抗單純皰疹病毒中藥的研究進(jìn)展

李 嬌(綜述)，彭 芳(審校)

(大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理671000)

單純皰疹病毒(herpes simplex virus，HSV)屬于 α皰疹病毒科，呈球形，直徑150～200 nm，由包膜、被膜、核衣殼與含有DNA的核心4種基本結(jié)構(gòu)組成，能在多種細(xì)胞中增殖。其血清型有兩 種:HSV-1 和 HSV-2［1］。HSV感染是人類一種常見(jiàn)的傳染病。常見(jiàn)的 HSV-1引起的唇皰疹和HSV-2造成的生殖器皰疹不會(huì)威脅到生命，但是可以導(dǎo)致嚴(yán)重的角膜感染(角膜炎)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥(腦炎)，免疫缺陷者或新生兒被感染會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重疾病的傳播［2-3］，HSV-1導(dǎo)致的腦炎如果不及時(shí)治療可能會(huì)危及生命［4］，因此抗HSV藥物的研究是很重要的。抗HSV藥物經(jīng)歷了50余年的發(fā)展，以碘苷(idoxuridine)為代表的早期抗HSV藥物，選擇性低，對(duì)正常細(xì)胞毒性大［5］。現(xiàn)在臨床抗HSV的首選藥物為無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷(acyclovir，ACV)，ACV于20世紀(jì)80年代上市，以其高效低毒被譽(yù)為抗HSV藥物發(fā)展史上的里程碑［6］，但其抗病毒譜窄，易產(chǎn)生耐藥性且價(jià)格昂貴，使其臨床應(yīng)用受到很大限制。此外，還有一些化學(xué)類藥物，大都因有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性或不良反應(yīng)而應(yīng)用較少。近年來(lái)，關(guān)于中藥抗HSV作用的研究越來(lái)越多，國(guó)內(nèi)外科研工作者已從中草藥中篩選和尋找出一些高效抗HSV藥物，其中有些已被開(kāi)發(fā)應(yīng)用于臨床［7］。中草藥來(lái)源廣泛，不良反應(yīng)少，其抗病毒作用日益受到重視。

1 單味藥研究

1.1 梔子 時(shí)宇靜等［8］發(fā)現(xiàn)，梔子提取物具有抗HSV-1的作用。梔子提取物對(duì)VP16 mRNA和干擾素γ mRNA兩方面都具有調(diào)節(jié)作用。VP16 mRNA既是HSV-1的結(jié)構(gòu)蛋白，在病毒復(fù)制晚期參與病毒顆粒的組裝，同時(shí)又作為重要的功能蛋白在病毒感染早期發(fā)揮重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能。而干擾素γ mRNA是主要的免疫調(diào)節(jié)干擾素。在應(yīng)用梔子提取物高劑量后，VP16 mRNA相對(duì)表達(dá)量隨時(shí)間變化呈現(xiàn)持續(xù)降低狀態(tài)，干擾素γ mRNA相對(duì)表達(dá)量隨時(shí)間變化呈現(xiàn)持續(xù)升高狀態(tài)，從而抑制HSV-1在小鼠腦內(nèi)的復(fù)制，發(fā)揮抗HSV-1的作用。

1.2 余甘子 瞿暢等［9］發(fā)現(xiàn)通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)觀察藥物毒性、病毒引起的細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathic effect，CPE)、空斑減數(shù)實(shí)驗(yàn)，余甘子的醋酸乙酯提取物、甲醇提取物和水提物對(duì)HSV-1和HSV-2都有良好的抑制作用，其中以醋酸乙酯提取物的效果最好。

1.3 苦丁茶 郝靜等［10］發(fā)現(xiàn)廣西產(chǎn)苦丁茶水提物對(duì)HSV-1所致的細(xì)胞病變有較好的抑制作用，具有明顯的高效低毒特性，對(duì)細(xì)胞的保護(hù)及對(duì)病毒感染細(xì)胞的綜合作用中均表現(xiàn)出明顯的活性。苦丁茶水提物具有顯著的抗HSV-1活性，且初步推測(cè)其抗病毒活性的機(jī)制是病毒和受體結(jié)合，侵入非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)階段。

1.4 川楝子 賴志才等［11］以Vero細(xì)胞為宿主細(xì)胞，ACV為陽(yáng)性對(duì)照藥物，觀察CPE與空斑減數(shù)實(shí)驗(yàn)測(cè)定川楝子提取物抗HSV-1活性，發(fā)現(xiàn)川楝子提取物在體外對(duì)HSV-1直接滅活的效果明顯，而對(duì)HSV-1吸附與穿入細(xì)胞的抑制作用較差。表明川楝子提取物在體外有明顯的抗HSV-1感染作用，且主要是通過(guò)直接滅活HSV-1而發(fā)揮作用。

1.5 桉葉 賴志才等［12］采用CPE觀察實(shí)驗(yàn)與空斑減數(shù)實(shí)驗(yàn)測(cè)定直干桉葉水提物抗HSV-1活性，發(fā)現(xiàn)直干桉葉水提物能明顯抑制HSV-1的致病變作用。通過(guò)對(duì)病毒的直接滅活作用、對(duì)病毒吸附的影響及對(duì)病毒穿膜的影響三個(gè)方面初探直干桉葉水提物抗HSV-1活性機(jī)制，推測(cè)直干桉葉水提物抗HSV-1活性的機(jī)制是影響病毒的囊膜結(jié)構(gòu)從而使之失活。

1.6 杠板歸 張長(zhǎng)城等［13］利用溶劑法和色譜法從杠板歸中提取分離出4個(gè)部位，噻唑藍(lán)法檢測(cè)杠板歸各提取物的病毒抑制效果，以病毒抑制率和治療指數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，比較各部位體外抗病毒的效果。杠板歸醇提部位與大孔樹(shù)脂醇洗部位抗HSV-1作用最強(qiáng)，與陽(yáng)性藥ACV比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明杠板歸提取物體外具有較好的抗HSV-1作用。

1.7 老鷹茶 曾凡力等［14］采用CPE法與空斑減數(shù)實(shí)驗(yàn)測(cè)定甲醇提取物抗HSV-1活性，并從藥物對(duì)病毒的直接滅活作用、對(duì)病毒吸附的影響及對(duì)病毒穿膜的影響三個(gè)方面初步探討其抗HSV-1的活性機(jī)制。結(jié)果表明貴州老鷹茶甲醇提取物能明顯抑制HSV-1的致病變作用，藥物主要是影響病毒對(duì)細(xì)胞的吸附，對(duì)病毒也有一定的直接滅活作用，初步推測(cè)其抗HSV-1活性的機(jī)制是作用在HSV-1和受體結(jié)合，侵入Vero細(xì)胞階段。

1.8 葉下珠 Yang等［15］將葉下珠分離提取為丙酮、乙醇和甲醇三部分，通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)觀察葉下珠對(duì)HSV的抑制作用。發(fā)現(xiàn)三個(gè)提取部分都對(duì)HSV-2有較好的抑制作用，對(duì)HSV-1卻沒(méi)有太大的抑制作用。

1.9 玉竹 Yang等［16］將玉竹作用于Vero細(xì)胞，通過(guò)CPE實(shí)驗(yàn)觀察到玉竹對(duì)由HSV-2導(dǎo)致的細(xì)胞病理改變具有一定的抑制作用，表明玉竹在體外具有抗HSV-2的作用。

2 復(fù)方藥研究

2.1 病毒寧 吳國(guó)江等［17］采用細(xì)胞培養(yǎng)法觀察中藥制劑病毒寧(為金銀花、連翹、黃芩、柴胡、甘草等中藥組成的復(fù)方制劑)對(duì)HSV-1致細(xì)胞病變的影響，ACV與病毒寧比較發(fā)現(xiàn)病毒寧最大無(wú)毒濃度(TD0)為1.5 g/L，ACV 的TD0為62.5 mg/L，兩者都能抑制HSV的復(fù)制和增殖，且病毒寧優(yōu)于ACV，病毒寧的安全范圍也較ACV大。表明病毒寧是一種細(xì)胞毒性小、治療指數(shù)高的有效抗HSV-1藥物。

2.2 馬齒莧合劑 劉建國(guó)等［18］將馬齒莧與黃芪合劑的水提液作用于Hep-2、Vero細(xì)胞和原代兔腎細(xì)胞三種細(xì)胞，研究其抗病毒作用，通過(guò)藥物毒性實(shí)驗(yàn)、對(duì)病毒所致的CPE的觀察以及藥物的直接殺傷作用，馬齒莧合劑水提液體外有明顯的抗HSV的作用，0.5 mg/mL時(shí)能夠抑制病毒所致CPE的產(chǎn)生和對(duì)病毒有直接殺傷作用。王毅兵［19］在人胚肺二倍體細(xì)胞系統(tǒng)中，采用對(duì)病毒所致細(xì)胞病變的抑制實(shí)驗(yàn)，觀察馬齒莧水煎液抗HSV-1的藥效，發(fā)現(xiàn)馬齒莧水煎液有較顯著的抗HSV-1作用，且對(duì)細(xì)胞毒性低。

2.3 皰疹清 孫剛等［20］通過(guò)HSV-1和HSV-2感染Hep-2細(xì)胞體外抗病毒實(shí)驗(yàn)以及小鼠顱內(nèi)病毒注射致單純皰疹腦炎模型體內(nèi)抗病毒實(shí)驗(yàn)，研究中藥制劑皰疹清(為龍膽草、柴胡、黃芩、板藍(lán)根等中藥組成的復(fù)方制劑［21］)對(duì)HSV的干預(yù)作用。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，皰疹清對(duì)細(xì)胞有一定的保護(hù)作用;體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)該藥治療的動(dòng)物存活時(shí)間明顯延長(zhǎng)，存活率有不同程度的提高，表明皰疹清對(duì)HSV-1和HSV-2均有抑制作用。

3 結(jié)語(yǔ)

隨著病毒性疾病的日益增多，尤其是生殖器皰疹等皰疹類疾病，給人類公共衛(wèi)生帶來(lái)越來(lái)越大的危害，人們對(duì)抗病毒藥物的需求愈來(lái)愈強(qiáng)烈［22-23］。我國(guó)中藥資源豐富，分布廣泛，而且中藥獨(dú)特的抗病毒藥理作用，為抗病毒藥物的篩選提供了廣闊的發(fā)展空間。除了中草藥之外，我國(guó)昆蟲(chóng)資源豐富，約占世界昆蟲(chóng)種類總量的10%。在極為豐富的昆蟲(chóng)資源中，許多是與人們生活密切相關(guān)的，它們不但可以為人們提供工業(yè)原料、人畜食料，而且很多種類具有極高的藥用價(jià)值，是中國(guó)中藥學(xué)寶庫(kù)中的重要組成部分［24］。昆蟲(chóng)類藥物的抗炎、抗腫瘤的研究已經(jīng)進(jìn)入一個(gè)比較成熟的階段，但對(duì)于抗病毒的研究鮮見(jiàn)報(bào)道，有很廣闊的發(fā)展前景。

［1］馬振亞.中藥抗菌抗病毒作用研究［M］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2005:171.

［2］Whitley RJ，Roizman B.Herpes simplex virus infections［J］.Lancet，2001，357(9267):1513-1518.

［3］Taylor TJ，Brockman MA，McNamee EE，et al.Herpes simplex virus［J］.Front Biosci，2002，7:d752-d764.

［4］Conrady CD，Drevets DA，Carr DJ.Herpes simplex type 1(HSV-1)infection of the nervous system:is an immune response a good thing?［J］.J Neuroimmunol，2010，220(1/2):1-9.

［5］林靖雯，陳謙明，周紅梅.抗皰疹病毒藥物的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)口腔醫(yī)學(xué)雜志，2006，41(1):60-62.

［6］陶佩珍.抗皰疹病毒藥物研究進(jìn)展［J］.中國(guó)新藥雜志，2003，12(4):253-256.

［7］褚秀玲，韋旭斌.抗病毒中草藥研究進(jìn)展［J］.中獸醫(yī)雜志，2006，128(1):33-37.

［8］時(shí)宇靜，黃洋，郭姍姍，等.梔子提取物對(duì)單純皰疹病毒1型感染小鼠VP16 mRNA和IFN-γ mRNA的影響［J］.病毒學(xué)報(bào)，2009，25(1):41-46.

［9］瞿暢，賴志才，裴贏，等.余甘子提取物體外抗單純皰疹病毒1型和2型的初步研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21(4):784-786.

［10］郝靜，張美英，王一飛，等.廣西苦丁茶提取物體外抗單純皰疹病毒1型活性的實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008，19(8):1806-1807.

［11］賴志才，瞿暢，曾恕芬，等.川楝子提取物體外抗單純皰疹病毒1型活性的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中藥新藥與臨床藥理，2010，21(1):7-10.

［12］賴志才，瞿暢，田立文，等.桉葉水提物體外抗單純皰疹病毒Ⅰ型活性的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2009，18(20):7-8.

［13］張長(zhǎng)城，黃鶴飛，周志勇，等.杠板歸提取物抗單純皰疹病毒-Ⅰ型的藥理作用研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21(11):2835-2836.

［14］曾凡力，周敏，許敏，等.貴州老鷹茶提取物體外抗單純皰疹病毒1型活性的實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2011，22(2):282-284.

［15］Yang CM，Cheng HY，Lin TC，et al.Acetone，ethanol and methanol extracts of Phyllanthus urinaria inhibit HSV-2 infection in vitro［J］.Antiviral Res，2005，67(1):24-30.

［16］Yang Y，Xu HL，Zhang ZT，et al.Characterization，molecular cloning，and in silico analysis of a novel mannose-binding lectin from Polygonatum odoratum(Mill.)with anti-HSVⅡand apoptosis-inducing activities［J］.Phytomedicine，2011，18(8/9):748-755.

［17］吳國(guó)江，蔡永娟，李紅亞，等.病毒寧體外抗單純皰疹病毒藥效評(píng)價(jià)［J］.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，31(4):76-80.

［18］劉建國(guó)，喻國(guó)華，廖燕，等.馬齒莧合劑水提液抗單純皰疹病毒2 型的實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2009，20(6):1437-1438.

［19］王毅兵.馬齒莧水煎液抗單純皰疹病毒的實(shí)驗(yàn)研究［J］.臨床合理用藥，2011，4(4B):52-53.

［20］孫剛，王笑紅，翟志光，等.皰疹清抗單純皰疹病毒作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2011，17(1):71-72.

［21］李映琳，李德龍，耿春梅.中西藥治療116例帶狀皰疹的臨床觀察［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，24(1):66.

［22］周燕園，甄漢深.中藥抗單純皰疹病毒的實(shí)驗(yàn)研究概況［J］.廣西中醫(yī)藥，2004，27(5):4-6.

［23］朱燕，程?hào)|慶.中草藥抗單純皰疹病毒的實(shí)驗(yàn)及臨床研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)綜述，2008，14(19):3003-3005.

［24］楊冠煌.中國(guó)昆蟲(chóng)資源利用和產(chǎn)業(yè)化［M］.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1998:1-134.