摘 要:可以利用食品中總糖的含量來評價該食品的質量、營養(yǎng)以及風味,所以對總糖含量進行精確的測定顯得尤為重要,但是在測定的過程中,會有很多因素會影響測定的最終結果。本文就影響總糖測定的幾個因素進行了一一的分析。
關鍵詞:總糖 直接滴定法 因素
中圖分類號:O655 文獻標識碼:A 文章編號:1672-3791(2013)01(c)-0216-01
現實生活中可以依據食品中總糖的含量來評價其質量、營養(yǎng)以及風味。這主要是因為碳水化合物廣泛存在于動植物體內,是食品的主要成份,人體行為所需要的能量主要是由食物中的糖類提供,這些糖類可以為人類提供十分重要的生理功能,同時有一部分食品工業(yè)也是以它為基礎的來進行生產,由此可見,準確地測定食品中的糖類的含量對于食品的營養(yǎng)評價和食品工藝方面有著十分重要的意義。
1 試驗部分
1.1 實驗原理
測量總糖的含量常用的方法是:直接滴定法,該種滴定法又被叫做快速法,實質上是一種氧化還原滴定法,特點在于操作比較簡易、快捷、并且測定過程中所使用的試劑量少、更為重要的是計算簡便。該種方法采用的原理在于:首先除去樣品中的蛋白,然后對其進行一定的加熱,讓其處于加熱的條件下,然后利用次甲基藍作指示劑,最后利用樣液去滴定被標定過的堿性酒石酸銅溶液,總糖的含量便可以根據樣液消耗的體積來計算。
需要十分注意的一點是:由于該種方法從取樣,制樣到滴定均需要進行手工操作,因此導致了測定的結果不能有很好的準確度,影響結果的因素也是多方面的,尤其是滴定過程,該過程中必須是在沸騰條件下,并且滴定時對滴定的條件要求十分嚴格。
1.2 樣品和試劑
優(yōu)級白砂糖 百色甘化股份有限公司生產。
斐林試劑 按照GB5009.7-85配制;鹽酸、氫氧化鈉、甲基紅指示劑、亞甲基藍指示劑。以上試劑均為分析純。
1.3 儀器
測量的過程中將會用到很多的儀器,比如:
電熱恒溫干燥箱 滴定架;萬分之一電子天平 吸耳球;刻度吸管(1 mL、2 mL、5 mL、10 mL)干燥器;可調電爐(帶石棉網) 玻璃珠;量筒(100 mL、1000 mL);燒杯(250 mL、1000 mL);
100 mL的三角瓶;25 mL的酸式滴定管。
2 結果與討論
2.1 樣液濃度對總糖測定的影響
在測定的過程中首先需要的便是樣液,樣液的選取對于測定結果的精確性十分重要。值得注意的一點是樣液濃度會在一定程度上影響測定的結果,就樣液濃度而言,其指的是:樣品經準確稱量取樣,準確定容后的樣品濃度。
樣品溶液中除單糖分子外,還存在許多其它的物質,比如:蛋白質、氨基酸、維生素、礦物質以及樣品處理試劑的殘余離子等。由于這些物質在溶液中會產生一定的運動,并且運動毫無規(guī)律可言,使得它們彼此間存在離子或分子間的作用力。就這些作用力的效果而言,會在一定程度上約束分子的活性。由相關實驗表明,這些作用力的大小在很大程度上取決于分子間的距離,而樣液濃度則是分子間距離的宏觀體現。可見樣液的濃度大小會在一定程度上直接影響單糖分子的活性,即樣液的濃度越高,活性則會越低,那反應便會越不靈敏。
經過相關實驗可以確定:隨著樣液濃度的升高,總糖含量的測定結果的誤差值越大,就理想的樣液濃度而言,一般應保證在0.1~10 g/100 g,且樣液的滴定量最好保證在15~40 mL的范圍之內。
2.2 堿性酒石酸銅甲、乙液的用量對總糖測定的影響
相關實驗證明堿性酒石酸銅甲、乙液的用量對樣液有一定的影響。
常規(guī)檢測中,考慮到樣液的濃度偏低,不少操作者甚至一些企業(yè)選擇擅自減少甲乙液的用量以求簡便快捷。實際上,這種做法是不可取的。理論上,當甲乙液的用量超過了10 mL時也是可行的,但是由于樣液的濃度較低,則會在一定程度上導致甲乙液的用量增加,進而消耗更多的樣液。需要注意的是:一旦樣液的用量超過了滴定管限定容量便會造成一定的系統(tǒng)誤差,同時終點顯現也就不明顯。通過實驗證實:10 mL甲乙液用量是常規(guī)總糖檢測中較為理想的選擇。
2.3 樣液酸堿度對總糖測定的影響
樣液酸堿度對總糖測定有一定的影響,這主要是因為:樣液中的糖類物質經過酸水解之后將會轉化為具有還原性的單糖,此時的樣液中將會存在一定的酸根離子,使得此時的樣液具有一定強酸性。而測定過程中使用的斐林試劑則屬于強堿性試劑,是烯醇式中間體活性的重要條件之一。當加入,中和部分甚至全部的,進而降低了烯醇式中間體的活性,反應靈敏度下降。當樣液呈現堿性時,pH值對測定的影響不大。
2.4 測定速度對總糖測定的影響
在測定的過程中,滴定是一個需要十分注意的過程,無論幾秒一滴,測得結果的誤差都很大,并且滴定時間越長,得到的結果更不明顯。根據相關規(guī)范,在做總糖實驗時必須嚴格按照國標的方法執(zhí)行。首先應該按照要求進行一定的預滴,然后放入較預滴體積少1 mL的樣液,并使樣液在沸騰情況下以每2 s/d的速度繼續(xù)滴加,這樣的操作才能夠得到比較精確的測定結果。
2.5 轉化后溶液中和前后放置的時間對結果的影響
在測定的過程中需要對原樣液進行一定的轉化,但是當轉化得到的溶液在酸性條件下放置時間較長時,便會使得測得樣品的轉化糖變低,這主要是因為當果糖在酸性介質中長時間存在時,會被破壞。當轉化后的溶液處于堿性條件下時,隨著其放置時間的增加,最后測得轉化糖的結果誤差將會增大,這主要是因為:糖類在堿性介質中逐漸降解生成多種降解物。由此可見,在測定的過程中需要對轉化后的溶液進行及時的中和和滴定,以便保證可以比較精確的測定總糖的含量。
2.6 斐林試劑用量對總糖測定的影響
測定過程中需要使用到的是常為斐林試劑,該種試劑實質上是硫酸銅的堿性溶液,考慮到糖在堿性溶液與硫酸銅之間的反應并不太符合化合量關系,所以在測定總糖含量中,需要使用標準的葡萄糖溶液來進行標定。即便是經過標準標定的斐林試劑,其依然有如下幾個方面的問題:(1)測定過程中,一旦使用的斐林試劑量偏少,便會導致滴定的結果偏低;(2)如果使用的斐林試劑量偏多,就會造成一定的系統(tǒng)誤差。
有相關實驗證實:當斐林試劑用量超過10 mL時也是可行的,但是隨著斐林試劑用量的提高,便會消耗更多的樣液,一旦樣液用量超過了滴定管限定容量便會造成系統(tǒng)誤差。鑒于此,10 mL斐林試劑用量是常規(guī)總糖檢測中較為理想的選擇。
3 結語
在總糖測定中,為了精確地測定,則需要嚴格按標準步驟進行操作,同時也需要理解并掌握每一操作的要領,以便及時應對各種問題。本文的主要目的在于分析導致總糖測定結果出現誤差的原因,一旦測定的結果出現了問題,操作人員便可以考慮斐林試劑用量是否不當;轉化后溶液中和前后放置的時間是否太短或者太長;測定中滴定的速度是否不當等方面。總之,在對總糖含量進行測定的過程中,需要嚴格按照要求進行操作,以便得到更加精確的數據結果。
參考文獻
[1] 黎濤.總糖測定中取樣量的確定[J].熱帶作物機械化,1998(2).
[2] GB5009.7-85食品中總糖的測定.