藍靛果組培快繁技術研究

摘要：以藍靛果（Lonicera caerulea L. var. edulis Jurcz et Herd）帶芽莖段為外植體進行組培快繁，考察了激素種類和濃度對外植體增殖及不定芽生根的影響。結果表明，適合外植體增殖的培養基為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA，增殖系數達3.3，適合不定芽生根的培養基為1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA，生根率達72%。

關鍵詞：藍靛果（Lonicera caerulea var. edulis）；組織培養；激素

中圖分類號：S339.4+1 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）03-0706-02

藍靛果（Lonicera caerulea L. var. edulis Jurcz et Herd）為忍冬科忍冬屬多年生落葉小灌木，其果實為藍黑色，橢圓形或長圓形[1，2]，是珍貴的野生漿果，有“果中之王”的美稱，營養價值極高[3-6]。藍靛果果實可生食，也可以加工成果醬、果干、蜜餞等。其果肉多汁，出汁率高，耐腐壞，是釀造果酒飲料的好原料。此外藍靛果果汁色深，呈艷麗的深紅色，是難得的天然色素品，可以用來調配其他果酒和飲料以提高其品質[7-10]。該果實還可入藥，具有清熱解毒、敗火、化濕熱、軟化血管、降低血壓、補血等功能，能強身健骨、消除疲勞、祛風邪、增加食欲，長期食用對預防小兒厭食癥、肝腹水、糖尿病、癌癥、貧血癥和不眠癥有良好功效[10，11]。藍靛果植株自然狀態下主要通過種子繁殖，本研究以藍靛果帶芽莖段為外植體，采用組織培養的方式對其進行快速繁殖，以期為藍靛果的深入開發利用奠定基礎。

1 材料和方法

1.1 材料

藍靛果材料于2010年7月取自吉林省松江河林業局，采集當年生健壯無病蟲害幼嫩藍靛果枝條用于實驗。

1.2 方法

1.2.1 材料消毒 將采集的藍靛果枝條浸入清水中浸泡，同時用軟刷輕輕除去附著在枝條表面的塵土，然后用流水沖洗數次。清洗過的枝條首先用體積分數75%的乙醇消毒30 s，然后用1 g/L氯化汞溶液（加入3～5滴吐溫80）消毒8 min，最后用無菌水徹底漂洗5次，洗凈殘留的升汞。

1.2.2 藍靛果的組織培養 在無菌室超凈工作臺上按照無菌操作的要求將消毒后的藍靛果枝條切割成長1～2 cm的帶芽莖段接種在培養基上，每瓶接種1個外植體。啟動和增殖培養以MS為基本培養基，同時附加不同濃度的細胞分裂素（0.5、1.0、2.0、5.0 mg/L 6-BA）和生長素（0.2 mg/L NAA或0.2 mg/L IBA），pH 5.0，具體培養基配方見表1。觀察和記錄各處理不定芽的萌發和增殖情況。增殖培養60 d后選取壯苗進行生根培養，生根培養基為1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA和1/2MS+1.0 mg/L IBA。啟動和增殖培養、生根培養條件均為培養溫度22～25 ℃、光照時間12 h/d，光照度2 000～3 000 lx。

2 結果與分析

2.1 生長素種類和細胞分裂素濃度對藍靛果不定芽增殖的影響

植物細胞中內源激素和外源激素共同對細胞的分化生長起著控制作用，且每種植物細胞中的內源激素含量不同，導致不同材料適宜的外源激素也不同。藍靛果外植體接種到啟動和增殖培養基上培養，10 d后少數莖段腋芽開始萌動生長，極少數有不定芽增殖，30 d時不定芽數目明顯增加。不同生長素對藍靛果不定芽增殖的作用不同。在其他條件均相同的條件下，添加NAA的1～4號培養基中不定芽萌發率為32%～40%，增殖系數為1.7～2.5。添加IBA的5～8號培養基中不定芽萌發率為38%～42%，增殖系數為2.2～3.5（表2）。可見在藍靛果不定芽的萌發和增殖過程中，IBA對不定芽增殖的促進效果要好于NAA。

培養基中添加的6-BA濃度也對不定芽的萌發和增殖有一定的影響。添加NAA或IBA生長素的處理中，不定芽的增殖系數均隨6-BA濃度的升高呈先增大后減小的趨勢，6-BA濃度為2.0 mg/L時不定芽增殖系數最大。可見，6-BA濃度過高或過低均不利于不定芽的萌發和增殖。8種培養基中MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA的增殖系數最高，達3.3，適合不定芽的增殖培養。

2.2 不同生長素濃度組合對藍靛果不定芽生根的影響

增殖培養60 d后選取壯苗進行生根培養，分別采用1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA和1/2 MS+1.0 mg/L IBA作為生根培養基，30 d后多數試管苗長出不定根，1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA的生根率達72%，遠高于1/2MS+1.0 mg/L IBA培養基（58%），可見在實驗條件下NAA和IBA配合使用的生根效果好于單獨使用IBA。

3 小結與討論

用藍靛果帶芽莖段作為外植體，接種在適宜的增殖培養基上進行快速繁殖，其消毒方法簡單方便，可減少母株本身的剪枝量，而且能保持種質資源的永續利用，這對于規模化生產繁殖十分有利。在藍靛果的組培快繁中，不定芽增殖以MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA 最為適宜，增殖系數達到3.3，而誘導生根時，最適培養基為1/2 MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA，生根率達72%。

參考文獻：

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