蘇合香揮發(fā)性化學(xué)成分的GC-MS研究Δ

王世宇，彭 穎，夏厚林，周 穎，王 建，曾 南（成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，成都 611137）

蘇合香為金縷梅科植物蘇合香樹Liquidambar orientalis Mill.的樹干滲出的香樹脂，經(jīng)加工精制而成的油狀液體。有研究資料表明，其主要含樹脂（約36%）、水分（約14%～21%）和油狀液體[1]。它主產(chǎn)于伊朗、土耳其、索馬里、印度等國，味辛，性溫，有開竅辟穢、散寒止痛功效，常用于治療中風(fēng)痰厥、卒然昏倒、胸腹冷痛、驚癇、濕瘧[2]。蘇合香既是一味開竅醒神、治療寒閉神昏的代表藥，又是中醫(yī)臨床急救處方蘇合香丸（出自《和劑局方》）、冠心蘇合丸中的主藥，二方在2010年版《中國藥典》中均被收載。因其味辛，故本試驗(yàn)采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用技術(shù)考察蘇合香固相微萃取（HS-SPME）的揮發(fā)性化學(xué)成分，擬為建立該類芳香辛味藥物的揮發(fā)性成分提取方法奠定基礎(chǔ)。石聰文等[1]用GC-MS聯(lián)用技術(shù)對蘇合香揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行了鑒定，張宏偉等[3]對廣東產(chǎn)蘇合香的質(zhì)量與藥理作用進(jìn)行了研究，同樣認(rèn)為對其藥效物質(zhì)與性能間的關(guān)聯(lián)研究具有意義。

1 儀器與試藥

GC6890/MS5973型GC-MS聯(lián)用儀（美國Agilent公司）；75 μm Carboxen/PDMS型萃取頭（美國Supelco公司）。

藥材購自成都市五塊石中藥材市場，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)盧先明教授鑒定為金縷梅科植物蘇合香樹L.orientalis Mill.的樹干滲出的香樹脂的加工精制品，經(jīng)分析符合2010年版《中國藥典》“蘇合香”項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)。所用試劑均為分析純。

2 方法

2.1 樣品制備方法

采用HS-SPME技術(shù)：使用前先將SPME的萃取頭在GC進(jìn)樣口以250℃老化40 min；取蘇合香樣品0.5 g，置于5 mL樣品瓶中，蓋上蓋子，插入萃取頭，150℃頂空萃取15 min，取出后立即插入GC進(jìn)樣口，解吸5 min。

2.2 GC-MS分析條件

2.2.1 GC條件 色譜柱：HP-INNOWax（19091 N-133）（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；進(jìn)樣口溫度：250℃；程序升溫條件：初始溫度為50℃，保持6 min，以5℃·min－1升溫至170℃，保持10 min，再以5℃·min－1升溫至220℃，保持25 min；載氣：高純氦氣；載氣流量：1.0 mL·min－1；無分流進(jìn)樣。

2.2.2 MS條件 電離方式：EI；電離能量：70 eV；離子源溫度：230℃；四極桿溫度：150℃；傳輸線溫度：150℃；電子倍增器電壓：1765 V；質(zhì)量掃描范圍：20～450 amu。

3 結(jié)果

按上述分析條件對蘇合香揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行分析測試，得總離子流圖（圖1）；通過計(jì)算機(jī)MS數(shù)據(jù)系統(tǒng)（G1033 A，D01.00 NlST98標(biāo)準(zhǔn)MS檢索庫）、人工譜圖解析，并查對有關(guān)資料，確定出蘇合香揮發(fā)油中的化學(xué)成分；并采用峰面積歸一化法計(jì)算各成分在揮發(fā)油中的相對含量，結(jié)果見表1。

表1 結(jié)果表明，從蘇合香的揮發(fā)性化學(xué)成分中共鑒定出28種成分，占揮發(fā)油總色譜峰面積的90.72%，其中含量較高的成分有α-蒎烯（15.97%）、莰烯（13.28%）、β-蒎烯（12.82%）、苯甲醛（8.03%）、苯甲酸（8.42%）、氫化肉桂酸（4.88%）、檸檬烯（3.99%）等，為蘇合香HS-SPME的揮發(fā)油中主要成分。

4 討論

表1 蘇合香HS-SPME的主要化學(xué)成分Tab 1 Main chemical components of L.orientalis by HSSPME

試驗(yàn)參考相關(guān)文獻(xiàn)[4，5]，對SPME的萃取頭條件進(jìn)行了考察，得出在GC進(jìn)樣口以250℃老化40min、150℃頂空萃取15 min的條件下確定的成分最多，故確定此萃取頭條件。

查閱國內(nèi)、外文獻(xiàn)，有用超臨界CO2流體萃取法[6]、水蒸氣蒸餾法[7]等方法對蘇合香揮發(fā)油成分進(jìn)行提取的報(bào)道。其中，采用超臨界CO2流體萃取法提取揮發(fā)油鑒定出主要成分73種，占揮發(fā)油總組分的87%以上[6]；采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油鑒定出主要成分52種，占揮發(fā)油總組分的87%以上[7]。而本試驗(yàn)主要采用固相微萃取法提取其揮發(fā)性化學(xué)成分，在提取方法上有所改進(jìn)，也是本試驗(yàn)的創(chuàng)新之處，鑒定出揮發(fā)油成分28種，占揮發(fā)油總組分的91%以上。3種提取方法所測揮發(fā)性化學(xué)成分比較見表2。

由表2可知，3種提取方法所得蘇合香的揮發(fā)油成分中，均含有α-咕巴烯、長葉烯、β-石竹烯、石竹烯氧化物4種成分，但各成分的含量有差異。水蒸氣蒸餾法使一些成分因受熱發(fā)生了變化，超臨界CO2流體萃取法對于極性基團(tuán)多、分子量高的化合物難以萃取，而HS-SPME法操作方便，測定快速、高效，不使用有機(jī)溶劑，更簡單、可靠。

表2 3種方法所測揮發(fā)性化學(xué)成分比較Tab 2 Comparison of volatile chemical constituents by 3 methods

綜上，即使藥材基原相同，但是由于提取方法不同，導(dǎo)致所得揮發(fā)性化學(xué)成分也有一定差異，說明單純從化學(xué)成分角度闡釋藥物的作用特征不夠完善，應(yīng)當(dāng)將特定提取方法提取出來的大類物質(zhì)與藥效結(jié)合平行研究，才能更有效地闡明符合臨床用藥實(shí)際的提取方法。

[1]石聰文，朱文彩，姚發(fā)業(yè).蘇合香揮發(fā)油化學(xué)成分的研究[J].山東教育學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，24（3）：79.

[2]張廷模.臨床中藥學(xué)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2004：502-503.

[3]張宏偉，莫志賢，賀 豐.廣東產(chǎn)蘇合香的質(zhì)量與藥理作用研究[J].中藥藥理與臨床，2006，22（3）：114.

[4]吳彩霞，劉紅麗，盧素格，等.固相微萃取法與水蒸氣蒸餾法提取蜘蛛香揮發(fā)油成分的比較[J].中國藥房，2008，19（12）：918.

[5]姬志強(qiáng)，賀光東，康文藝.普通鐵線蕨HS-SPME-GC分析[J].中國藥房，2008，19（30）：2359.

[6]蘇德民，姚發(fā)業(yè)，石 竹.超臨界CO2萃取分析蘇合香的化學(xué)成分[J].華西藥學(xué)雜志，2005，20（5）：409.

[7]姚發(fā)業(yè)，邱 琴，崔兆杰，等.蘇合香揮發(fā)油的化學(xué)成分[J].藥物分析雜志，2005，25（7）：859.