Survivin表達(dá)與宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅰ級(jí)預(yù)后的關(guān)系研究

鄧鵬飛左 艷閆彩平郭曉紅

（1 珠海市人民醫(yī)院婦科，廣東 珠海 519000；2 珠海市人民醫(yī)院病理科，廣東 珠海 519000）

Survivin表達(dá)與宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅰ級(jí)預(yù)后的關(guān)系研究

鄧鵬飛1左 艷1閆彩平1郭曉紅2

（1 珠海市人民醫(yī)院婦科，廣東 珠海 519000；2 珠海市人民醫(yī)院病理科，廣東 珠海 519000）

目的 探討 Survivin 表達(dá)與宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅰ級(jí)（CIN Ⅰ）預(yù)后的關(guān)系，為 CIN Ⅰ病情的變化提供相應(yīng)的參考指標(biāo)。方法 收集我院經(jīng)病理確診為 CIN Ⅰ但未予以任何治療措施的患者 49 例，隨訪 1 年后，根據(jù)病情變化情況分為 2 組，其中病情消退的患者 26 例（消退組），病情持續(xù)或進(jìn)展的患者 23 例（持續(xù)及進(jìn)展組），并選擇 30 例正常宮頸組織者作為對(duì)照組，對(duì)三組的 Survivin 蛋白表達(dá)情況進(jìn)行比較分析。結(jié)果 Survivin 蛋白在持續(xù)或進(jìn)展組的陽性表達(dá)率顯著高于消退組（χ2=10.94，P＜0.01）。Survivin 蛋白呈陽性表達(dá)標(biāo)本中，持續(xù)及進(jìn)展組與消退組的標(biāo)本例數(shù)的差異不顯著（χ2=3.56，P＞0.05）。而 Survivin 蛋白呈陰性表達(dá)的標(biāo)本中，消退組的標(biāo)本例數(shù)顯著高于持續(xù)及進(jìn)展組的標(biāo)本例數(shù)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=18.62，P＜0.01）。結(jié)論 CIN Ⅰ持續(xù)或進(jìn)展期患者 Survivin 的陽性表達(dá)概率較高，CIN Ⅰ消退期患者Survivin 的陰性表達(dá)情況較高。

Survivin；CIN Ⅰ；預(yù)后；相關(guān)性

子宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）由宮頸良性病變逐步發(fā)展而來，并可進(jìn)一步發(fā)展為原位癌及浸潤(rùn)癌，因?qū)m頸癌逐漸年輕化，發(fā)病率也逐年上升，臨床上加強(qiáng)了CIN的檢測(cè)水平的改進(jìn)，提高了CIN的檢出率[1]。但對(duì)預(yù)后情況，仍缺乏較好的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)。有文獻(xiàn)報(bào)道，CIN Ⅰ患者存在55%～65%的概率可能自行消退，從而對(duì)臨床治療產(chǎn)生一定的影響，并可能出現(xiàn)過度治療的情況[2]。Survivin為凋亡抑制蛋白家族的新成員，只在腫瘤及胚胎組織中表達(dá)，具有腫瘤特異性。作為一種凋亡抑制基因，具有抑制凋亡效應(yīng)蛋白酶Caspase的活性、參與細(xì)胞周期的調(diào)控、對(duì)細(xì)胞的有絲分裂進(jìn)行調(diào)節(jié)及促進(jìn)細(xì)胞增殖等多種作用[3]。本文通過研究Survivin表達(dá)與宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN） Ⅰ預(yù)后的關(guān)系，旨在對(duì)CIN Ⅰ病情的消退、持續(xù)或進(jìn)展判斷上提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

珠海市人民醫(yī)院門診及婦科于2006年8月至2011年8月經(jīng)宮頸活檢或子宮切除標(biāo)本602例，經(jīng)病理醫(yī)師確診后，其中155例為CINⅠ，余病例均為正常宮頸組織、宮頸非特異性炎性病變、CIN Ⅱ、CINⅢ及宮頸癌患者。對(duì)其中49例未予以任何治療措施CINⅠ患者的組織蠟塊進(jìn)行存檔，同時(shí)對(duì)其進(jìn)行隨訪，隨訪時(shí)間均為1年，按CINⅠ的病情變化程度將49例患者分為2組，其中病情自行消退的患者26例（消退組），年齡28～45歲，平均年齡為（37.7±5.3）歲；病情持續(xù)（19例）或進(jìn)展（4例）的患者23例（持續(xù)及進(jìn)展組），年齡29～47歲，平均年齡（38.9±6.2）歲；同時(shí)，選取30例正常宮頸組織者作為對(duì)照組，年齡29～52歲，平均年齡（39.6±7.1）歲。

1.2 方法

將對(duì)照組30例正常宮頸組織及49例未予以任何治療措施CINⅠ患者的存檔組織標(biāo)本予以10%福爾馬林進(jìn)行固定，采用石蠟包埋，4μm厚度連續(xù)切片，予以常規(guī)HE染色，并在光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)后進(jìn)行病理診斷及分組。采用SP法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，具體操作過程嚴(yán)格遵守說明書進(jìn)行。予以PH6.0檸檬酸緩沖液高溫高壓進(jìn)行抗原修復(fù)，將乳腺癌陽性片作為陽性對(duì)照，以PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照。全部試劑盒及兔抗人Survivin單克隆抗體工作液均由上海賽亞生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 結(jié)果評(píng)判[4]

在光鏡下觀察，Survivin蛋白表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞核定位，其陽性標(biāo)志為細(xì)胞核被染成棕色，每例隨機(jī)觀察5個(gè)視野，每個(gè)視野均計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，將觀察平均值記錄為每張切片的最終結(jié)果，根據(jù)陽性細(xì)胞比率（%）可計(jì)分為：①0分：低于5%；②1分：5%～25%；③2分：26%～50%；④3分：51%～75%；⑤4分：高于75%。將陽性細(xì)胞比率計(jì)分在1分或1分以上的標(biāo)本記為Survivin蛋白染色陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

全部數(shù)據(jù)均采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，陽性表達(dá)率比較采用卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

Survivin蛋白在正常宮頸組織中的陽性細(xì)胞比率均在5%以下，呈陰性表達(dá)，而CINⅠ患者的陽性表達(dá)均顯示細(xì)胞核染色為棕色。其中消退組呈陽性表達(dá)例數(shù)為14例，約占消退組的53.8%，持續(xù)及進(jìn)展組呈陽性表達(dá)例數(shù)為22例，約占持續(xù)組的95.7%，可見，持續(xù)或進(jìn)展組的陽性表達(dá)率顯著高于消退組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=10.94，P＜0.01）。

49例CINⅠ患者經(jīng)隨訪后，消退患者為26例，約占53.1%，49例CINⅠ患者標(biāo)本36例Survivin蛋白呈陽性表達(dá)。其中消退組有14例，約占38.9%（14/36），持續(xù)及進(jìn)展組有22例，約占61.1%（22/36）。13例患者標(biāo)本Survivin蛋白呈陰性表達(dá)，其中消退組12例，約占92.3%（12/13），持續(xù)及進(jìn)展組有1例，約占7.7%（1/13）。可見，Survivin蛋白呈陽性表達(dá)標(biāo)本中，持續(xù)及進(jìn)展組與消退組的標(biāo)本例數(shù)的差異不顯著（χ2=3.56，P＞0.05）。而Survivin蛋白呈陰性表達(dá)的標(biāo)本中，消退組的標(biāo)本例數(shù)顯著高于持續(xù)及進(jìn)展組的標(biāo)本例數(shù)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=18.62，P＜0.01）?？梢?，Survivin呈陰性表達(dá)的患者，其病變消退的概率較大。

3 討 論

有文獻(xiàn)報(bào)道[2]顯示，CIN Ⅰ患者存在55%～65%的概率可能自行消退，因此，對(duì)CIN Ⅰ患者的處理措施通常為隨訪觀察，其中會(huì)存在30%～40%的患者病情會(huì)持續(xù)存在，而5%的患者可能會(huì)進(jìn)展到CINⅡ、CINⅢ，還有部分患者因缺乏隨訪或其他原因從而采取治療措施過度。因此，尋找一種能對(duì)CIN Ⅰ病情變化進(jìn)行預(yù)測(cè)的生物學(xué)指標(biāo)意義重大。

Survivin基因位于人類17號(hào)染色體q25區(qū)，屬于雙功能蛋白，具有調(diào)控細(xì)胞凋亡及細(xì)胞分裂，屬于凋亡抑制蛋白家族的新成員，是目前發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)的凋亡抑制因子[5]。而Survivin在成人終末分化的成熟組織中（胸腺及生殖腺除外）呈較低表達(dá)或不表達(dá)，而在人類絕大多數(shù)腫瘤中均能檢測(cè)到陽性表達(dá)。在生理狀態(tài)下，凋亡過程中對(duì)體內(nèi)異?；蛩ダ系募?xì)胞進(jìn)行清理，從而使機(jī)體組織內(nèi)的平衡得到保持，而在腫瘤發(fā)病的早期，Survivin能直接對(duì)凋亡核心機(jī)制產(chǎn)生作用，通過對(duì)活化的Caspase-3、Caspase-7進(jìn)行粘附，對(duì)凋亡過程進(jìn)行阻斷，使異常基因進(jìn)行聚集，引起細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化，促進(jìn)腫瘤的發(fā)展[6]。本文研究中，持續(xù)及進(jìn)展組Survivin表達(dá)呈陽性表達(dá)的患者約占持續(xù)組95.7%，其陽性表達(dá)率顯著高于消退組（P＜0.01）。說明Survivin的過度表達(dá)可發(fā)生于細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的早期。同時(shí)，本文研究中顯示Survivin蛋白呈陰性表達(dá)的標(biāo)本中，消退組的標(biāo)本例數(shù)顯著高于持續(xù)及進(jìn)展組的標(biāo)本例數(shù)（P＜0.01）?？梢?，Survivin呈陰性表達(dá)的患者，其病變消退的概率較大，并可適當(dāng)?shù)膶?duì)隨訪時(shí)間進(jìn)行延長(zhǎng)。

總之，從本文研究中可見，CINⅠ持續(xù)或進(jìn)展期患者Survivin的陽性表達(dá)概率較高，CINⅠ消退期患者Survivin的陰性表達(dá)情況較高。說明Survivin在CIN Ⅰ預(yù)后情況的預(yù)測(cè)中存在較大的應(yīng)用價(jià)值。

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