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中藥活性成分的提取與純化技術(shù)的研究進(jìn)展

2012-12-31 00:00:00谷竹義

【摘 要】中藥作為我國特有的文化瑰寶,已有幾千年的歷史,是積累下來的寶貴財(cái)富。近些年來,中藥的研究與開發(fā)受到了極大的關(guān)注,利用現(xiàn)代科技研究傳統(tǒng)中醫(yī)中藥也取得了巨大進(jìn)展,現(xiàn)代分離純化技術(shù)的不斷發(fā)展,為系統(tǒng)研究中藥化學(xué)組成,明確天然產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu),提供了有力的條件,并為新化合物的發(fā)現(xiàn)奠定了技術(shù)基礎(chǔ)。本文介紹了目前常用的中藥提取與純化技術(shù),并對新技術(shù)進(jìn)行了概述。

【關(guān)鍵詞】中藥;提取與純化

中藥的發(fā)展歷史悠久,其作為我國傳統(tǒng)中醫(yī)理論的主要部分,在保護(hù)我國人民健康,提高人均壽命水平方面,起到了巨大的作用。中藥成分復(fù)雜,同時(shí)注重多種中藥配伍。目前,對其研究的重點(diǎn)主要集中在天然中藥中化合物的系統(tǒng)提取與有效活性化合物的提取與分離上。傳統(tǒng)的提取方法存在周期長,操作繁瑣等缺陷。隨著科學(xué)技術(shù)水平的不斷進(jìn)步和提高,近些年不斷發(fā)展的提取與純化技術(shù),被廣泛應(yīng)用于天然產(chǎn)物的開發(fā)與利用,具有分離周期短,操作簡便,分離得到的產(chǎn)物純度較高等優(yōu)點(diǎn),對系統(tǒng)研究中藥的藥理學(xué)作用,具有極其重要的意義。

1.中藥有效成分的提取方法

中藥提取的傳統(tǒng)方法有:浸漬法、煎煮法、回流法、滲漉法等。傳統(tǒng)方法工作量大,提取效率低,有效成分容易損失,尤其是水不溶性成分。操作的重復(fù)性差,容易對科學(xué)系統(tǒng)分析中藥的化學(xué)組成造成誤差。同時(shí),傳統(tǒng)提取方法中的高溫操作,容易引起中藥中某些熱敏性活性化合物的分解與氧化。

1.1有機(jī)溶劑萃取法

有機(jī)溶劑萃取法是在中藥分離提取中應(yīng)用較多的一種分離方法,其原理是利用有機(jī)溶劑,通過不同的萃取體系,使一些相似極性的化合物從一相轉(zhuǎn)移到另一相中。常用的有機(jī)溶劑有石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇、二氯甲烷等。

1.2微波萃取技術(shù)

微波萃取技術(shù)是一種新興的利用微波進(jìn)行中藥化學(xué)成分提取的技術(shù),近些年來被廣泛應(yīng)用于油脂、色素和黃酮類化合物的提取與分離上。具有提取質(zhì)量高,溶劑消耗少,低耗能,產(chǎn)量大等特點(diǎn)。與其他萃取技術(shù)相比,微波萃取耗能少,耗材少,耗時(shí)短,自動(dòng)化程度高,有利于工業(yè)大規(guī)模提取分離和分離較大量中藥材。目前,微波萃取法已廣泛應(yīng)用于提取生物堿類、蒽醌類、黃酮類、多糖、色素等。

1.3酶法提取技術(shù)

酶法提取技術(shù)是指利用酶的高效催化機(jī)制,通過不同專一性的酶類,酶解胞壁,將中藥植物細(xì)胞中的一些胞內(nèi)成分提取出來,是具有較高提取率的一種新興技術(shù)。其特點(diǎn)是反應(yīng)的條件比較溫和,得到的粗提物不易變性;提取的時(shí)間短,效率高;安全無污染。其中應(yīng)用酶法提取中藥需要注意的幾點(diǎn)是:酶的用量、酶的反應(yīng)時(shí)間、溫度、PH以及所用的提取溶劑。

1.4分子印跡復(fù)合膜

分子印記復(fù)合膜技術(shù)是一種新興分離提取技術(shù),由于其親和能力強(qiáng),具有可連續(xù)操作、能耗低、識別的特異性強(qiáng)等特點(diǎn),近年來被廣泛應(yīng)用于天然中草藥化學(xué)成分的分離。應(yīng)用分子復(fù)合膜印記技術(shù)來分離純化單體化合物,目前比較成熟的有黃酮類和香豆素類的分離純化。

1.5超臨界CO2萃取技術(shù)

超臨界CO2萃取技術(shù)是指利用超臨界流體的一些物化性質(zhì),在超臨界的狀態(tài)下,將超臨界流體與藥材的粗提物進(jìn)行接觸,通過不斷的混合與分離,使中藥粗提物中的化學(xué)成分,按照極性、分子量、沸點(diǎn)等不同的屬性,按照一定的次序,依次被萃取并從中分離。具有安全清潔無污染、成本低、條件可控、生產(chǎn)效率高、能耗小等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于中藥有效成分的分離、食品工業(yè)中色素的提取、天然香料的精制等方面。

2.中藥活性化合物的純化方法

2.1硅膠柱層析技術(shù)

硅膠柱層析技術(shù)是指以硅膠作為固定相,根據(jù)不同物質(zhì)在硅膠上吸附力的不同,通過不同的洗脫溶劑及洗脫梯度,較大極性的物質(zhì)容易被硅膠吸附,極性較弱的物質(zhì)不易被硅膠吸附,然后利用不同種類和不同濃度的洗脫溶劑,從而使物質(zhì)得到分離的技術(shù)。常用的流動(dòng)相有石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇等。具有分離樣品穩(wěn)定,重復(fù)率好,便于中藥成分的系統(tǒng)分離等特點(diǎn)。其缺點(diǎn)是分離周期長,溶劑消耗大。

2.2高速逆流色譜技術(shù)

高速逆流色譜(HSCCC)技術(shù)是近些年來發(fā)展比較快的一種新興技術(shù)。與傳統(tǒng)的液相色譜技術(shù)不同,其特點(diǎn)是,HSCCC的固定相與流動(dòng)相均為液體。由于其固定相和流動(dòng)相都為液體,所以在理論上極少有樣品的損耗,可以實(shí)現(xiàn)樣品的全部回收,近年來,被廣泛應(yīng)用于天然藥物中化學(xué)成分的研究上。最早的高速逆流色譜多被用來進(jìn)行樣品的大量制備,由于技術(shù)的發(fā)展,近些年來出現(xiàn)了分析型高速逆流色譜,其應(yīng)用也日趨廣泛。高速逆流色譜的基本原理是通過利用三根螺旋管柱的機(jī)械螺旋運(yùn)動(dòng),由此產(chǎn)生一定的離心力,建立起一種特殊的單向性流體動(dòng)力學(xué)平衡,通過流動(dòng)相的不斷流入,使平衡的兩相系統(tǒng)不斷的進(jìn)行重新分配,再平衡。由于待分離的樣品中,化合物的分配系數(shù)不同,因此,在兩相系統(tǒng)中進(jìn)行了極性排布,通過流動(dòng)相不斷的流入,化合物被依次洗脫出來。高速逆流色譜法具有無樣品損失、無污染、快捷高效、分離量大等特點(diǎn)。

2.3高效液相色譜技術(shù)

高效液相色譜(HPLC)是指在經(jīng)典液相色譜技術(shù)的基礎(chǔ)上引入氣相色譜理論,從而快速高效進(jìn)行定量和分析的一種新技術(shù)。具有高分辨率、速度快、高靈敏性、色譜柱可重復(fù)使用等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于食品安全檢測、生物化學(xué)、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各個(gè)領(lǐng)域。同時(shí),高效液相色譜技術(shù)可以與其他技術(shù)結(jié)合,如高效液相色譜技術(shù)串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),可以同步得到該化合物的分子量;高效液相色譜技術(shù)同時(shí)也可以串聯(lián)紅外光譜,應(yīng)用于環(huán)境污染分析中。

目前,高效液相色譜技術(shù)較多的應(yīng)用于中藥化學(xué)成分的研究上。分析型高效液相色譜可以快速準(zhǔn)確的進(jìn)行中藥的成分分析,而制備型高效液相通過設(shè)計(jì)相應(yīng)的洗脫梯度,可以對中藥進(jìn)行分離提取,具有分離性好,自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)。

3.結(jié)束語

中藥的研究與開發(fā),對現(xiàn)代醫(yī)藥水平的進(jìn)步起到了巨大的作用。中藥有效成分的提取與純化技術(shù)的發(fā)展,對系統(tǒng)研究中藥的化學(xué)組成,并為深入研究中藥藥理學(xué)作用,揭示中藥藥理學(xué)作用的機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

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