劉靈芝
鄭州人民醫院心血管內科 鄭州 450003
衰老是一個受多因素影響的復雜自然生理過程,有關衰老機制的眾多研究中,自由基學說和細胞凋亡學說越來越受到重視[1]。丹紅注射液作為一種活血化瘀藥物,其是否也具有抗氧化作用尚未見報道。作者采用生化法檢測了應用丹紅注射液后自然衰老大鼠心臟、大腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的水平,探討其對自然衰老大鼠的抗氧化作用。
1.1 主要試劑及儀器 丹紅注射液(批號:國藥準字Z20026866)購自菏澤步長制藥有限公司,維生素E(Vit E)注射劑(批號:110412)購自上海通用藥業股份有限公司,SOD、MDA、GSH-Px、考 馬 斯 亮 蘭 蛋 白 測 試 盒 (批 號 均 為:20110709)均購自南京建成生物工程研究所。722型分光光度計為上海第三分析儀器廠產品,BP121S電子天平為德國Sartorius公司產品。
1.2 實驗對象 健康18月齡雄性Wistar大鼠,體質量387~412g,購自河南省實驗動物中心。
1.3 實驗分組及給藥方法 入組40只Wistar大鼠隨機均分為衰老組、Vit E組(Vit E 50mg/kg)、丹紅注射液大劑量組(丹紅注射液1.0mL/kg)和丹紅注射液小劑量組(丹紅注射液0.5mL/kg)4組,每組10只。自然衰老組大鼠皮下注射0.85%生理鹽水2mL/kg,3個處理組注射相應濃度藥物2mL/kg,1次/d,連續12個月。
1.4 SOD、MDA和GSH-Px檢測 各組大鼠末次給藥1h后,腹腔注射1%戊巴比妥鈉麻醉,取出心臟、大腦組織,4℃生理鹽水沖洗,濾紙吸干,將大腦及心臟左心室組織制成勻漿,3 000r/min離心15min,取適量上清液,按試劑盒說明測定SOD、MDA和GSH-Px。總蛋白量測定采用考馬斯亮蘭法。
1.5 統計學處理 采用SPSS 13.0進行統計分析,定量數據用BZ_15_1694_320_1782_360表示,比較采用單因素方差分析及LSD法,檢驗水準α=0.05。
與衰老組相比,3個處理組大鼠心臟、大腦組織SOD、GSH-Px水平升高、MDA水平降低(P<0.05);丹紅注射液大劑量組、Vit E組與丹紅注射液小劑量組比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表1、2。

表1 丹紅注射液對自然衰老大鼠心臟SOD、MDA及GSH-Px水平的影響

表2 丹紅注射液對自然衰老大鼠大腦SOD、MDA及GSH-Px水平的影響
隨著年齡的增長,自由基產生增多,清除能力卻下降,進而導致體內自由基過剩,從而促進機體的衰老,這就是經典衰老的自由基理論[1]。有研究[2-5]表明,衰老的自由基理論是研究最徹底、得到認可最多的衰老形成機制,其認為機體內的自由基產生和清除在正常情況下處于一種動態平衡狀態,既發揮了自由基的生物學作用,又避免了自由基過剩對機體造成的損害,然而當機體隨著年齡的增長,自由基的產生或清除過程出現反常行為時,就導致了體內過剩的自由基,從而造成機體各種器官的衰老和功能喪失或消弱,例如當機體的自由基清除劑SOD及GSH-Px水平下降時,體內就會蓄積大量的自由基,這些過量的自由基可以造成機體生物膜的損傷,促進脂質過氧化的進展,使體內 MDA水平升高,而MDA的升高既是機體氧自由基損傷的標志,同時其本身也能對生物膜造成損傷。
本文結果顯示:3個處理組較衰老組大鼠心臟、大腦組織SOD、GSH-Px水平升高、MDA水平降低,提示丹紅注射液對衰老大鼠具有抗氧化作用,能降低脂質過氧化程度,同時也進一步驗證了Vit E的抗氧化作用;丹紅注射液大劑量組和Vit E組的SOD、GSH-Px、MDA相似,而丹紅注射液小劑量組的SOD、GSH-Px低于前2組,MDA高于前2組,提示丹紅注射液的抗氧化作用具有一定的劑量依賴性,且一定量的丹紅注射液具有與Vit E相似的作用。總之,通過本研究我們可以發現,丹紅注射液對衰老大鼠具有抗氧化作用,這說明其可能通過抗氧化來發揮抗衰老作用。
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