重慶某豬場豬圓環病毒與附紅細胞體混合感染的診治

丁孟建，黃坤英，楊曉偉

（1.西南大學榮昌校區動物醫學系，重慶 榮昌402460；2.重慶市榮昌縣河包鎮人民政府，重慶 榮昌402460）

2011年4月中旬，重慶大足縣某千頭豬場豬群發病，開始表現2頭豬胸、背及腰部皮膚炎癥，疑似螨蟲感染或蚊蟲叮咬，口服伊維菌素無效，15日內病情蔓延至全群，大劑量使用磺胺藥物后病情更加嚴重，相繼死亡母豬5頭，育肥豬14頭，另有30多頭病危。據養殖戶介紹：該場免疫疫苗有豬瘟細胞苗、O型口蹄疫疫苗、偽狂犬基因缺失苗和藍耳滅活苗，未免疫PCV2苗。筆者親身經歷，對該病診斷情況報告如下，以期對臨床豬病防治有幫助。

1 材料與方法

1.1 材料 出診到養殖場前腔靜脈采取1頭病危母豬和2頭發病育肥豬血液，各加入2mL血液至抗凝管和4mL血液至凝血管中，4℃保存備檢。

檢測試劑：瑞氏染色液為西南大學榮昌校區動物醫學系微生物教研室配制；DNA提取試劑盒、Taq酶、PCR緩沖液（含 Mg2＋）、dNTP、引物P1和P2為上海生工生物工程技術服務有限公司產品。

試驗儀器：Mastercycler PCR儀，購自Eppen－dorf公司；凝膠分析成像系統（Touching 2002），購自上海天呈科技有限公司。

引物合成：參考文獻1于上海英駿生物技術有限公司合成以PCV－2的ORF1為目的基因的上游引物：P1：5′－CGAGAAAGCGAAAGGAACAGA－3′；下游引物：P2：5′－GGTAACCATCCCACCACTT－3′，預計PCR擴增產物長度為371bp。

1.2 方法 按常規方法進行臨床檢查和尸體剖檢，記錄眼觀病變。

顯微鏡檢查：將采集的3頭豬的抗凝血分別進行瑞氏染色，顯微鏡下觀察細胞形態。

DNA提取：將采集的病豬的全血5 000r／min離心8min，分離血清。按DNA提取試劑盒使用說明書提取血清DNA，－20℃保存待測。

PCR檢測：PCR反應體系為25μL，DNA模板添加量為0.3μL。PCR反應程序為：94℃預變性3 min，94℃變性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，35個循環，最后72℃延伸10min。PCR產物經12g／L瓊脂糖凝膠電泳于凝膠分析成像系統中觀察結果。

2 結果

2.1 臨床癥狀 發病育肥豬突然減食或廢食，消瘦。體溫高達40℃～41.5℃，并稽留不退，一般持續3～7d。鼻、耳、四肢、胸腹部及股內外側等處呈紫紅色，腰背處可見綠豆大至黃豆大隆起于皮膚表面的紅紫色丘狀斑點。母豬皮膚蒼白或黃染，尿液似濃茶樣，暗紅色。眼瞼周圍紅腫，被大量眼分泌物粘連。

2.2 病理變化 全身淋巴顯著腫大、蒼白，特別是肺門、腹股溝等處淋巴結腫大2～3倍，腸系膜淋巴呈繩索狀腫大；全身脂肪黃染，肝腫大呈土黃色、質脆，膽囊腫大，內充滿綠色黏稠膽汁；胸膜和心包積液、色淺黃，血液稀薄，不易凝固；腎腫大，表面有出血點，擠壓腎盂從輸尿管中流出5～10mL乳白色細砂樣混有少量黏液的顆粒。

2.3 涂片觀察 血液涂片用瑞氏染色，鏡檢發現3份病料中2份（1份母豬、1份育肥豬）紅細胞表面呈鋸齒狀，附著大量似星芒狀的藍色小體，嗜酸性粒細胞增多（圖1）。

2.4 PCR結果 所取3份樣品中2份（育肥豬）出現與預期大小（371bp）一致的目的條帶，為陽性（圖2），另外1份（生產母豬）為陰性。

3 分析討論

3.1 根據臨床癥狀、剖檢、血液涂片和PCR檢測結果陽性，可知本次疫情生產母豬是附紅細胞體感染，育肥豬是由圓環病毒與附紅細胞體混合感染引起的。豬附紅細胞體與圓環病毒病在臨床中較為常見，在上海、浙江、江蘇、廣東、廣西、云南、寧夏等地均有該病發生，可引起哺乳動物（豬、牛、羊、兔、犬、狐）和家禽（鴨）發病［2－4］。2011年4月～9月，本診斷中心共確診豬病63例，其中豬附紅細胞體病12例，圓環病毒病16例，分別占診斷豬病中的19.0%和25.4%，同比其他季節發病增加，這可能與夏、秋季天氣炎熱、吸血昆蟲滋生及母豬分娩等應激有關。因此，控制該病關鍵在于夏、秋兩季，做好滅蚊、滅蠅、防暑、減少應激及PCV－2病疫苗免疫接種等飼養管理工作。

3.2 臨床中豬圓環病毒病引起的皮炎、腎炎綜合征應及時與豬體表寄生蟲或蚊蟲叮咬引起的皮炎相區分，做到提早診斷，隔離病豬。圓環病毒病引起的皮炎主要表現在豬背部、腰部、胸部、前后肢內側、腹部出現隆起于皮膚表面的紅紫色丘狀斑點，無癢感，體溫升高，食欲降低，全身消瘦；體表寄生蟲或蚊蟲叮咬引起的皮炎表現為患部瘙癢、檫圈，局部脫毛，無明顯的體溫升高、食欲降低和消瘦癥狀，口服伊維菌素或滅／驅蚊多能治愈。

3.3 磺胺類藥物對附紅細胞體及血液原蟲等具有較好治療效果，也可控制繼發感染，按理是治療該病較理想的藥物，但由于該藥長期使用易導致腎臟或輸尿管尿酸鹽沉積，對腎影響較大。當附紅細胞體與圓環病毒混合感染時，由于圓環病毒可引起皮炎、腎炎綜合征，此時若再用磺胺類藥物，筆者認為不是很科學，易導致病情加重。本病例，我們使用土霉素、維生素K1、維生素K3、黃芪多糖拌料全群口服；發病嚴重的豬肌肉注射附血康（20%土霉素）、維生素K1、維生素K3、維生素B12、ATP和肌苷，一個療程后病情得到有效控制。

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［3］曹興萍，張以芳，楊培昌，等.云南省楚雄州豬圓環病毒2型（PCV－2）感染的血清流行病學調查［J］.中國獸醫雜志，2008，44（2）：38－41.

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