狀物，無法濾除本應(yīng)除去的普魯卡因沉淀；在后續(xù)操作中加氨試液時(shí)，氯化銀溶解卻又析出普魯卡因沉淀，使沉淀與溶解的現(xiàn)象不能明顯區(qū)分），致使檢驗(yàn)者無法作出正確判斷。經(jīng)試驗(yàn)，如按普通氯化物的方法操作（即：不預(yù)先加入氨試液而直接將供試品溶液加稀硝酸酸化）則可以很好地對(duì)氯化物進(jìn)行驗(yàn)證，反應(yīng)現(xiàn)象與附錄Ⅲ所描述的一致。（2）氯氣生成試驗(yàn)。對(duì)比上述標(biāo)準(zhǔn)可知，鹽酸普魯卡因注射液是取“本品”（即：直接取鹽酸普魯卡因注射液）而附錄Ⅲ是取“供試品”進(jìn)行氯氣生成試驗(yàn)，兩者的規(guī)定不具等同性。為驗(yàn)證2種方法的可行性，筆者分別對(duì)上述3批樣品按“本品”及“2.1.2”項(xiàng)鑒別（3）項(xiàng)下的殘?jiān)ā叭”酒芳s相當(dāng)于鹽酸普魯卡因80 mg，水浴蒸干……”）進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果直接法未能生成氯氣，未使用水濕潤的碘化鉀淀粉試紙顯藍(lán)色；而殘?jiān)ǖ姆磻?yīng)現(xiàn)象非常明顯，同時(shí)可以聞到氯氣特有的刺激性氣味。2.3.2 芳香第一胺類鑒別試驗(yàn)。取上述3批樣品進(jìn)行該試驗(yàn)，均生成猩紅色沉淀，而共性標(biāo)準(zhǔn)（附錄Ⅲ）的描述為“視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀”，這種供試品與顏色不是一一對(duì)應(yīng)關(guān)系的描述可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)論（對(duì)一個(gè)首次做該品種此項(xiàng)鑒別試驗(yàn)的檢驗(yàn)者而言，由于沒有借鑒，如果試驗(yàn)結(jié)果是生成橙黃色沉淀或紅色沉淀，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的字面表述，都可以判斷為呈正反應(yīng)、符合規(guī)定，顯然這是錯(cuò)誤的）。

3 討論

3.1 品種特殊性

從鹽酸普魯卡因鑒別（1）[5]得知，其在堿性溶液中于加熱的條件下是可以發(fā)生反應(yīng)而溶解的。而本試驗(yàn)證實(shí)，鹽酸普魯卡因注射液在室溫的條件下（10～30℃）也可以溶于以氨試液調(diào)節(jié)的堿性溶液中，所以不能通過預(yù)先調(diào)節(jié)溶液為堿性除去普魯卡因。若按一般情況處理則不會(huì)發(fā)生上述問題，因?yàn)閷?duì)鹽酸普魯卡因而言，加稀硝酸使成酸性后，普魯卡因在此環(huán)境中是以鹽態(tài)溶于體系中的，滴加硝酸銀試液所生成白色凝乳狀沉淀正是氯化銀；分離時(shí)，硝酸普魯卡因一起隨溶液被棄去，往后的操作不必?fù)?dān)心被其干擾。建議將附錄Ⅲ中的表述“……須先加氨試液使成堿性……”修改為“……必要時(shí)先加氨試液使成堿性……”，檢驗(yàn)者則優(yōu)先按一般方法進(jìn)行試驗(yàn)，若有生物堿或有機(jī)堿干擾再考慮加氨試液將其除去，這樣的表述才沒有歧義，并可兼顧一些特殊品種；也可以將該鑒別方法在品種項(xiàng)下予以詳述。

3.2 物態(tài)兼顧性

藥典附錄Ⅲ中使用“供試品”及“供試品溶液”這2個(gè)修飾詞是有區(qū)別的：“供試品”是指某一樣品物質(zhì)，一般是固態(tài)的；而“供試品溶液”一般是指某一樣品物質(zhì)的水溶液（未指明何種溶劑時(shí)），其是液態(tài)的。如果標(biāo)準(zhǔn)要求以“供試品”和（或）“供試品溶液”進(jìn)行不同的鑒別試驗(yàn)，檢驗(yàn)者必須嚴(yán)格按照規(guī)定操作，否則可能無法作出正確鑒別。現(xiàn)根據(jù)氧化還原反應(yīng)中的有關(guān)原理及能斯特方程式[6]對(duì)此進(jìn)行分析，在標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)（20℃，各物質(zhì)的量均為1 mol/L）下，MnO2+4H++2e→Mn2++2H2O的E0（V）為1.208，而Cl2+2e→2Cl－的E0（V）為1.358 3，此時(shí)是不能生成氯氣的。為逆轉(zhuǎn)上述反應(yīng)從而生成氯氣，該反應(yīng)體系必須ε＝1.208+（0.059 2/2）lg（[MnO2][H+]4/[Mn2+]）－1.358 3－（0.059 2/2）lg（PCl2/[Cl－]2）＞0。假設(shè)取本品1 ml、二氧化錳1 g、硫酸1 ml進(jìn)行試驗(yàn)，則[Cl－]約為0.04 mol/L（注射液規(guī)格：40 mg∶2 ml，分子量為272.77）[5]；[MnO2]/[Mn2+]、PCl2為一定值。此時(shí)以“殘?jiān)弊鞣磻?yīng)物的[H+]、[Cl－]為上述反應(yīng)體系中的2倍、50倍，影響分別為24＝16倍、502＝2 500倍，即：反應(yīng)體系有水時(shí)，不利于氯氣的生成，當(dāng)[H+]、[Cl－]小到一定數(shù)值（即水越多）時(shí)，ε≤0，則將不能生成氯氣；當(dāng)反應(yīng)體系的水很少或基本無水時(shí)，[MnO2]/[Mn2+]及PCl2不變，[H+]、[Cl－]均很大，則越有利于氯氣的生成。所以，為確保反應(yīng)的順利進(jìn)行并體現(xiàn)重現(xiàn)性，按藥典附錄Ⅲ的要求，以“供試品（殘?jiān)边M(jìn)行試驗(yàn)是最妥的，但鹽酸普魯卡因注射液標(biāo)準(zhǔn)的表述過于節(jié)省篇幅導(dǎo)致描述過于簡單，忽略了物態(tài)要求，造成了顧此失彼的局面。應(yīng)將與共性規(guī)定不同的標(biāo)準(zhǔn)部分在品種中表述，相同部分再標(biāo)明“按附錄Ⅲ……”即可消除歧義。

3.3 結(jié)果唯一性

芳香第一胺類鑒別試驗(yàn)是一大類物質(zhì)的鑒別試驗(yàn)，作為這類物質(zhì)的共性描述，兼顧了所有物質(zhì)的反應(yīng)現(xiàn)象，所以描述為“視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀”，這是一個(gè)較寬的顏色區(qū)域描述。然而，對(duì)于具體品種來說，其反應(yīng)后生成是唯一的、固定的顏色，其與共性描述不是一一對(duì)應(yīng)關(guān)系，必須在具體品種中標(biāo)明，否則則失去鑒別意義。建議所有屬于芳香第一胺類的藥物都應(yīng)在具體品種中明確規(guī)定其生成的顏色，方可消除誤判。

3.4 項(xiàng)目延續(xù)性

2010年版藥典中，從段落及序號(hào)編排來看，鹽酸普魯卡因注射液鑒別試驗(yàn)有3項(xiàng)，而從內(nèi)容上看應(yīng)有4項(xiàng)，其中鑒別試驗(yàn)（1）包含了鹽酸普魯卡因鑒別試驗(yàn)的（3）、（4）共2項(xiàng)。這樣一來，不但造成與鹽酸普魯卡因鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目數(shù)量與順序不一致，還導(dǎo)致檢驗(yàn)者對(duì)項(xiàng)目把握的偏差、檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具檢驗(yàn)項(xiàng)目數(shù)的困惑性和隨意性，甚至可能引起不必要的爭(zhēng)議或法律糾紛，這種過于自由的裁決度相當(dāng)于將標(biāo)準(zhǔn)缺陷所帶來的風(fēng)險(xiǎn)轉(zhuǎn)移到檢驗(yàn)者及檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)身上。筆者認(rèn)為，將現(xiàn)行版標(biāo)準(zhǔn)中的（3）、（4）項(xiàng)分別修改為（1）、（2）項(xiàng)，而將（1）項(xiàng)拆分為與鹽酸普魯卡因（3）、（4）項(xiàng)鑒別試驗(yàn)一致的內(nèi)容表述即能消除由此所產(chǎn)生的所有問題。鹽酸普魯卡因注射液鑒別試驗(yàn)（1）之所以出現(xiàn)上述問題，是由于標(biāo)準(zhǔn)2次轉(zhuǎn)述后出現(xiàn)項(xiàng)目合并的情況，這種情況僅僅是由描述不當(dāng)引起而不是原文的含義，是過度節(jié)省篇幅所產(chǎn)生的。這種節(jié)省篇幅思路引發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)缺陷應(yīng)引起相關(guān)部門足夠重視，應(yīng)注意品種標(biāo)準(zhǔn)與共性標(biāo)準(zhǔn)之間的連貫性與涵接度，使所引用的不同標(biāo)準(zhǔn)之間具有很好的邏輯性、流暢性。

3.5 修改建議

綜上所述，筆者建議將鹽酸普魯卡因注射液鑒別試驗(yàn)（1）修改如下：（3）取本品，加稀硝酸酸化后，應(yīng)顯氧化物的鑒別反應(yīng)（1）；取本品2 ml蒸干，殘?jiān)鼞?yīng)顯氧化物的鑒別反應(yīng)（2）。（4）取本品，按芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)產(chǎn)生猩紅色沉淀。

[1]衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：藥典注釋：二部[S].1990年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1990：603-605.

[2]衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：二部[S].1995年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1995：713、附錄14-16.

[3]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：二部[S].2000年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2000：685、附錄23-25.

[4]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：二部[S].2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：580、附錄20-21.

[5]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：二部[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：793-794、附錄20-22.

[6]章琦.無機(jī)化學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：160-170.