男性冠心病患者血漿睪酮與超敏C反應蛋白、白介素-6及同型半胱氨酸的關系

王 琦 吳賽珠 張 帆 劉公理 阮云軍 賴文巖

(南方醫科大學南方醫院心血管內科，廣東 廣州 510515)

在男性人群中，冠心病的發病率隨著年齡的增加逐年上升，同時，男性體內主要的雄性激素-睪酮的水平卻逐漸下降。有研究發現，性激素的紊亂是冠心病的獨立危險因素，睪酮水平的下降與急性冠脈事件的發生以及冠心病的死亡率密切相關〔1〕。鑒于睪酮在冠心病發生及進展過程中的作用機制尚不明確，本研究通過探究睪酮與同樣參與冠心病發生發展的血漿超敏C反應蛋白(hs-CRP)、白介素-6(IL-6)以及同型半胱氨酸(Hcy)水平的關系，探索睪酮影響心血管疾病的相關機制。

1 資料與方法

1.1 研究對象及分組 2010年8月至2011年6月南方醫院心血管內科診斷為冠心病的男性入院患者50例，平均年齡(63.72±8.59)歲，診斷均符合1979年WHO冠心病診斷標準，其中穩定型心絞痛39例，不穩定型心絞痛11例，冠脈造影及冠脈CTA證實單支或多支冠狀動脈狹窄＞50%的41例。非冠心病對照組45例，經詢問均無冠心病病史，心電圖、動態心電圖、平板運動檢查均無異常，平均年齡(60.24±8.48)。排除標準：①糖尿病或合并有嚴重并發癥的高血壓;②急性心肌梗死或嚴重的慢性心衰(LVEF＜30%);③近1個月內急性腦血管意外;④嚴重的肝腎功能不全;⑤急慢性感染;⑥近2個月有服用性激素史者;⑦惡性腫瘤;⑧自身免疫性疾病。

1.2 基本臨床資料 病例均經詳細詢問病史并進行體格檢查，記錄體重、身高、年齡、有無高血壓及吸煙史;按照公式體質指數(BMI)=體重(kg)/身高2(m2)計算出各病例BMI。判定有高血壓史的標準為：既往有高血壓史，正在服用降壓藥物;或未用藥，安靜狀態下非同日測量作為右上臂肱動脈血壓兩次，取平均值，收縮壓≥140 mmHg和(或)舒張壓≥90 mmHg。判定吸煙史標準為：吸煙≥5年，平均每日10支或以上。

1.3 研究方法 病例組及對照組皆于入院后次日清晨空腹抽取靜脈血6 ml，其中3 ml經EDTA抗凝，以3 000 r/min離心20 min分離出血漿，EP管中于-40℃低溫保存備用，集齊全部所需標本后用酶聯免疫試劑盒分別檢測血漿中睪酮、IL-6濃度，試劑盒由美國RD公司提供，具體操作嚴格按照各試劑盒說明進行。另3 ml靜脈血，EDTA抗凝后，2 h內檢測總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、hs-CRP及Hcy水平，由南方醫院檢驗科羅氏cobas C501全自動生化分析儀測定。

1.4 統計學分析 應用SPSS13.0軟件進行統計學分析，計量資料用s表示，組間差異用兩獨立樣本t檢驗，采用Pearson直線回歸分析睪酮與hs-CRP、IL-6、Hcy的關系。

2 結果

2.1 冠心病組與對照組臨床基本情況比較 見表1。兩組高血壓、吸煙史、年齡、BMI、TC、TG水平差異無統計學意義(P＞0.05)。

2.2 冠心病組及對照組血漿睪酮、hs-CRP、IL-6、Hcy水平比較見表2。冠心病組與對照組相比，血漿睪酮水平顯著降低;而血漿hs-CRP、IL-6、Hcy水平顯著高于對照組(P＜0.01，P＜0.05)。

2.3 冠心病組血漿睪酮水平與血漿hs-CRP、IL-6和Hcy水平關系分析 冠心病組的血漿睪酮水平與hs-CRP(r=-0.760，P ＜0.001)、IL-6(r=-0.625，P ＜ 0.001)、Hcy(r=-0.529，P＜0.001)水平呈顯著負相關。

表1 CHD組與對照組臨床基本資料的比較

表2 CHD組與對照組睪酮、hs-CRP、IL-6和Hcy的比較(s)

表2 CHD組與對照組睪酮、hs-CRP、IL-6和Hcy的比較(s)

組別(n)睪酮(ng/ml)hs-CRP(mg/L)IL-6(pg/ml)Hcy(μmol/L)冠心病組(50)6.49±3.75 3.51±1.68 4.67±2.31 14.54±4.46對照組(45)9.70±5.07 1.17±0.69 3.65±1.69 12.50±4.19 P值0.001 0.000 0.016 0.024

3 討論

我們的研究結果提示，對年齡、高血壓史、吸煙史、BMI、血脂相匹配的兩組病例做比較，冠心病組的睪酮水平顯著低于對照組，冠心病組的hs-CRP、IL-6及Hcy水平顯著高于對照組。提示睪酮與hs-CRP、IL-6及Hcy之間的相互作用可能是影響冠心病的一個因素。睪酮C-19類固醇激素，主要由睪丸間質Leydig細胞分泌，少部分由腎上腺網狀帶分泌，男性體內睪酮的水平在20～29歲達高峰，以后隨著年齡的增長，逐漸降低。有研究發現，60歲以后老年男性睪酮水平只有20歲男性體內睪酮水平的60%左右〔2〕。作為人體內的主要雄激素，睪酮被廣泛認為具有心血管保護作用。Turhan等〔3〕人發現45歲以下中年男性出現早發冠心病與體內睪酮水平的降低具有顯著相關性。短期的(3個月)睪酮替代治療能明顯減低老年男性冠心病患者心絞痛發作次數和心肌缺血時間〔4〕。因此，睪酮的心血管保護作用較為明確。

睪酮在體內的靶器官眾多，其心血管保護作用機制尚不明確，有研究認為可能得益于睪酮在體內改善血脂譜、減輕胰島素抵抗、擴張血管等作用〔5〕。也有研究發現睪酮具有延緩血管內皮細胞衰老，保護血管內膜的作用〔6〕。本課題組曾在亞急性衰老小鼠模型所做的動物實驗發現睪酮替代治療可減輕血管炎癥反應〔7〕。本研究提示睪酮在冠心病患者體內可能具有影響炎性反應水平及抑制Hcy水平的作用。

高血壓、高血糖、高血脂、吸煙等多種危險因素能導致內皮損傷，致使脂質遷移到內膜下，刺激內皮細胞產生多種細胞因子，誘導巨噬細胞、T細胞等炎性細胞轉移到內膜下并釋放大量炎性因子，加速AS的發展。hs-CRP、IL-6都是研究廣泛的炎癥指標，兩者都是重要的心血管危險因素〔8，9〕。CRP水平在臨床應用上具有預測冠心病病人再發心絞痛、心梗及死亡危險的價值。CRP不僅作為炎癥的標志物，它實際上作為致病因子參與了冠心病的發生發展〔10〕。IL-6是在炎癥反應中起核心調節作用的因子，血管內皮細胞及平滑肌肉細胞分泌的IL-6作用于血管壁而引起血管壁損傷，參與動脈粥樣硬化的形成〔11〕。Hcy作為新近發現的獨立的冠心病危險因素，其影響冠心病的機制涉及多個環節，目前尚不十分清楚，多數研究認為Hcy對內皮細胞的損傷可能是其重要機制之一，有證據表明，Hcy可直接或間接損傷血管內皮細胞，還可打破內皮細胞分泌NO和內皮素ET的平衡，進而破壞內皮的保護性機制。我們的研究提示，冠心病組血漿hs-CRP、IL-6及Hcy水平顯著高于對照組，且都與睪酮的水平呈顯著負相關，即隨睪酮水平的上升，hs-CRP、IL-6及Hcy的水平呈下降趨勢，提示內源性睪酮可能抑制血管的慢性炎性反應及可能通過抑制Hcy保護內皮細胞。其作用的可能機制有：①睪酮具有增加HDL、減少LDL-C、改善胰島素抵抗作用〔12〕，可能通過改善血糖、血脂代謝減輕內皮細胞損傷，從而抑制炎癥化反應;②巨噬細胞等多種炎性細胞表面都表達有雄激素受體，Corcoran等〔13〕人研究發現睪酮能直接作用于巨噬細胞，抑制細胞活化，減少炎癥因子分泌;③睪酮在人體內芳香化形成雌激素，雌激素與雌激素受體結合通過降低促細胞分裂素蛋白激酶家族活性、減少細胞黏附分子的表達、刺激一氧化氮合酶的表達、減少細胞凋亡等多種途徑抑制炎癥細胞的聚集、減少炎癥因子的釋放〔14〕。睪酮影響Hcy水平的具體機制尚不明確，一般認為與Hcy代謝的關鍵酶(胱硫醚β-合成酶)有關，Vitvitsky等〔15〕研究也證實睪酮能通過調節腎臟分泌胱硫醚β-合成酶而影響血同型半胱氨酸水平。

總之，睪酮的心血管保護作用機制極其復雜。睪酮抑制炎性反應水平及血漿Hcy水平可能是其發揮作用的一條途徑。臨床上，提高老年男性血漿睪酮水平可能對預防冠心病的發生及發展過程有積極的意義。當然，本研究為一次性血漿樣本檢測，且僅以老年男性為研究對象，睪酮與炎性反應及睪酮與Hcy相互作用的具體機制，以及睪酮在女性人群中對動脈粥樣硬化和冠心病的影響都需要進一步的研究探索。

1 Malkin CJ，Pugh PJ，Morris PD，et al.Low serum testosterone and increased mortality in men with coronary heart disease〔J〕.Heart，2010;96：1821-5.

2 馬 嶸，鄭寶鐘.不同年齡男性血漿睪酮水平的研究〔J〕.中華老年醫學雜志，2004;24(5)：549-50.

3 Turhan S，Tulunay C，Gulec S，et al.The association between androgen levels and premature coronary artery disease in men〔J〕.Coron Artery Dis，2007;18(1)：159-62.

4 Cornoldi A，Caminiti G，Marazzi G，et al.Effects of chronic testosterone administration on myocardial ischemia，lipid metabolism and insulin resistance in elderly male diabetic patients with coronary artery disease〔J〕.Int J Cardiol，2010;142(1)：50-5.

5 Yeap BB.Androgens and cardiovascular disease〔J〕.Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes，2010;17(2)：269-76.

6 彭慧茹，吳賽珠，阮云軍，等.睪酮對血管內皮細胞衰老的干預作用〔J〕. 中國老年學雜志，2008;28(9)：940-2.

7 洪 雷，吳賽珠，邢曉雯，等.生理劑量睪酮可減弱亞急性衰老小鼠的血管炎癥反應〔J〕.嶺南心血管病雜志，2010;(增刊)：213.

8 Danesh J，Wheeler JG，Hirschfield GM，et al.C-reactive protein and other circulating markers of inflammation in the prediction of coronary heart disease〔J〕.N Engl J Med，2004;350：1387-97.

9 Danesh J，Kaptoge S，Mann AG，et al.Long-term interleukin-6 levels and subsequent risk of coronary heart disease：two new prospective studies and a systematic review〔J〕.PLoS Med，2008;5：e78.

10 Li JJ，Fang CH.C-reactive protein is not only an inflammatory marker but also a direct cause of cardiovascular diseases〔J〕.Med Hypotheses，2004;62：499-506.

11 Ridker PM，Rifai N，Stampfer MJ，et al.Plasma concentration of interleukin-6 and the risk of future myocardial infarction among apparently healthy men〔J〕.Circulation，2000;101：1767-72.

12 Tchernof A，Labrie F，Belanger A，et al.Relationships between endogenous steroid hormone，sex hormone-binding globulin and lipoprotein levels in men：contribution of visceral obesity，insulin levels and other metabolic variables〔J〕.Atherosclerosis，1997;133(2)：235-44.

13 Corcoran MP，Meydani M，Lichtenstein AH，et al.Sex hormone modulation of proinflammatory cytokine and c-reactive protein expression in macrophages from older men and postmenopausal women〔J〕.J Endocrinol，2010;206(2)：217-24.

14 Chakrabarti S，Lekontseva O，Davidge ST.Estrogen is a modulator of vascular inflammation〔J〕.Iubmb Life，2008;60(3)：376-82.

15 Vitvitsky V，Prudova A，Stabler S，et al.Testosterone regulation of renal cystathionine beta-synthase：implications for sex-dependent differences in plasma homocysteine levels〔J〕.Am J Physiol Renal Physiol，2007;293：F594-F600.