瘦素與端粒酶對良惡性胸腔積液的診斷價值

[摘要] 目的 探討胸腔積液瘦素濃度、端粒酶活性對良惡性胸腔積液的診斷價值。 方法 檢測29例惡性胸腔積液患者胸液中的瘦素濃度和端粒酶活性，以28例良性胸腔積液作對照。 結果 惡性胸腔積液中的瘦素濃度較良性者增高，差異有統計學意義（P < 0.05）；瘦素的敏感性82.76%， 特異性92.86%，準確率87.72%；端粒酶的敏感性89.66%，特異性82.14%，準確率85.96%。結論 瘦素與端粒酶對惡性胸腔積液的診斷與鑒別診斷有一定的臨床價值，聯合檢測瘦素與端粒酶對惡性胸腔積液診斷具有較高的診斷價值。

[關鍵詞] 胸腔積液；瘦素；端粒酶

[中圖分類號] R730.4；R521.7 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2012）28-0135-02

胸腔積液是由多種疾病引起的常見癥狀，準確判斷胸腔積液的性質對于治療方案的擬定有重要臨床意義。細胞學檢查是判斷胸腔積液性質的金標準，但其陽性率較低[1]。因此良、惡性胸腔積液的鑒別診斷在臨床上十分困難，尋找血液和胸腔積液中高敏感性、高特異性的腫瘤標志物是目前研究的熱點。我們對57例胸腔積液患者胸液中的瘦素（leptin）濃度和端粒酶（telomerase）活性進行檢測分析，探討瘦素和端粒酶對胸腔積液性質的診斷價值。現報道如下。

1資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院呼吸內科2009年1月～2011年12月間住院的胸腔積液患者57例，其中惡性胸腔積液29例，經胸水脫落細胞檢查證實，男17例，女12例，平均年齡（69.15±5.82）歲，其中肺癌21例，胃癌胸膜轉移1例，乳腺癌胸膜轉移1例，宮頸癌術后胸腔轉移1例，食管癌胸腔轉移1例，不明原因胸腔轉移癌4例。選擇28例同期住院的良性胸腔積液患者作為對照組，男17例，女11例，平均年齡（67±6.33）歲，經臨床、細胞學檢查等排除惡性腫瘤的可能。

1.2 實驗方法

于超聲定位下胸腔穿刺收集胸液50 mL，30 min內4℃下1 500 rpm離心10 min，棄上清液，用冷PBS液洗滌2次后染色，血細胞計數器計數，將2×105沉渣細胞置入1.5 mL的Epppendorf管中，-70℃保存。冷凍標本測定前室溫下復融，按照DNA提取試劑盒說明采用酚-氯仿法提取胸水沉渣細胞中DNA。采用逆轉錄多聚酶鏈反應-酶聯免疫法（RTPCR-ELISA）測胸腔積液端粒酶的活性，以吸光度（OD值）表示，超過陰性對照孔吸光度的2倍以上為端粒酶陽性，反之為陰性。胸液瘦素濃度的檢測采用雙抗體夾心ELISA法，由上海泰思特臨床檢驗所提供技術支持。

1.3 統計學方法

應用SPSS13.0統計學軟件進行分析，計量資料采用t 檢驗，以（x±s）表示；計數資料采用χ2檢驗， P < 0.05為差異有統計學意義。采用受試者工作特性曲線（ROC）判定胸液瘦素的診斷效能，檢驗水準為α=0.05。

2 結果

2.1 胸腔積液中瘦素濃度與端粒酶活性

惡性胸腔積液組胸液瘦素濃度（42.32±12.45）ng/L，顯著高于良性胸腔積液組（16.12±9.85）ng/L，兩組間比較差異有統計學意義（P < 0.05）。惡性胸腔積液組胸液端粒酶活性（OD值）為（0.86± 0.26），良性胸腔積液組胸液端粒酶活性為（0.08±0.06），兩組間比較差異有統計學意義（P < 0.05），見表1。惡性胸腔積液組29例中有23例檢測出端粒酶基因表達，28例良性胸腔積液中有3例有端粒酶基因表達，惡性胸腔積液中端粒酶基因的表達高于良性胸腔積液組，兩組間比較差異有統計學意義（χ2=39.6，P< 0.01 ）。

表1 胸腔積液中瘦素濃度與端粒酶活性比較（x±s）

注：*與良性胸腔積液組比較，P < 0.05

2.2 ROC曲線對胸液瘦素診斷價值的判斷

ROC曲線下面積（AUC）為0.834，面積的標準誤為0.052，綜合考慮敏感性、特異性時最佳臨界值選為26.5 ng/L，敏感性0.81、特異性0.76（圖1）。

圖1 ROC曲線對胸液瘦素診斷價值的判斷

2.3 兩種腫瘤標志聯合檢測的診斷效能

聯合檢測胸液中的端粒酶活性和瘦素濃度，如果以其中1項指標陽性作為對惡性胸腔積液的診斷依據（平行試驗），則敏感性為96.55%、特異性為75.00%，敏感性提高，但特異性降低；若以2項指標均陽性作為對惡性胸腔積液的診斷依據（串行試驗），敏感性為75.86%、特異性為96.43 %，敏感性降低，特異性提高。見表2。

表2 胸腔積液端粒酶和瘦素診斷效能的評價（%）

3 討論

胸腔積液是臨床常見的癥狀，多種疾病可導致胸腔積液的發生，包括惡性腫瘤、結核、肝硬化及充血性心力衰竭等。準確判斷胸腔積液的性質對于選擇合適的治療方式、判斷原發疾病的嚴重性和預后具有重要的臨床價值。脫落細胞學檢查作為確診惡性胸腔積液的金標準，但其陽性率僅為30%，即使反復送檢其陽性率也僅提高到50%，敏感性較低，容易漏診。因此，本文探索聯合胸腔積液中瘦素濃度、端粒酶活性檢測對惡性胸腔積液的診斷與鑒別診斷價值。

目前認為端粒酶是一種最為廣譜的腫瘤標記物，大約腫瘤細胞80%～90%表達端粒酶活性[2]。端粒酶是一種RNA依賴的DNA多聚酶，端粒酶以自身的RNA 為模板，合成位于染色體末端的一段富含5′-TTAGGG-3′的特異性DNA序列（端粒），以補償細胞分裂過程中端粒的丟失，使細胞得以無限分裂。端粒酶的活性與腫瘤的發生、發展有密切關系。端粒酶在惡性腫瘤的生成和發展方面具有重要作用，端粒酶活性的表達與惡性腫瘤的侵襲轉移及惡性轉化有關，隨著腫瘤分化程度由高到低，端粒酶陽性率呈升高趨勢[3，4]。當腫瘤細胞轉移至胸膜后，胸腔內便產生大量癌性胸水，癌性胸水中含有大量由惡性腫瘤細胞產生的端粒酶。本研究采用RTPCR-ELISA擴增胸液中的端粒酶，對29例惡性胸腔積液患者和28例良性胸腔積液患者進行檢測，結果表明，惡性胸腔積液組較良性胸腔積液組的胸液端粒酶活性顯著升高，組間差異有統計學意義（P < 0.05）。胸液端粒酶的診斷效能為敏感性89.66%、特異性82.14%、準確率85.96%，比文獻報道胸水脫落細胞的診斷價值高。

瘦素（leptin）是主要由脂肪組織產生和分泌的多肽類激素，具有調節能量代謝的作用。近來在腫瘤方面的研究表明，瘦素及其功能性受體表達高低可作為區分組織良惡性的指標。研究發現，瘦素是一種新的促腫瘤生長因子[5]，瘦素能刺激腫瘤組織和腫瘤細胞的分化、增殖[6，7]以及增加腫瘤細胞的侵襲力[8，9]。本研究結果表明，惡性胸腔積液組胸液中的leptin水平高于良性組，組間差異有統計學意義（P < 0.05），說明胸液中的leptin對鑒別良、惡性胸腔積液有一定的臨床意義。通過ROC曲線對胸液瘦素診斷價值的分析發現，ROC曲線下面積（AUC）為0.834，面積的標準誤為0.052，胸液瘦素濃度用于診斷惡性胸腔積液有統計學意義（P = 0.006），胸液瘦素濃度越高，胸腔積液惡性的可能性越大；綜合考慮敏感性、特異性時最佳臨界值選為26.5 ng/L，敏感性0.81、特異性0.76。本研究中，胸液瘦素診斷惡性胸腔積液的敏感性82.72%，特異性92.86%、準確度87.87%。

本研究結果還表明，以1項指標陽性作為對惡性胸腔積液的診斷依據，敏感性96.55%、特異性75.00%；如以2項指標均陽性作為對惡性胸腔積液的診斷依據，敏感性75.86%、特異性96.43%。本研究中單個指標比較：胸水中的leptin的診斷價值與端?；钚愿饔袃灹?；單獨檢測胸液的瘦素和端粒酶對惡性胸液的診斷與鑒別診斷均有一定的診斷價值，但單項指標診斷惡性胸液尚有較大局限性，二者聯合檢測對惡性胸水的診斷有互補價值。

[參考文獻]

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（收稿日期：2012-07-10）