D變異型受血者輸RhD陰性血1例

師巧紅樊紅

在臨床輸血工作中，一般采用抗-D(IgM)單克隆試劑檢測受血者Rh血型，極少能發現受血者D變異型，本例受血者因附屬醫院檢驗科與輸血科檢測RhD采用不同來源抗-D試劑，兩科試劑檢測結果不一致，才發現受血者為D變異型，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 受血者，男，49歲，2011年7月29日確診為胃癌，術前備血，本地附屬醫院檢驗科檢驗血型A型RhD陽性，輸血科檢驗血型為A型RhD陰性，因兩個實驗室的RhD檢測結果不一致，送血站血型室進一步確認患者RhD血型。筆者所在科室采用間接抗人球蛋白法確認為D變異型，輸RhD陰性血，無輸血不良反應。

1.2 試劑與儀器 初篩選用抗-D(IgM)單克隆抗體(來源：上海血液生物醫藥有限責任公司，批號：20110218)；戴安娜微柱凝膠(批號：1107.02)；DiaMed，微柱凝膠(批號：50093.35.06)；確認試劑為抗 -D1、抗 -D2、抗 -D3，抗 -D1(IgG)；單克隆抗體(來源：上海血液生物醫藥有限責任公司，批號：20101022)；抗-D2(IgG+IgM，來源：美國美德聲公司，批號：NDMG05602)；抗-D3(IgG+IgM，來源：Millipore UK，批號：BMH0806E)；BASO 2002-2離心機；電熱恒溫水浴箱(北京醫療設備廠)。

1.3 方法 血型血清學方法，按試劑說明書采用鹽水法、抗人球蛋白法檢測[1]。

2 結果

2.1 受血者RhD初篩血型，醫院檢驗科用戴安娜微柱凝膠法檢測為RhD陽性。醫院輸血科采用Diamed微柱凝膠法檢測為RhD陰性，血站血型室采用鹽水凝集法檢測為RhD陰性。

2.2 受血者RhD血型確認結果見表1。

表1 受血者RhD血型確認結果

3 討論

在紅細胞29個血型系統中，Rh血型系統是最具復雜性和多態性的血型系統，在輸血醫學中的重要性僅次于ABO血型系統[2]。Rh血型系統抗原總數約有45種之多，主要抗原有D、C、E、c和e五種抗原，由于D抗原的抗原性最強，具有高免疫性而最具臨床意義，因此，根據紅細胞上D抗原的有無，將其分為Rh陽性或Rh陰性，其它抗原強弱依次為E>C>c>e的次序，均顯示劑量效應。RhD血型在不同人種中的分布比例是有差異的，Rh陰性血型在我國漢族和蒙古族屬稀有血型[3]。近年來通過研究發現，RhD抗原分為D陽性、D陰性和D變異型，而D變異型又分為弱D和部分D；弱D抗原的改變位于細胞膜內和膜中，細胞膜外的蛋白質沒有改變，只有抗原數量的改變，而抗原質量未改變；部分D抗原的改變則位于細胞膜外，抗原性和數量都發生了改變[2]。本例受血者在常規鹽水法初篩D抗原時為陰性，間接抗人球蛋白試驗確認為陽性，證實存在D抗原，由于血型血清學方法只能檢測抗原與抗體的反應，無法區別弱D和部分D。D抗原位于RhD基因編碼的RhD多肽上，該多肽帶有6個細胞外環，貫穿紅細胞膜12次，氨基端和羧基端均位于胞漿中[4]。6個細胞外環中含有多個具有抗原性的抗原決定簇，當RhD基因發生突變、缺失，影響D抗原決定簇的質或(和)量的表達稱之為D抗原變異型。國際輸血協會(ISBT)根據D抗原將D表型分為五型：(1)D表型：即D抗原正常。(2)弱D(DU)表型：抗原數減少，抗原表位正常。(3)不完全D：抗原數量正常，但缺乏某些抗原表位。(4)不完全弱D：抗原數量少，同時缺乏某些抗原表位。(5)增強D：抗原數量明顯增加，抗原性增強。不同的商品化的抗D試劑與D抗原決定簇結合位點不同，即使對同一抗原決定簇反應，但其結合能力也有差別。這就是表達D抗原變異型紅細胞與某些商品化的抗-D試劑在不同條件下反應格局不同的原因。本例受血者在醫院檢驗科與輸血科采用不同廠家微柱凝膠檢測卡檢測同一份血液，其結果不同，經過筆者所在站血型室進一步檢測，在常規鹽水法初篩D抗原時為陰性，間接抗人球蛋白試驗確認為陽性，證實存在D抗原。

根據美國AABB技術手冊第12版(1996)規定：Du這術語不再使用，攜帶弱的D抗原的紅細胞仍被歸類為D陽性，稱之“弱D(weakD)”，原稱之Du紅細胞一部分具有與正常D陽性紅細胞同樣性質的D抗原，只是D抗原數量減少；另一部分原D紅細胞D抗原與正常D抗原相比缺少正常D抗原中1個或多個抗原表位[5]。

本例受血者，在術中輸4單位ABO同型的RhD陰性冰凍解凍去甘油紅細胞。在臨床輸血中，未發生溶血性輸血不良反應。

由于D變異型仍具有免疫原性及抗原性，因此，此類人群作為獻血者視為RhD陽性，如果此類人群為受血者則視為RhD陰性。在受血者人群RhD血型檢測時，由于微柱凝膠檢測卡方法其靈敏度高，加之如果反應體系內加入廣譜、高效價抗D試劑，易導致部分D變異型誤定為陽性，而給患者輸入RhD陽性紅細胞血液制品，增加產生抗D抗體的幾率。建議醫院在對患者進行RhD血型篩查時選用單克隆試劑，并且采用鹽水凝集法檢測，有條件的醫院應采用不同廠家的抗-D試劑進行檢測，以確保輸血安全。

總之，受血者采用常規鹽水法初篩D抗原即可，如果為D陰性無需做間接抗人球蛋白確認試驗，該受血者需要輸注RhD陰性血液；供血者為D變異型應作RhD陽性論，不應當輸血給RhD陰性的受血者，因此，在血站對供血者做Rh血型檢測，檢測出陰性的標本必須做確認試驗，采用不同批次的抗-D血清進行間接抗人球蛋白實驗，如果是陽性結果，表明D陽性，按Rh陽性血對待。

[1]李勇，楊貴貞.人類紅細胞血型血清學實用理論與實驗技術[M].北京:中國科學技術出版社，1999:82-86.

[2]孫國棟，王曉平.Rh血型系統弱D及部分D研究進展[J].臨床輸血與檢驗，2007，9(2)：183-185.

[3]王華，張洪為，譚芳，等.RhD陰性患者血清學表型和不規則抗體篩查結果分析[J].中國醫學創新，2011，8(2)131-133.

[4]孫國棟，段現民，張彥平，等.中國人群眾發現的主要弱D型-弱D15個體的分子背景研究[J].中國實驗血液學雜志，2006，14(5)：1024-1028.

[5]也應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].南京:東南大學出版社，2006:251.