菥蓂的化學成分研究

潘 正，高運玲，劉 毅，楊榮平

(1.重慶郵電大學生物信息學院，重慶 400065;2.重慶市中藥研究院，重慶 400065)

菥蓂，雙子葉植物綱十字花科植物菥蓂Thlaspi arvense Linn.的全草。我國大部分地區(qū)均有分布。菥蓂性辛，味溫，清肝明目、和中利濕、解毒消腫。國內(nèi)外針對菥蓂開展的系統(tǒng)研究甚少［1］，僅通過初步的植物化學研究知其含黑芥子苷(sinigrin)、脂肪油、揮發(fā)油、卵磷脂等成分，本實驗主要對中藥菥蓂中化學成分進行深入研究，并為尋找抗腫瘤活性成分打下一定基礎(chǔ)。

1 儀器、藥材及試劑

柱色譜硅膠和薄層硅膠(青島海洋化工廠);Sephadex LH-20(Pharmacia);NMR用500 MHz核磁共振波譜儀;中高壓柱層析系統(tǒng)(AKTA Purifier 100);藥材2009年9月購自四川阿壩藏族自治州，經(jīng)重慶郵電大學生物信息學院劉毅副教授鑒定為十字花科植物菥蓂Thlaspi arvense Linn.的干燥全草。

2 提取分離

取中藥菥蓂干燥全草約10 kg，粉碎，用95%乙醇80℃回流提取3次，每次1.0 h，減壓回收乙醇得浸膏，加入適量水混懸后，分別用石油醚、乙酸乙酯進行萃取。乙酸乙酯部分硅膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯系統(tǒng)梯度洗脫，反復(fù)Sephadex LH-20純化，得化合物1(8 mg)、2(11 mg)、3(6 mg)。水溶液部分Diaion HP-20樹脂吸附，依次用水及30%、50%、95%乙醇分別洗脫，得30%乙醇洗脫物21.35 g，50%乙醇洗脫物86.11 g，95%乙醇洗脫物12.67 g。取95%乙醇洗脫物(12.67 g)采用CHCl3-MeOH-H2O系統(tǒng)梯度洗脫，反復(fù)ODS C18和Sephadex LH-20純化，得化合物4(12 mg)，5(9 mg)、6(5 mg)、7(18 mg)。取30%乙醇洗脫物(21.35 g)采用CHCl3-MeOH-H2O系統(tǒng)梯度洗脫，反復(fù) ODS C18和Sephadex LH-20純化，得化合物 8(6 mg)、9(8 mg)、10(12 mg)、11(10 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1:淺黃色粉末，分子式為C15H10O6。ESI-MS(m/z):287［M+H］+，596［2M+H+Na］+，285 ［M-H］－，571 ［2M-H］－。1H-NMR(DMSO-d6)δ:12.96(1H，s，5-OH)，7.40(1H，dd，J=2.4，8.4 Hz，H-6)，7.39(1H，d，J=2.4 Hz，H-2)，6.88(1H，d，J=8.4 Hz，H-5)，6.65(1H，s，H-3)，6.43(1H，d，J=2.4 Hz，H-8)，6.17(1H，d，J=2.4 Hz，H-6)。13C-NMR(DMSO-d6)δ:181.6(C-4)，164.1(C-7)，163.9(C-2)，161.4(C-5)，157.3(C-9)，149.7(C-4)，145.7(C-3)，121.5(C-1)，118.9(C-6)，116.0(C-5)，113.3(C-2)，103.6(C-3)，102.8(C-10)，98.8(C-6)，93.8(C-8).以上數(shù)據(jù)與文獻 ［2］一致，確定化合物2為木犀草素(luteolin)。

化合物2:淡黃色粉末，mp＞300℃。EI-MS(m/z):270 ［M+，100］，242(15)，153(16)，121(12)。1H-NMR(CD3OD)δ:7.84(2H，d，J=8.4 Hz，H-2'，6')，6.92(2H，d，J=8.4 Hz，H-3'，5')，6.58(1H，s，H-3)，6.45(1H，d，J=1.8 Hz，H-8)，6.20(1H，d，J=1.8 Hz，H-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［3］基本一致，確定化合物2為芹菜素。

化合物3:淡黃色粉末(甲醇)，鹽酸-鎂粉試驗呈紅色。ESI-MS(m/z):301［M+H］+。1HNMR(DMSO-d6) δ:3.85(3H，s，4-OCH3)，7.08(1H，d，J=8.8 Hz，5-H)，7.41(1H，d，J=2.0 Hz，2-H)，7.54(1H，dd，J=8.8，2.0H z，6-H)，6.74(1H，s，3-H)，6.18(1H，d，J=2.4 Hz，6-H)，6.45(1H，d，J=2.4 Hz，8-H)，10.83(1H，s，3-OH)，9.44(1H，s，7-OH)，12.97(1H，s，5-OH)。13C-NMR(DMSO-d6) δ:163.5(C-2)，103.7(C-3)，181.7(C-4)，157.3(C-5)，98.8(C-6)，164.2(C-7)，93.8(C-8)，161.4(C-9)，103.5(C-10)，118.7(C-1)，112.9(C-2)，146.8(C-3)，151.1(C-4)，112.1(C-5)，123.0(C-6)，55.7(OMe)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［4］基本一致，確定化合物3為diosmetin。

化合物4:白色粉末。分子式C28H34O15，相對分子質(zhì)量 610。1H-NMR(DMSO-d6)δ:1.18(3H，d，J=6.0 Hz，Rha-CH3)，2.76和 3.10(2H，H-3)，3.2～3.9(10H，rhamnosy lglucose)，3.88(OCH3)，5.13(d，J=1.1 Hz，Rha H-1)，5.18(1H，d，J=6.5 Hz，Glu H-1)，5.51(1H，H-2)，6.14(1H，H-6)，6.18(1H，H-8)。13C-NMR(DMSO-d6)δ:96.9(C-4)，165.1(C-9)，163.0(C-5)，162.4(C-7)，147.9(C-4')，146.4(C-5')，130.9(C-l')，117.9(C-6')，114.0(C-2')，112.0(C-3')，103.3(C-l0)，100.5(Glu-1)，99.4(Rha-1)，96.3(C-6)，95.5(C-8)，78.3(Glu-5)，76.2(C-2)，75.5(Glu-3)，72.9(Rha-4)，72.0(Glu-2)，70.6(Glu-4)，70.2(Rha-2)，69.5(Rha-3)，68.2(Rha-5)，66.0(Glu-6)，55.6(-OCH3)，42.2(C3)，17.8(Rha-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［5］一致，確定化合物4為新橙皮苷。

化合物5:黃色粉末(甲醇)，薄層噴以AlCl3試劑紫外燈下顯黃色熒光，鹽酸-鎂粉反應(yīng)為陽性，Molish反應(yīng)為陽性，提示該化合物為黃酮苷。1HNMR(DMSO-d6)δ:6.43(1H，d，J=2.4 Hz，H-6)，6.76(1H，d，J=2.4 Hz，H-8)，6.78(1H，s，3-H)，7.42(1H，d，J=1.8 Hz，H-2')，6.89(1H，d，J=8.1 Hz，H-5')，7.45(1H，dd，J=8.1，1.8 Hz，H-6')，12.98(1H，s，5-OH)。13CNMR(DMSO-d6)δ:164.7(C-2)，103.4(C-3)，182.1(C-4)，163.1(C-5)，99.7(C-6)，161.3(C-7)，94.9(C-8)，157.1(C-9)，105.5(C-10)，121.6(C-1')，113.8(C-2')，145.9(C-3')，150.1(C-4')，116.2(C-5')，119.4(C-6')，100.0(glc-1)，73.3(glc-2)，76.6(glc-3)，69.7(glc-4)，77.3(glc-5)，60.8(glc-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［6］一致，確定化合物5為Luteolin-7-O-β-O-glucoside。

化合物6:黃色針晶，mp 222～224℃，F(xiàn)ABMS(m/z):433 ［M+H］+。1H-NMR(DMSO-d6)δ:13.55(1H，s，5-OH)，7.92(2H，d，J=8.9 Hz，H-2'，H-6')，6.92(2H，d，J=8.9 Hz，H-3'，H-5')，6.78(1H，s，H-3)，6.51(1H，s，H-8)，4.59(1H，d，J=9.8 Hz，glucosyl H-1")，4.03～3.11(6 H，m，glucosylH)。13C-NMR(DMSO-d6)δ:163.5(C-2)，102.7(C-3)，181.9(C-4)，156.2(C-5)，108.8(C-6)，163.2(C-7)，93.6(C-8)，161.1(C-9)，103.4(C-10)，121.1(C-1')，128.4(C-2'，6')，115.9(C-3'，5')，160.6(C-4')，78.9(C-1″)，73.0(C-2″)，70.5(C-3″)，70.2(C-4″)，81.5(C-5″)，61.4(C-6″)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［7］基本一致，確定化合物6為異牡荊苷(isovitexin)。

化合物7:黃色粉末(甲醇)，mp 270～272℃，HCl-Mg反應(yīng)陽性。UV(MeOH)λmax:270，326 nm。ESI-MS(m/z):611 ［M+H］+，609［M-H］－。1H-NMR(DMSO-d6)δ:12.92(1H，s，5-OH)，8.06(2H，d，J=9.0 Hz，H-2'，6')，7.16(2H，d，J=9.0 Hz，H-3'，5')，6.96(1H，s，H-3)，6.80(1H，d，J=2.4 Hz，H-8)，6.47(1H，d，J=2.4 Hz，H-6)，5.07(1H，d，J=7.8 Hz，H-1″)，4.56(1H，d，J=1.2 Hz，H-1)，3.87(3H，s，-CH3)，1.09(3H，d，J=6.0 Hz，Rha-CH3)。13C-NMR(DMSO-d6) δ:163.9(C-2)，103.8(C-3)，182.0(C-4)，161.1(C-5)，99.9(C-6)，162.9(C-7)，94.8(C-8)，157.0(C-9)，105.4(C-10)，122.7(C-1')，128.4(C-2'，C-6')，114.7(C-3'，C-5')，162.4(C-4')，99.6(C-1″)，73.0(C-2″)，76.2(C-3″)，70.7(C-4″)，75.6(C-5″)，66.0(C-6″)，100.5(C-1)，70.3(C-2)，69.6(C-3)，72.0(C-4)，68.3(C-5)，17.8(C-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［8］一致，確定化合物7為蒙花苷。

化合物 8:1H-NMR(CDCl3)δ:6.04-5.86(1H，m，4-H)，5.29(1H，ddt，J=33.7，4.2，2.0 Hz，3-Ha)，5.04(1H，ddt，J=20.0，4.0，2.0 Hz，3-Hb)，3.62(4H，dt，J=12.4，2.0 Hz，3-H)。13CNMR(CDCl3)δ:133.4(C-4)，115.0(C-3)，111.8(C-2)，38.9(C-5)。與文獻 ［7］基本一致，故鑒定化合物8為3-thiocyanato-1-propene。

化合物9:1H-NMR(CDCl3)δ:7.51(1H，s，NH)，7.39(1H，d，J=14.8 Hz，H-6)，7.27(1H，t，J=3.0 Hz，H-4)，6.96(1H，dd，J=14.9，3.0 Hz，H-5)，5.68(1H，d，J=2.9 Hz，H-3)，4.57(s，5-OH)，3.19(s，2-OH)。13C-NMR(CDCl3)δ:152.4(C-5)，145.8(C-2)，134.1(C-8)，127.3(C-9)，112.5(C-6)，111.6(C-7)，109.0(C-4)，75.7(C-3)。與對照品共薄層，Rf相同，且與對照品混合熔點不下降，故鑒定化合物9為2，5-二羥基吲哚。

化合物10:白色顆粒狀結(jié)晶(石油醚-醋酸乙酯)，易溶于三氯甲烷。mp 61～62℃。EI-MS(m/z):256 ［M］+。1H-NMR(CDCl3)δ:2.35(2H，t，J=7.6 Hz)，1.63(2H，m)，1.25(24H，br.s)，0.88(3H，t，J=6.8 Hz)。13C-NMR(CDCl3)δ:180.7(C-16)，34.1(C-15)，31.9(C-14)，29.6(C-13)，29.4(C-12)，29.3(C-11)，29.2(C-10)，29.0(C-9)，24.6(C-8)，22.7(C-7)，14.1(C-6)。與棕櫚酸對照品共薄層，Rf相同，且與對照品混合熔點不下降，確定化合物10為棕櫚酸。

化合物11:白色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，mp 54～56℃。與十三酸對照品共薄層，Rf相同，且與對照品混合熔點不下降，確定化合物11為十三酸。

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