用動物試驗確診1例綿羊魏氏梭菌病的報告

馬占榮

青海省門源縣陰田鄉獸醫站，青海門源810300

魏氏梭菌為厭氧、革蘭氏陽性、兩端鈍圓的大桿菌，有芽孢，無鞭毛。本菌能產生多種外毒素，根據其毒素性質不同，分為 A、B、C、D、E等型；菌型不同，其所引起的疾病亦不同，僅從臨床癥狀上不易確診。特別是羊腸毒血癥和羊猝狙，發病急、病程短、死亡快，以致其臨床癥狀不易被觀察到。

2011年1月，陰田鄉一牧戶飼養的綿羊突然發病，共存欄284只，3d內連續死亡11只，發病羊只中以當年羔羊和成年母羊居多。部分患羊當晚不見任何癥狀，次日死于圈中；部分患羊在放牧時發病，羊只突然停草、出現神經癥狀、呼吸困難、心跳加快、體溫不高、口吐白沫、結膜蒼白、全身肌肉震顫，很快進入昏迷狀態，1～8h內死亡。對癥治療療效甚微，初步診斷為魏氏梭菌感染，為進一步確診，進行了動物試驗，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材 料

1）供試動物。門源種馬場一牧戶飼養的體重、年齡相近的6只健康家兔。

2）試驗用品。離心機1臺（配套試管6支），10 mL無菌注射器6支，5號靜脈注射針頭6套，足量酒精棉球，250mL生理鹽水。

1.2 方 法

無菌采集病死綿羊含內容物的小腸100cm，封住兩端，備用；無菌采集健康綿羊含內容物的小腸100cm，封住兩端，備用。

1）第1步試驗。取備用病死綿羊的小腸內容物10g，加40mL生理鹽水稀釋后，2 000r／min離心30min，取上清液，標注為1號試劑；用同樣的方法將健康綿羊的小腸內容物稀釋、離心后制成2號試劑。隨機取3只家兔，分別標記為1、2、3號；1、2號家兔分別對應靜脈注射1、2號試劑各5mL，3號家兔注射生理鹽水5mL，注射后讓3只家兔自由活動，并觀察、計時。

2）第2步試驗。取靜脈注射1號試劑致死的家兔的小腸內容物10g，加40mL生理鹽水稀釋后，2 000r／min離心30min，取上清液，標注為4號試劑。取4號試劑5mL靜脈注射于備用的任意1只家兔，標為4號試驗家兔，并觀察、計時。

2 結果與分析

第1步試驗，結果發現注射37min后1號試驗家兔興奮不安、狂奔幾下后突然死亡，2、3號試驗家兔生理活動正常。說明病死綿羊的小腸內有使家兔致死的毒素。第2步試驗，結果發現注射后12h內，4號試驗家兔生理活動正常。說明致死的1號家兔小腸內無毒素產生，致使1號家兔死亡的是病死綿羊小腸內細菌的外毒素，而不是病菌感染。

綜合分析發現，引起該批綿羊死亡的原因是魏氏梭菌感染，由于條件限制未作毒素分型鑒定。確診為魏氏梭菌感染后，立即對全群綿羊進行了羊梭菌多聯苗強化免疫，1周后再無綿羊發病。

3 討 論

應在詳細的流行病學調查基礎上，結合臨床癥狀和剖檢病變，初步診斷為魏氏梭菌感染后，用該試驗進行確診。應充分考慮絳蟲毒素、食入性毒素等因素，以免影響試驗結果。本試驗成本低、實驗動物易購、操作簡便、器械易于籌備，適于在條件不好、載畜量大的偏遠山區應用。