學生科研項目研究工作小結

　　1.項目選題的背景
　　背景：雌激素受體（Estrogen receptor，ER）是配體依賴的類固醇激素核受體超家族成員之一，分為α和β兩種亞型。ER-α位于6q25～1，長140kb，編碼由595個氨基酸殘基組成的蛋白質。ER-α蛋白質一級結構從N端到C端共分為A～F六個功能區：A/B區為轉錄調控區，位于氨基末端，A/B區中有一個非配體依賴性轉錄激活功能區AF-1，它通過和基礎轉錄因、輔助激活因子和其他轉錄因子相互作用，介導信號向下游蛋白傳遞，從而激活靶基因，A/B能調節ER和DNA的相互作用，選擇正確的雌激素應答元件及調控靶基因表達；C區為DNA結合區，是富含堿性氨基酸和半胱氨酸的高度保守區；D區為多變的鉸鏈區，允許受體彎曲、旋轉或構象改變，形成受體二聚體，并與同向或反向重復反應元件結合以發揮作用，D區還含有核定位信號，具有穩定DBD的DNA結合作用；E/F區包括配基結合區，共調節因子結合表面、二聚化區和配基依賴性轉錄激活功能區AF-2。
　　2000年，Flouriot等研究首次發現ER-α66（傳統觀念的ER-α）的同源異構體。同先前的ER-α66相比，它剪切了A、B區，缺乏N末端173個氨基酸，分子量為46KD，故被命名為ER-α46。
　　2005年，王兆一等研究首次報告ER-α66的另一同源異構體——ER-α36，它剪切了A、B區及F區，缺乏N末端173個氨基酸及CN末端138個氨基酸，分子量為36KD，故被命名為ER-α36，且初步證明了ER-α36表達不完全依賴ER-α66，其功能類似于生長因子受體，很可能參與抑制ER-α66介導的經典雌激素信號傳導通路并激活細胞膜介導促細胞分裂的雌激素信號傳導。
　　ER是經典的核受體，是核受體超家族成員之一，是執行生長與分化、增殖與凋亡等重要細胞內生理功能的分子元件。ER與雌激素結合后，激活基因轉錄，從而發揮其生長調控作用。
　　近年國內外報道，許多不屬于激素靶器官的腫瘤，如肺癌和腦膜瘤等測出了激素。
　　Tokunaga等首次發現胃癌可表達ER及孕激素受體，并推斷其可能為雌激素依賴性腫瘤，以后國內外學者不僅應用不同的方法證實胃癌細胞ER表達的事實，而且開始給胃癌患者使用tamoxifen（TAM）。但至今TAM用于ER-α陽性，即傳統的ER-α66陽性的胃癌的輔助治療效果不佳，未被全球專家公認。因此，推測可能存在另外一種雌激素受體ER-α36途徑激活胃癌細胞進入細胞周期。
　　本項目組前期研究從蛋白水平及mRNA水平證實胃癌培養細胞株SGC-7901、MKN45、MKN28、AGS中表達ERα36，且人體胃癌組織均表達ERα36，且證實ERα36參與胃癌雌激素信號轉導。
　　筆者2009年在王兆一實驗室研究發現，ER-α36在乳腺癌細胞株MCF7細胞周期不同時相差異性表達。
　　選題意義：本研究擬通過對雌激素受體ER-α36在胃癌細胞株SGC7901G0與G1期表達差異性研究，探討ER-α36在胃癌細胞周期中的作用，從而為胃癌的早期檢測及靶向治療提供理論依據。
　　2.項目成員的組成、特長、分工及成員間相互協調配合的情況，導師指導情況
　　本項目組成員均為女生，細心、認真、負責，成員組同學相互合作、配合好，基本操作均由學生完成。導師指導學生項目申報、教授HE染色技術及原理、教授免疫熒光染色技術及原理、協助學生完成ER36免疫熒光染色過程、指導學生免疫熒光及HE閱片。
　　3.項目的創新點與特色
　　將新發現的雌激素受體ER-α36運用于胃癌細胞周期的研究，首次提出ER-α36影響胃癌細胞周期的觀念，具有一定的創新性，為胃癌的激素治療開辟了新思路。
　　4.項目實施的進展情況及取得的創新成果
　　完成了①SGC7901細胞培養；②同步化處理SGC7901細胞（G0期采用血清饑餓法，M采用秋水仙堿阻滯法）并制作細胞爬片；③細胞爬片免疫熒光細胞化學染色觀察同步化處理G0及M細胞的ERα36表達差別。
　　5.項目實施過程中的收獲與體會
　　通過指導學生科研，我深刻體會到學生科研不僅培養了學生的創新思維能力，而且提高了學生獨立思考的能力，還培養了學生的動手操作能力。
　　讓學生參與科研，不僅提高了學生的觀察能力、分析問題的能力及動手操作的能力，而且培養了學生的科研能力。在實驗研究過程中，學生從課題的文獻綜述、選題立項、實驗操作到實驗報告撰寫，模擬了研究生的研究過程，提供了學生一個科研思路。此外，調動了學生的探究科學的積極性。
　　另外，通過學生科研的指導，提高教師的思想素質和業務素質。進行科研思維能力培訓及多項綜合性實驗技能的培訓是一種新型的實驗教學模式。學生科研要求指導教師不僅具有扎實的基礎理論知識，熟練的操作技能，而且積極跟蹤學科發展趨勢，不斷充實自己，才能給學生更好的指導，同時更多地要求指導教師有創新思維及創新能力。這對指導教師的教學思維及教學模式提出了巨大的挑戰，從而對教師的思想素質和業務素質提出了更高的要求。
　　通過了兩輪的學生科研的指導，筆者認為學生科研目前還存在一些問題亟待解決。
　　在學生科研實踐過程中，筆者認為存在的最大的問題是創新力度不夠。創新實驗究竟什么是創新？創新實驗是思維的創新，還是動手能力的創新，抑或是單純的實驗方式的創新？我認為創新在很大程度上局限于實驗模式的革新。
　　我們往往把學生科研等同于科研，把學生科研教學等同等于研究生科研教學。學生科研應當在科研模式的教學上既簡化又升華。因為教學對象主要是大學一年級學生，他們的專業知識儲備量少。比如，科研項目的內容對學生來說要求的理論知識太強，學生不容易搞懂。如果學生一進入實驗室就讓他們搞科研做課題，就會導致學生在創新實驗過程中看不懂，聽不懂，這勢必讓學生感到迷茫，從而挫傷學生的學習興趣。
　　我認為，大學生學生科研應選擇適當的、涉及多學科且應用較廣的基礎實驗技術，且該技術在學生未來的本科教學中將會涉及，然后以實驗技術為中心展開實驗過程。
　　比如，針對進入病理學實驗小組同學，我們可以采用以結合免疫學與病理形態學相圍繞結合的免疫熒光細胞染色技術為中心，將教師的科研課題深入到該項實驗技術中去。先讓同學們圍繞該技術，進行文獻的復習、綜述并進行討論，然后讓同學們將該技術帶到科研，制作爬片并進行熒光抗體染色。
　　教師在實驗設計中要把握實驗的創新點，比如，技術操作的創新，應用的創新，等等。然后圍繞創新點讓同學們展開思路進行探討。
　　比如，爬片技術是一種冒似簡單的技術，但仍然存在很多有待思考的問題。比如，如何處理可以讓細胞在爬片上分布均勻？如何操作可以讓實驗技術簡潔？采取何種固定方法使得爬片適合某種實驗的讓染色？如何處理可以減少熒光抗體染色的掉細胞現象？等等。在這個思考的過程中便可以將創新性思維貫徹到我們的教學中。這樣，在我們的教學中既教會了學生科研思路，同時又教會了學生實驗技術，同時，更重要的是將科研思維貫徹到實驗教學中。
　　此外，學生在創新思維教學中，自主活動、主動探索的精神沒有得到充分體現。學生更多的是習慣于老師講解、示范性操作，然后按實驗流程來進行操作，在實際操作和處理中沒有自己的想法與思路。這與我們多年傳統教育形成的思維模式是密切相關的。我們應當在科研教學中逐漸改善這種思維模式，將創新思維的教學滲透到教育體系當中去。
　　總之，大學生創新教育不是一句口號，它需要我們在教育實踐中逐步落實與貫徹。我們不能急功近利，應當一步一個腳印，踏踏實實地在教學實踐中摸索，從而使我們的創新實驗能夠為創新教育的推廣服務。
　　基金項目：2010及2011年度江漢大學學生科研教學項