金花茶葉中2種新化學成分的分離與表征

摘 要：對金花茶葉水提取成分采用柱層析，溶劑萃取，重結晶等手段進行分離提純。從金花茶葉中首次分離出了2個化合物，用TLC、HPLC、測定熔點等方法檢驗了各化合物的純度，并用IR、NMR等手段對其結構進行了結構鑒定。確定它們為山奈酚-3，7-O-α-L-二鼠李糖甙和三萜化合物齊墩果酸。

關鍵詞：金花茶葉；提取；結構

中圖分類號 S571.1 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2013）01-02-18-02

1 引言

金花茶（Camellia chrysantha（ Hu） Tuya ma）系山茶科山茶屬金花茶組，為常綠灌木或小喬木[1]。其分布非常狹窄，只在我國廣西南部和越南北部有分布，國家一級保護植物，是廣西特有的自然資源[2]。金花茶葉為飲用或藥用的主要部位，富含氨基酸、皂苷[3]、黃酮類[4]等多種生物活性成分及多種對人體有重要價值的微量元素，具有提高免疫力，降血脂血糖、抑制腫瘤細胞生長、激活人體多種酶、延緩衰老等多種生理功能[5-6]。

目前對金花茶的研究主要集中在遺傳育種[7]、分類與系統發育[8]、營養繁殖和組織培養等領域[9]，進年來對金花茶的化學學成分以及應用方面的研究逐漸受到重視[10-11]，金花茶資源的開發利用將越來越受到人們的關注。本文采用化學方法定性、UV及HPLC法測定金花茶葉中氨基酸、茶多酚、黃酮含量，分析了防城港地區產金花茶的生化指標，為提高金花茶茶制品的品質和合理選擇制茶原料提供參考。選用磷鉬絡合物法，以人工合成抗氧化劑BHT（二丁基羥基甲苯）為對照，對金花茶葉總黃酮抗氧化能力進行研究探討。這些工作對開拓金花茶的應用范圍，合理應用金花茶，提高金花茶種植的經濟效益有重要意義，同時有利于野生金花茶資源的保護。

2 實驗器材與方法

2.1 材料、試劑與儀器 金花茶葉：2004年秋采于廣西防城港；D-101大孔吸附樹脂（天津富邦化工科技有限公司）、95%乙醇（食用）、乙酸乙酯（A.R）、甲醇（A.R）、甲苯（A.R） 、 氯仿（A.R）、丙酮（A.R）、柱層析用硅膠（200～300目，300～400目）；薄層層析用硅膠GF254。

WS210S型電子天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）；UV200Ⅱ紫外可變波長檢測器（大連依利特分析儀器有限公司）；P200Ⅱ型高效液相色譜儀（大連依利特分析儀器有限公司）；ZF-Ⅱ型三用紫外分析儀（上海顧村電光儀器廠）；Bruker AV500MHz/DRX500超導核磁共振儀（瑞士Bruker公司），氘代溶劑。

2.2 實驗方法 金花茶葉水提取物處理工藝：

金花茶葉→煮沸（3次）→過濾→合并濾液→柱層析→水洗至無色→75%乙醇洗脫→洗脫液干燥→黑色固體→無水乙醇溶解→過濾→干燥→棕黃色固體。

棕黃色固體物質經過反復硅膠柱層析，反復重結晶等操作，得到白色針狀晶體（記為化合物1）和淺還色針狀晶體（記為化合物2）。

3 純度檢驗

化合物1，采用齊氏熔點管熔點測定儀進行熔點測定，測定5次，mp：308～310℃；TLC檢驗，5%的硫酸-乙醇溶液顯色，在紅外燈下烘干，只出現一個紅色斑點；化合物1經HPLC檢驗（圖1），采用歸一化法定量，其純度為99.5%（檢測波長為210nm）。

4 結構鑒定

參考文獻

[1]中國科學院植物研究所. 中國高等植物科屬檢索表[M]. 北京：科學出版社，1979.

[2]中國科學院植物研究所. 中國高等植物圖鑒補編（第二冊）[M].北京：科學出版社， 1983.

[3]蘇 琳， 莫建光， 韋英亮，等. 金花茶葉皂苷類成分研究[J]. 中草藥， 2012，43（5）：877- 879.

[4]陳全斌， 湛志華， 張巧云，等. 金花茶葉中黃酮甙元的分離提純及其表征[J]. 廣西熱帶農業， 2005（6）：10- 11.

[5]朱華， 鄒登峰， 沈潔，等. 金花茶醇提物對人低分化鼻咽癌CNE-2細胞增殖和周期的影響[J]. 山東醫藥， 2012，27（51）：19- 21.

[6]潘慶華， 萬偉慶， 賈桂軍，等. 傅里葉變換紅外光譜法檢測腦腫瘤[J]. 高等學校化學學報， 2010， 9： 1717-172.

[7]柴勝豐， 韋霄， 蔣運生，等. 瀕危植物金花茶開花物候和生殖構件特征[J] . 熱帶亞熱帶植物學報， 2009， 17（1） ： 5- 11.

[8]韋霄， 蔣運生， 唐輝，等. 珍稀瀕危植物金花茶的群落學特征[J]. 廣西植物， 2008， 28（2） ： 183- 190.

[9]秦小明， 寧恩創， 李建強. 金花茶食品新資源的開發利用[J]. 廣西熱帶農業， 2005（3）： 20- 22.

[10]陳全斌.金花茶抗氧化活性成分提取及其含量測定[J]. 廣西熱帶農業，2005 （3）：1-4

[11]韋霄， 黃興， 蔣運生，等. 3 種金花茶組植物提取物的抗氧化活性比較[J]. 中國中藥雜志， 2012， 36（5）：639- 641.

[12]龔運淮. 天然有機化合物的C核磁共振化學位移（第一版）[M].云南科技出版社， 1986：130-132.

[13]馮菊芬.碳水化合物薄層層析的改進[J].光譜實驗室，1995，12（3）：20.

[14]肖崇厚. 中醫化學（第一版）[M].上海科學技術出版社，1998：310.

[15]龔運淮. 天然有機化合物的C核磁共振化學位移（第一版）[M].云南科技出版社，1986：396-401.

[16]龔運淮. 天然有機化合物的C核磁共振化學位移（第一版）[M].云南科技出版社，1986：402.

（責編：施婷婷）