漢防己甲素大鼠在體小腸吸收動力學研究

菲索查克+蔣偉哲+黃興振

【摘要】目的：通過大鼠在體小腸吸收實驗方法，研究漢防己甲素（TET）大鼠小腸吸收動力學。方法：采用大鼠在體腸循環方法求算藥物的吸收速率。結果：TET在大鼠小腸內一級吸收速率常數ka為0.7080h-1，吸收半衰期t1/2為0.9790h，剩余百分數R%為26.51%，單位時間吸收百分率P%為36.75%。結論：TET在大鼠中吸收差。

【關鍵詞】漢防己甲素；高效液相色譜法；在體小腸吸收

【中圖分類號】R282.5 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851（2017）12-00-01

漢防己甲素（又名粉防己堿tetrandrine，TET） 是從粉防己的干燥塊根中提取出來的一種雙芐基異喹啉類生物堿，也是含量最高的生物堿[1]。TET具有消炎、鎮痛、降壓、擴張冠脈、抗矽肺、抗凝血、抗炎、抗免疫、抗過敏、降血糖等作用[2-4]。本試驗通過建立大鼠在體小腸[5]實驗模型，考察TET的吸收在大鼠的吸收情況，為該藥物的藥代動力學研究提供參考。

1 儀器與材料

LC-20AT高效液相色譜儀（日本島津）；UV-2201紫外分光光度計（日本島津）；TET（江西金芙蓉藥業有限公司，純度≥98%，批號： 150402）；TET對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號： 110711-200708）；甲醇為色譜純，K-R試液為自制，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 循環液的配制

TET對照品循環液：取適量TET對照品，用酚紅K-R液稀釋成質量濃度為10 mg·L -1的溶液，超聲溶解30min，即得；TET原料藥循環液：取適量TET原料藥，用酚紅K-R液稀釋成質量濃度為80 mg·L -1的溶液，超聲溶解30min，即得。

2.2 酚紅標準曲線

取酚紅10 mg，精密稱定，用K-R試液稀釋至100 mL，作為貯備液。精密量取貯備液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，用K-R試液稀釋至10 mL，得濃度為10，20，30，40，50mg·L -1的酚紅對照品溶液。取各溶液0.5mL加入0.2 mol/L氫氧化鈉溶液5 mL顯色，在波長555nm處測定吸收度。以吸收度A為縱坐標，濃度C（mg/L）為橫坐標進行線性回歸，得方程：A=0.1695C+0.0103，r=0.9998。

2.3 漢防己甲素HPLC含量測定方法的建立

2.3.1 色譜條件

色譜柱：AichmmBond-1C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：0.06% 二乙胺甲醇-水（ 80：20 ）；流速：1mL/min；檢測波長：282 nm；柱溫：25℃；進樣量：20 μL[6]。

2.3.2 系統適用性試驗

空白溶液：取酚紅空白腸循環液1.0mL，置10mL量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度即得；對照品溶液：取TET對照品循環液100mL進行腸循環2h，搖勻，取上述循環液1.0mL，置10mL量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度即得；供試品溶液：取TET原料藥循環液100mL進行腸循環2h，搖勻，取上述循環液1.0mL，置10mL量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度即得。3個溶液按色譜條件進樣測定。結果顯示供試品溶液主峰保留時間與對照品一致，空白無干擾。

2.3.3 標準曲線

精密稱定TET對照品適量，配成10mg·L -1的水溶液，精密吸取0.1，0.5，1.0，2.0，4.0 mL上述溶液，分別置10mL量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，分別得到質量濃度為0.1，0.5，1.0，2.0，4.0mg·L -1的系列對照品溶液，進樣測定，以峰面積A對濃度C（mg·L -1 ）進行線性回歸，得方程A =16531C +507.98 （r=0.99995）。

2.3.4 精密度

取低、中、高3個質量濃度（0.1，1.0，4.0mg·L -1）的TET溶液，測定日內和日問精密度（ n=6）。結果表明，日內RSD分別為0.87%，0.95%，1.22%；日間RSD分別為1.54%，1.28%，1.35%。

2.3.5 穩定性

取供試品溶液，37℃水浴放置，于0，15，30，45，60min取樣測定。結果漢防己甲素質量濃度RSD為1.84% （n=5），表明供試品溶液在60min內穩定性良好。

2.4.1 實驗方法

大鼠稱重，麻醉后加以固定。沿大鼠腹部中線打開腹腔，在十二指腸上部和回腸下部各切一小口，插入直徑為0.3cm的塑料管，結扎，并洗去腸管內容物至凈。將腸管兩端的塑料管與膠管連接成回路。

用37℃的K-R試液以5mL·min-1流速循環10min后，然后用TET原料藥循環液以5mL·min-1流速循環5min后，將流速調節為2.5mL·min-1，立即取樣兩份（1mL和0.5mL各一份）分別作為TET和酚紅零時間樣品，另向燒瓶中補充酚紅K-R循環液2.0mL，每隔15min，按同法取樣及補加酚紅K-R循環液，共取樣9次，停止循環。

2.4.2 樣品測定

TET使用HPLC按“2.3.1”項下色譜條件進樣測定；酚紅使用UV在555nm波長處測定吸收度。

2.4.3 數據處理

通過求算出漢防己甲素的濃度及酚紅的濃度按一級速率方程計算各吸收參數。

2.4.4 結果和結論

根據測定漢防己甲素在6只SD大鼠小腸內各時間段的藥物濃度，計算出吸收常數值如表1。

漢防己甲素在大鼠小腸內ka為0.7080h-1，t1/2為0.9790h，R%為26.51%，P%為36.75%。說明其吸收率較低。在之后的研究中，可嘗試通過改變藥物劑型、加入藥物促吸劑等方法提高藥物的吸收率。

參考文獻：

田代華主編.實用中藥辭典（上卷）.北京：人民衛生出版社，2002.801

CHEN Yu-Jen.Potential role of tetrandrine in cancer therapy.ActaPharmacol Si n，2002， 23 （ 12） ：1102-1106

常新全，丁麗霞.中藥活性成分分析手冊.北京：學苑出版社，2002，961

Chen K，Chen AL.The alkaloids of Han-Fang-Chi.JBiol Chem，1935，109：681-685

張怡，屈勇. 丹參素的大鼠在體腸吸收動力學研究[J]. 中國現代應用藥學，2013，12：1295-1299.

馮碧敏，葉云，張昊.高效液相色譜法測定防己中粉防己堿含量[J].中國藥業，2005，11：36-37.endprint